牛冠状病毒交叉引物扩增快速检测方法的建立

牛冠状病毒(BCoV)引起犊牛腹泻,对养牛业造成极大危害。本研究采用交叉引物扩增(CPA)方法和核酸检测装置相结合,建立了BCoV的可视化快速检测方法。结果表明,CPA体系Mg²⁺最佳物质浓度为2.0 mmol/L,甜菜碱最佳物质浓度为0.4 mmol/L,d NTPs最佳物质浓度为0.6 mmol/L,Bst DNA聚合酶最佳浓度为1.5 U/μL,60℃为最佳反应温度,60 min为最佳反应时间。采用CPA BCoV-N反应体系同时检测沙门菌、大肠埃希菌、弯曲杆菌、牛冠状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒等犊牛腹泻相关病原,层析试纸条检测显示只有牛冠状病毒呈现检测线,未出现交叉反应。结果显示,CPA BCoV-N具有较高的特异性,CPA检测BCoV不需要昂贵的PCR仪器,简单的水浴或培养箱即可完成DNA扩增,封闭式核酸检测装置避免了气溶胶污染,对结果的判断更加直观客观,是一种简便、快速、灵敏的BCoV检测方法。     

用主成分分析法研究腹泻仔猪血清生化指标

为了研究腹泻对仔猪血清生化指标的影响,本试验采集了20头腹泻仔猪(7~8日龄)和10头健康仔猪(与腹泻仔猪同日龄、同性别)的粪便和血清。荧光定量PCR法对粪便进行病原学检测,对采集的血清用血生化分析仪进行检测,并利用主成分分析法对其结果进行分析。结果,(1)20头腹泻仔猪粪便的猪流行病腹泻病毒检测结果均为阳性。(2)十二项血清生化指标被转化成了综合性更强的4个主成分,根据这4个主成分进行的聚类分析的结果和临床采集样品的分类结果一致。(3)腹泻仔猪的血清球蛋白、尿素和肌酐水平显著升高(P0.05)。结果表明,由猪流行性腹泻病毒引发的腹泻,可能导致仔猪体内的蛋白质代谢紊乱、肝脏和肾脏的机能受损。     

淫羊藿总黄酮提取方法的比较研究

为了比较不同提取方法对中药淫羊藿总黄酮含量的影响,试验采用水煎、超声波和回流法进行总黄酮的提取,采用紫外分光光度法测定其含量。结果表明:回流组和超声3组总黄酮含量极显著高于超声2组、超声1组和水煎组(P<0.01),超声2组总黄酮含量极显著高于超声1组和水煎组(P<0.01),超声1组总黄酮含量极显著高于水煎组(P<0.01)。说明采用回流法(用80%乙醇回流)提取淫羊藿总黄酮的提取率最高,水煎法提取率最低。     

中兽药治疗奶牛胎衣不下的系统评价

为评价中兽药治疗奶牛胎衣不下的临床疗效和安全性,通过检索电子资料库,包括中文生物医学数据库及外文文献检索Pub Med、MEDILNE及Cochrane图书馆(建库至2013年),纳入比较中兽药治疗奶牛胎衣不下随机或半随机对照试验,进行异质性检验和Meta分析分析。共纳入7个随机或半随机对照试验,质量评价结果表明,所纳入文献的方法学质量较低。纳入的7项研究显示中兽药疗法能够有效促进滞留胎衣的完全自主排出(OR=8.08,95%CI 3.65~17.60,Z=5.19,P0.000 01);2项研究显示,中兽药疗法可显著缩短患胎衣不下奶牛产后至首次发情(配种)时间(Z=2.95,P=0.003);2项研究显示中兽药治疗胎衣不下奶牛可明显提高受试奶牛在第一情期的受胎率(Z=2.20,P=0.03);4项研究显示中兽药治疗胎衣不下奶牛可显著提高受试奶牛产后3个情期内受胎率(Z=3.06,P=0.002);仅有1篇文献报道了不良反应。根据现有证据,中兽药疗法在促进滞留胎衣的完全自主排出和改善繁殖性能方面优于西药/综合疗法的治疗效果。但由于纳入研究数量少且质量不高,因此其论证强度较弱,尚需更多高质量研究以增加论证强度。     

