表达猪表皮生长因子重组乳酸乳球菌的构建及其对结肠炎模型小鼠肠道损伤的修复作用

本试验旨在构建表达猪表皮生长因子(pEGF)的重组乳酸乳球菌(L. lactis),并评价其对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎模型小鼠肠道损伤的修复作用,为将表达pEGF重组L. lactis应用于断奶仔猪肠道保护提供重要的依据。设计含有3个拷贝数的pEGF同向串联基因序列,并进行L. lactis密码子优化,将合成的3pEGF基因片段与表达载体pNZ8148连接,构建表达pEGF的重组L. lactis。选用32只BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只。采用4%的DSS建立小鼠结肠炎模型,各组小鼠具体处理如下:正常对照组,试验第1～12天饮用自来水;DSS模型对照组,试验第1～7天饮用4%的DSS水溶液,第8～12天饮用自来水;L. lactis组,饮水按照DSS模型对照组处理,同时每天口服1×1012CFU L. lactis,连续12 d;重组L. lactis组,饮水按照DSS模型对照组处理,同时口服1×1012CFU表达pEGF的重组L. lactis,连续服12 d。结果显示:1)通过序列鉴定可知,3pEGF基因成功转入L. lactis;Western blot分析表明所表达的pEGF能与特异性抗体相结合,初步证明该重组蛋白具有活性。2)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠长度显著降低(P0.05);与DSS模型对照组相比,重组L. lactis组小鼠结肠长度显著增加(P0.05)。3)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠闭锁蛋白(occludin)浓度显著降低(P0.05),D-乳酸(D-LAC)浓度显著升高(P0.05),二胺氧化酶(DAO)活性极显著升高(P0.01);与DSS模型对照组相比,重组L. lactis组小鼠结肠occludin浓度显著升高(P0.05),D-LAC浓度显著降低(P0.05),DAO活性极显著降低(P0.01)。4)与正常对照组相比,DSS模型对照组小鼠结肠白细胞介素-10(IL-10)浓度极显著降低(P0.01),白细胞介素-4(IL-4)浓度显著降低(P0.05),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度极显著增加(P0.01);与DSS模型对照组相比,重组L. lacits组小鼠结肠IL-10浓度极显著增加(P0.01),IL-4浓度显著增加(P0.05),TNF-α浓度有降低的趋势。由此可见,本试验成功构建了表达pEGF的重组L. lacits,重组pEGF具有良好生物活性;小鼠口服表达pEGF的重组L. lacits可抑制结肠的缩短,改善结肠结构和通透性,调节细胞因子浓度到达正常水平,这说明表达pEGF的重组L. lacits维护了肠道屏障功能的完整性,对损伤的肠道具有一定修复作用。     

蜂蜜醋蛋治病效果好(续)

<正>(续2013年第11期第38页)3.8呼吸系统疾病例1.韩某,男,67岁,黑龙江农科院绥化农科所离休干部。患气管炎、肺气肿,腿脚麻木,行走不便。服了10多枚蜂蜜醋蛋后,肺气肿、气管炎、哮喘病症减轻,咳痰少了,走路时腿不再发颤,头也不再晕,也不用张口喘气了。例2.乏某,男,61岁,家住广西南丹金城江大厂办事处。患心口疼、失眠、腰椎、颈椎骨质增生、痔疮等多种疾病。吃蜂蜜醋蛋2枚后,上述疾病都好     

棒杆病菌的防治

<正>棒杆病菌是由棒杆菌属的细菌所引起的多种动物的一些疾病的总称。各种动物的棒杆菌病是由不同种类的棒杆菌所引起,因此临诊症状也不完全相同。但一般以某些组织器官发生化脓性或干酪性的病理变化为特征。1.病原本病病原属于棒杆菌科(Corynebacteriaceae)(Corynebacterium)的一类多形态细菌。由球状至杆状,较长的菌体一端或两端膨大呈棒状。单在或成栅状或成丛     

家兔常见皮肤病的防治

<正>家兔常见的皮肤病有兔脚皮炎、兔螨虫病和兔真菌性皮肤病等。1脚皮炎家兔脚底部出现破皮、损伤、炎症和化脓性感染等症状的一种疾病。1.1病因主要是由于家兔长期呆于兔笼内,脚底部皮肤被笼底的粗糙不平或尖锐异物刺伤、刮伤,继发细菌感染后发生化脓性或溃疡性炎症。还有的种兔因体型大,长期在无竹笼底板的铁丝上站立,因铁丝较细,使脚底单位面积承载重量过大,长期这样引起兔脚底皮肤出现压迫性炎症。     

