一类新型高效驱蚊复方精油的研究

[目的]为新型驱蚊产品的开发、生产与应用提供理论依据和试验数据。[方法]对夜来香挥发油提取物中驱蚊成分进行分离与提纯,并对其产品开发进行研究。[结果]从夜来香提取到15.92 g挥发油,提取率为3.16%。夜来香挥发油对蚊虫有较好的杀伤效果。复方精油具有高效的驱蚊性,具有良好的市场应用价值。复方精油可以直接涂于皮肤上,对皮肤无刺激作用。[结论]新型复方精油可制成固体空气清新剂。     

香豆素-3-甲酸芳酯的无溶剂快速合成

在无溶剂的条件下,香豆素-3-甲酰氯与等当量的各种酚钠在室温下研磨可快速地得到香豆素-3-甲酸芳酯(1a～1k)。该法与传统的溶液法相比具有无有机溶剂污染,反应速度快,产率高和后处理简单等诸多优点。     

异荭草苷通过MAPK/ FoxO信号通路减轻LPS 诱导的RAW 264.7细胞炎症反应

为了研究异荭草苷(Isoorientin, ISO)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制,将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、模型组(LPS 1 μg·mL^-1)和异荭草苷 (ISO 2.5~40 μg·mL^-1+LPS)给药组。各组细胞培养24 h后,MTT法检测ISO对RAW 264.7细胞毒性,Griess法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)的含量,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量,qRT-PCR方法检测环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平,蛋白质印迹分析法测定细胞中COX-2、JNK、p-JNK、p38、p-p38、FoxO1和FoxO3蛋白的表达。结果表明,与LPS模型组比较,ISO显著抑制LPS诱导的TNF-α(P<0.001)和NO(P<0.01)的产生,且未见其细胞毒性。此外,ISO以剂量依赖的方式显著抑制RAW 264.7细胞COX-2基因(P<0.001）和蛋白(P<0.05)的表达。蛋白质印迹分析显示,ISO显著抑制MAPK信号通路中p-JNK和p-p38的磷酸化,并减少FoxO1/3的核转位。综上所述,ISO可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,其作用机制可能与其在MAPK/FoxO信号通路中发挥调节作用有关。     

羊栖菜硫酸多糖的抗凝血活性研究

[目的]探讨羊栖菜硫酸多糖的抗凝血活性。[方法]从水提液中提取羊栖菜硫酸多糖,通过体内和体外的抗凝血试验系统地研究其抗凝血活性。[结果]利用葡聚糖凝胶G-75分离纯化所提取的羊栖菜硫酸多糖F1,得到5个不同组分。在2.0 g/L的受试条件下,组分F12抗凝血活性的最强,其延长小白鼠的出血时间和凝血时间、大白兔的凝血活酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间分别为粗多糖F0的174.2%、153.7%、311.9%1、57.8%和218.2%。羊栖菜硫酸多糖F1与抗凝血效果有显著的量效关系。在受试条件下(浓度为0.5~2.0g/L),多糖的浓度与小白鼠的抗凝血指标、与大白兔体外抗凝血指标之间均呈现良好的直线回归关系。[结论]该研究为羊栖菜类保健品及临床药物的开发提供理论基础。     

壳寡糖对三氧化二砷致大鼠肝细胞毒性的保护作用

为研究壳寡糖(COS)对三氧化二砷(ATO)致大鼠正常肝细胞(BRL-3A)毒性的保护作用,测定三氧化二砷和壳寡糖对BRL-3A细胞的增殖抑制率、三氧化二砷诱导壳寡糖预处理BRL-3A细胞的细胞存活率、细胞内乳酸脱氢酶(LDH)水平、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和线粒体膜电位(MMP)的变化.结果表明,三氧化二砷对BRL-3A细胞的半数抑制浓度(IC50)为19.8 μmol,L-1,壳寡糖浓度低于230 μmol·L-1时对细胞并未产生损伤.壳寡糖预处理BRL-3A细胞24 h,三氧化二砷再处理细胞24 h,通过检测以上指标表明壳寡糖预处理能够降低LDH水平至176.23％±5.87％,从而降低三氧化二砷引起的细胞毒性;壳寡糖可显著抑制三氧化二砷引起的脂质过氧化对机体造成的损伤作用,MDA相对释放含量降低至191.91％±2.89％;壳寡糖显著提高了抗氧化酶GST、SOD和CAT的活性,分别提高至86.20％±1.41％、90.09％±1.33％和61.29％±0.21％,提高细胞的抗氧化能力,降低三氧化二砷引起的细胞氧化应激损伤;壳寡糖预处理可减缓三氧化二砷引起的线粒体膜电位的降低,降低三氧化二砷对细胞的线粒体产生的伤害.壳寡糖对三氧化二砷引起的大鼠肝细胞的细胞毒性损伤起到了有效地保护作用.     