没有中兽医药学教育就没有中兽医药学的明天

与西兽医药学的对抗疗法相比较,中兽医药学以整体观念、平衡机体的独特魅力,被愈来愈多的人所接受,在美国及西方许多国家的动物主人及兽医寻求中医整体疗法。然而,中国兽医却偏爱使用西医药治疗疾病,尤其是中兽医药学面临着后继乏人与学术异化等困扰。本研究对其进行复杂性分析后,科学认识中兽医药学的特点与优势,为促进其健康发展与发挥更大作用,关键是人才培养,没有中兽医药学教育就没有中兽医药学的明天。     

芩连液与白虎汤对气分证家兔胃肠黏膜的病理影响比较

为了比较自拟方芩连液和白虎汤对气分证动物模型的治疗效果,试验通过静脉注射内毒素(LPS)复制家兔气分证模型,并在2种药物治疗前后分别观察了家兔胃肠道黏膜组织的病理变化以及测定了血清免疫球蛋白(IgA)含量。结果表明:静脉注射LPS能致家兔胃肠道黏膜组织产生明显病理损伤,血清IgA含量上升;经白虎汤和芩连液治疗后胃肠道黏膜组织病理损伤显著减轻,但血清IgA含量仍然显著高于正常水平。说明白虎汤和芩连液对LPS引起的胃肠道黏膜组织损伤都具有显著的治愈效果,而对血清IgA的含量无显著影响。     

黄芪多糖提取工艺研究进展

为进一步了解和研究黄芪多糖不同提取工艺的优缺点,将近年来有关黄芪多糖的溶剂法、酶解法、物理法相关提取工艺的研究报道进行综述。经比较后发现,基于物理原理的微波、超声波辅助提取法、高压脉冲法、组织破碎提取法等新技术,较传统热水浸提法、碱提法、碱醇提取法和酶解法在提取率、提取时间、纯度、能源消耗等方面有较大优势,并且发现不同方法的协同提取也能明显提高黄芪多糖的提取率。虽然目前这些技术没有被广泛的采用,但是随着科技的发展,提取工艺成本的下降,应用于黄芪多糖的高效、节能的提取技术会逐步成为主流。     

全抗原MQCA-BSA耦联比HPLC测定方法的建立

为了建立一种准确、可靠的测定人工抗原耦联比的方法,试验应用高效液相色谱(HPLC)法采用Waters 2695分离系统、2489紫外检测系统,流动相为甲醇、水之比为60∶40,柱温为30℃,流速为1.00 mL/min,检测波长为320 nm,测定全抗原合成中游离3-甲基喹啉-2-羧酸(MQCA)的含量。结果表明:游离MQCA的线性范围为0.2～128.0μg/mL,线性方程为A=17 100 C+16 667(R2=0.999 5)。说明本方法准确、可靠,适用于人工抗原偶联比的测定。     

蛇莓的化学成分、药理作用和应用

蛇莓属于蔷薇科植物,全株供药用,有散瘀消肿、收敛止血、清热解毒之功,现代研究发现,在医学上,蛇莓可用作抗肿瘤、抗炎、抑菌药物;在农业上,可作为植物农药、肥料等。本文主要从蛇莓的产地生境、化学成分、药理作用和应用等方面进行综述,在此基础上对蛇莓的研究前景进行展望,为进一步研究中草药蛇莓提供方向。     

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了BVDV的RT-PCR检测方法。该方法从BVDV标准毒株NADL中扩增出了279bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞等的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1×TCID50。提取9份细胞毒总RNA后,进行一步法RT-PCR扩增可获得一致的检测结果,说明该方法重复性很好。应用该方法对45份临床疑似患牛的样品进行检测,结果检出4份阳性,表明该方法具有较好的临床应用性,且检测结果与参考实验室检测结果完全相符,可用于BVDV的快速诊断。