AcMNPV LEF-10形成难解离复合物的特性研究

【目的】将已经成功构建的AcMNPVlef-10表达载体在原核和真核表达系统中表达,研究其形成高分子复合物的特性,为揭示其高分子复合物的形成机理奠定基础。【方法】将先前成功构建的pTriEx-lef-10、pTriExlef-10-1-52、pTriEx-lef-10-27-78重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)和Sf 9细胞中诱导表达,产物经纯化、浓缩后,进行SDS-PAGE和Western blot检测分析;利用SDD-AGE技术估测LEF-10蛋白的分子质量;用透射电子显微镜分别观察原核和真核系统表达的LEF-10蛋白的外部形态。【结果】Western blot分析显示,LEF-10蛋白能形成高分子复合物,而C末端、N末端缺失和C末端融合GFP都可以阻断或部分阻断LEF-10高分子复合物的形成;苯酚-氯仿-异戊醇能部分打开LEF-10蛋白高分子复合体;利用SDD-AGE技术初步估测LEF-10高分子复合体分子质量集中在520~3 250ku;透射电子显微镜观察原核和真核系统表达的LEF-10,可见蛋白复合体大小不均一,呈现球形或者近球形。【结论】LEF-10蛋白在原核和真核表达系统中,都会形成高分子复合体,该复合体在强变性剂作用下,也不能完全打开,推测该复合体可能以共价键形式结合。     

设施栽培甜瓜品种对比试验

本研究选取7个品种甜瓜为试验材料，对比分析其在大棚设施栽培模式下的农艺性状（生育特性、田间长势、抗病性、果实外观性状和内在品质）及产量等，以期筛选出适宜临沂当地种植的最佳甜瓜品种。结果表明，7个供试品种的甜瓜在各指标性状上表现出一定差异，台湾玉菇、代号72、星甜20、耀世25 4个品种生育期适宜，田间长势好，抗病性强，果实外观和内在品质较佳，含糖量较高，产量稳定，综合性状表现较好，为优质、高产、高抗甜瓜品种，适合在临沂地区春季大棚种植。