可视环介导恒温扩增技术检测实验猴小肠结肠炎耶尔森菌

本研究在传统环介导恒温扩增反应体系中引入羟基萘酚蓝指示剂,对反应体系进行高温-低温前处理和添加甜菜碱等优化措施提高试验敏感性,液面覆盖矿物油降低气溶胶污染,据此建立的猴小肠结肠炎耶尔森菌可视LAMP检测方法结果判定直观明了,敏感度为6 CFU/反应,无非异性。     

一例鸡溃疡性肠炎的诊治

该病是由大肠梭状芽胞杆菌引起的鸡、火鸡、鸽子等禽类急性高度致死性传染病。病理上以肝脏、脾脏、肠道出血、溃疡为主要特征。以3～5周龄雏和8～12周龄幼鸡易感。具发病率一般为5%～70%,死亡率达50%～80%,有的甚至高达100%。     

犬角膜炎的自身血治疗法

角膜是眼球最前部的一层无血管透明的眼外膜,易受到外伤和感染弓I起发炎。角膜炎是角膜组织发生炎症的总称。犬常见的角膜炎可分为表层性、深层性（实质性）、溃疡性和干性角膜炎。     

犬口腔炎的诊治

口炎是口腔黏膜炎症的总称,包括齿龈炎和舌炎,以流涎及口腔黏膜潮红、肿胀为主要临床特征。按炎症的性质分为卡他性、水疱性和溃疡性口炎,以卡他性口炎为多见。     

芹菜发酵液对小鼠溃疡性结肠炎的保护作用研究

本试验旨在研究发酵前后芹菜汁的主要功能成分变化和芹菜发酵液对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）的防治及免疫调节作用。选取50只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及低、中、高浓度芹菜发酵液组,每组10只。按10 μL/g BW的剂量标准给空白组和模型组小鼠灌胃无菌生理盐水,其他组小鼠则灌胃不同浓度的芹菜发酵液,持续7 d。从第8天开始,除空白组自由饮用无菌水外,其余组连续7 d自由饮用3% DSS溶液;在此过程,每日称量体重,进行疾病活动指数（DAI）评分。在第14天,通过摘眼球取血法获得全血,随后脱颈处死小鼠,解剖取出结肠组织测量长度并通过苏木素-伊红（HE）染色法制作病理切片,进行病理学分析。以流式细胞仪分选技术检测外周血中CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）和IL-10的含量。结果表明：①芹菜汁经发酵后,总酸、总糖、总多酚、类黄酮、维生素C和超氧化物歧化酶（SOD）等多种活性成分的含量均显著增加（P<0.05）。②与模型组相比,芹菜发酵液高浓度组能减少DSS引起的小鼠体重损失（P<0.01）、结肠缩短（P<0.01）和DAI降低（P<0.05）。③组织病理学分析结果表明,各发酵液组的UC症状均得到不同程度改善,肠腺结构相对完整,杯状细胞轻微减少,仅有少量淋巴细胞和中性粒细胞浸入。④流式细胞仪分析结果显示,相较于模型组,发酵液组全血CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值极显著升高（P<0.01）。⑤ELISA检测结果显示,与模型组相比,芹菜发酵液组的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量极显著下调（P<0.01）,IL-10的含量极显著上调（P<0.01）。综上,芹菜汁经发酵后主要功能活性成分均得到显著提高,并且发酵芹菜液对DSS诱导的小鼠UC具有一定的防治和免疫调节作用,其作用机制可能与维持外周血中CD4⁺与CD8⁺T淋巴细胞平衡,以及抑制促炎症因子（TNF-α、IL-6和IFN-γ）表达,促进抗炎症因子（IL-10）表达有关。     

猪慢性霉菌毒素中毒的诊断与防治

2010年9月份下旬,普兰店市墨盘乡庆某型猪场发生以育肥猪和母猪急性结肠炎、腹泻、食欲减退为主要症状的疫病,发病率25%,死亡率0.7%,病淘率1.5%。根据临床症状,病理剖检结合病史调查诊断为猪霉菌毒素中毒,报告如下。1临床症状