副溶血弧菌耐热直接溶血毒素的急性毒性研究

为研究耐热直接溶血毒素(TDH)对实验小鼠的急性毒性,经腹腔注射实验小鼠不同浓度梯度的TDH(42.0、19.5、9.1、4.2和1.9mg·kg~(-1)体重,对照组设为PBS),连续观察14d,记录各组小鼠的死亡情况及生理反应。实验终止时进行大体解剖,摘取心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏观测脏器指数,断尾采血并计数血细胞。结果表明,TDH对昆明种小鼠的半数致死量LD_(50)为11.0 mg·kg~(-1)体重,小鼠的死亡主要集中发生在注射TDH后的72 h内,并且伴随着腹泻现象。各组存活的实验小鼠在注射TDH后的第5天后,精神状态基本恢复,正常进食进水。各组小鼠脏器未见明显炎症反应,小鼠血液中红细胞与白细胞数量也未见统计学差异。TDH的毒性靶器官是心脏、肺、肾脏、脾脏、胃和肠。TDH对小鼠的半数致死量和毒性靶器官及病理学表现可为TDH的进一步实际应用及研究提供科学的依据和资料。     

壳寡糖对黄曲霉毒素B1诱导大鼠肝细胞毒性损伤的干预作用

为了研究壳寡糖（COS）对黄曲霉毒素B1（AFB₁）诱导大鼠肝细胞（BRL 3A细胞）毒性损伤的干预作用。采用CCK-8法分别测定AFB₁对细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）和COS对细胞的无损害作用浓度；用试剂盒检测COS预处理细胞6 h后再加入AFB₁继续培养24 h的细胞存活率、活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性和细胞凋亡率；通过Real-time quantitative PCR（RT-qPCR）测定Nrf2、Keap1、Ho-1、Nqo1、Bax和Bcl-2基因的mRNA相对表达量；最后通过RNA-seq研究分析差异表达基因的层次聚类和富集途径。结果：AFB₁对BRL 3A细胞的IC₅₀为15.86 μmol/L，COS浓度小于125 μmol/L时不会对细胞造成毒性损伤；COS可以缓解AFB₁引起的细胞内ROS水平和MDA含量升高，增强SOD和GST酶活性，进而提高细胞自身的抗氧化能力，降低细胞凋亡率；AFB₁可引起促凋亡基因Bax的显著表达（P<0.05），并显著降低Nrf2、Keap1、Ho-1、Nqo1的转录水平（P<0.05），而COS预处理则能显著提高Nrf2、Keap1、Ho-1、Nqo1基因的表达（P<0.05），显著降低Bax的表达水平（P<0.05）；在RNA-seq的富集途径结果中，COS还可能通过细胞色素P450对外源物质的代谢作用、药物代谢-细胞色素P450和p53信号通路途径来缓解AFB₁诱导的细胞毒性损伤（P<0.05）。结果表明：COS预处理对AFB₁诱导大鼠肝细胞的毒性损伤具有干预作用，其机制可能与Nrf2信号通路、细胞色素P450对外源物质的代谢作用、药物代谢-细胞色素P450和p53信号通路有关。     

斑马鱼应用于肝损伤疾病模型的研究进展

由于斑马鱼细胞组成、同源基因，免疫反应，药物代谢等方面与人类相比具有高度保守性。再加上斑马鱼体积小，产量大，适合被基因编辑等特点，适合于高通量的药物筛选。所以斑马鱼和斑马鱼胚胎常被用来模拟发育缺陷或化合物诱导的肝脏疾病。对斑马鱼作为肝脏疾病模型的优点，以及斑马鱼模型在免疫反应，药物代谢等方面的与人类的相似性进行综述。归纳了目前一些针对不同因素开发的斑马鱼模型及其相关病理机制以及相关药物筛选，并简要分析了其与哺乳动物模型的差异及优势，以期对肝脏疾病的药物筛选有所帮助。     

紫草素可抑制在RAW264.7巨噬细胞和斑马鱼幼虫中由脂多糖诱导的炎症反应

【目的】通过巨噬细胞和斑马鱼这2种模型来评价紫草素的抗炎作用。【方法】首先使用细胞计数试剂盒检测紫草素对细胞活性的影响，然后将巨噬细胞分为空白对照组、脂多糖组（（LPS 1μg/mL）、LPS(1μg/mL)+紫草素（0.3、1.5、3μg/mL））组和紫草素（3μg/mL）组。采用一氧化氮产生法和酶联免疫吸附法检测促炎因子和促炎细胞介质的含量。在斑马鱼试验中，检测紫草素对斑马鱼胚胎的毒性，并通过存活率、体型、心率和体长等结果，选择合适的紫草素浓度（0.001、0.01、0.1μg/mL）进行后续试验。在转基因斑马鱼卵黄囊中注射2 nL LPS(2 mg/mL)建立炎症模型，测定紫草素处理后卵黄囊中2种细胞（巨噬细胞和中性粒细胞）的募集情况、测定紫草素对脂多糖诱导的斑马鱼心跳的影响。【结果】在细胞研究中，与仅经LPS处理的细胞相比，紫草素的加入可以减少促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的积累。同时，紫草素还能抑制一氧化氮的分泌量，抑制率可达50%。斑马鱼的研究表明，紫草素有效地减少了卵黄囊中两种细胞的大量聚集，最高抑制率为73.3%，也减轻了LPS引起...     

天然产物治疗炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病是一组慢性胃肠道炎症性疾病，临床表现为腹胀、腹泻、腹痛，有时甚至出现血便。目前用于治疗炎症性肠病的药物有氨基水杨酸、糖皮质激素和免疫抑制剂等。这些药物可以减轻或延缓炎症性肠病的发生和发展，但在长期使用后，一些患者可能会出现某种程度的毒副作用。近年来研究发现许多天然产物具有明显的抗炎作用，它们可以降低炎症性肠病的复发率，提高治疗安全性。系统综述了来自几种植物、动物和微生物天然产物的抗炎活性。