H9N2禽流感病毒陕西分离株HA基因的遗传变异分析

【目的】对H9N2禽流感病毒HA基因全序列进行分析,了解H9N2禽流感分离毒株HA基因的遗传变异情况。【方法】根据GenBank已发表的H9N2毒株的基因序列,设计了2对H9N2禽流感病毒HA基因特异性引物,运用RT-PCR方法对XL、LF和WN分离株进行了扩增,然后将PCR产物送出进行测序,用DNAstar 5.0软件对测序结果进行了分析。【结果】XL、LF和WN 3株H9N2分离株间HA基因的核苷酸同源性为99.7%~99.9%,推导氨基酸的同源性为99.1%~99.6%;分离株与参考毒株HA基因核苷酸的同源性为96.2%~99.0%,推导氨基酸的同源性为96.2%~98.6%。通过对3个H9N2分离株间HA基因核苷酸序列的比较,发现共有5个位点的核苷酸发生突变,其中4个位点核苷酸的改变导致相应的氨基酸发生突变。HA蛋白的7个受体结合位点比较保守,但是其在551~553位缺失了潜在的糖基化位点。【结论】3株H9N2分离株裂解位点氨基酸序列完全符合低致病性禽流感的特征RSSR↓G,但是LF裂解位点附近333位脯氨酸(Pro)突变为组氨酸(His),即非极性氨基酸向极性带正电氨基酸(碱性氨基酸)转变,裂解位点的变化可能是H9N2禽流感病毒生物学特性改变的分子基础。     

农作物主要病虫害发生规律及防治

水稻、小麦、玉米等是吉林省的主要粮食作物及经济作物。近几年经常遭受苗期主要病虫的为害,一般年份,受害都在百分之十左右,重发生年,有的地块受害在30%以上,使其产量受到不同程度的损失,成为影响产量的一大因素。因此,加强这些作物苗期主要病虫害的防治,是确保作物稳产、高产的重要保证。     

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其应用

参照国内外已发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）的ORF1的基因序列及其相关的PCR检测方法设计一对引物,扩增目的片段为493bp。通过对PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了一种PCV-2的PCR检测方法。应用此方法对临床样品进行了检测,阳性检出率达51.18%。该方法具有快速、敏感、特异等优点,可用于PCV-2的检测和流行病学调查等。     

宿城区秋延迟辣椒生产效益分析及主要栽培技术

文章从效益分析、选择良种、培育壮苗、适时定植、大田管理和病虫害防治等方面总结了宿城区秋延迟辣椒生产效益及主要栽培技术,以期为该技术在当地推广提供参考。     

影响我县玉米产量的因素及提高玉米产量的措施

影响玉米产量的因素主要是旱灾、地力、农田基础设施薄弱、技术性因素,针对这些因素,提出提高产量措施。     

空间飞行对不同紫花苜蓿品种叶片显微结构的影响

利用神舟3号飞船搭载的4个紫花苜蓿(Medicago sativa L.)品种的种子,返回后对搭载组和对照组植株叶片显微结构进行分析。结果表明:4个品种叶片厚度均显著大于对照,叶脉突起度均显著小于对照(P<0.05);栅栏组织厚度显著大于对照(P<0.05);阿尔冈金的海绵组织厚度显著小于对照,其他品种均显著大于对照(P<0.05);与对照相比,德福的细胞结构紧密度、细胞结构疏松度与对照差异均不显著,阿尔冈金的细胞结构疏松度与对照差异不显著,其他品种细胞结构紧密度、疏松度与对照均有显著差异(P<0.05)。这些变异的产生可能影响其抗性表现,故可作为进一步抗性选育的依据。     

牛病毒性腹泻病毒陕西株的分离与NS5b基因序列测定

【目的】分离并鉴定陕西省牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)。【方法】采集腹泻犊牛的肠系膜淋巴结,处理后接种于MDBK细胞,盲传,逐日观察是否有细胞病变产生。采用病毒蚀斑技术对病毒克隆纯化后,提取其RNA,进行RT-PCR鉴定。将扩增的NS5b基因克隆入pMD18-T载体中,采用碱裂解法小量提取质粒,并对质粒进行EcoRⅠ和SalⅠ双酶切、SalⅠ单酶切及PCR鉴定,对阳性克隆进行核苷酸序列测定及分析。采用病毒蚀斑试验测定分离毒株的半数组织培养感染量(TCID50)。【结果】盲传4代后细胞出现典型、规律的细胞病变。RT-PCR扩增出预期长度(360 bp)的基因片段,核苷酸序列分析结果表明,所扩增的基因为牛病毒性腹泻黏膜病病毒NS5b基因,其与BVDV VEDEVAC株NS5b基因核苷酸序列有99%同源性。BVDV陕西株的半数组织培养感染量(TCID50)为3.6。【结论】成功分离了牛病毒性腹泻病毒陕西株,为陕西省BVDV的防治提供了理论依据。     

鸡新城疫病毒分离株F基因的分子特性分析

【目的】对新城疫病毒(NDV)分离毒株进行分子特征分析,了解免疫鸡群发生新城疫的原因。【方法】用非免疫鸡胚从病鸡肺脏中分离新城疫病毒;参考GenBank上发表的NDV的F基因序列设计引物,应用RT-PCR方法对新城疫病毒分离株进行扩增,并构建克隆载体,对阳性质粒测序后进行F基因核苷酸及推导氨基酸序列分析。【结果】从发病鸡群中分离到6株NDV,分离毒株间的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸同源性分别在99.6%~99.9%和99.1%~99.8%;分离毒株与参考毒株的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸序列同源性分别在83.2%~87.3%和90.2%~93.8%;分离毒株F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株的分子特征;6个分离株均属NDV基因Ⅶ型。【结论】NDV分离株的F基因已经发生明显变异,与La Sota、Clone-30、V4等常用疫苗株在遗传进化上的亲缘关系较远,这可能是免疫鸡群发生新城疫的重要原因之一。     

牛轮状病毒的分离及其RT-PCR鉴定

采用MAl04细胞从疑似轮状病毒腹泻犊牛粪样中进行轮状病毒分离，盲传4代后接种细胞出现明显细胞病变（CPE），对分离病毒进行核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳条带为4：2：3：2型，具备典型A群轮状病毒特征。依据NCBI等登录的牛轮状病毒的VPl基因序列设计一对引物，对其VPl基因进行克隆及序列分析，结果分离毒与国外牛轮状病毒分离株RF的核苷酸同源性为98．9％，与UK的核苷酸同源性为91．5％，证明分离毒株是一株牛轮状病毒。     

镇赉县水稻主要病害的识别诊断及防治技术

苗床立枯病、猝倒病，本田稻瘟病、叶枯病、纹枯病是镇赉县水稻的高发病害，也是影响镇赉县水稻产量的主要限制因素之一，目前这3种病害的防治成了镇赉县水稻生产中亟待解决的问题中的重中之重。