一种适用于高通量基因分型的水稻 DNA样本制备技术研究

【目的】提供一种基于 96 孔板的水稻根部 DNA 提取技术,可显著提升 DNA 提取效率。【方法】 在 96 孔深孔板的每个孔中放入一粒萌发的种子,在深孔板下方对应放置 96 孔 PCR 板,在适当光温下促使水稻 根伸入 PCR 板中;当水稻幼苗发育至一叶一心时,将 PCR 板移至干冰与 95% 乙醇混合液体中,利用冷冻处理 捕获幼根;用改良的 TRIS-EDTA 法批量提取 DNA 并进行浓度和纯度检测。【结果】从播种到根部组织样品的 获取全部在 96 孔板中进行,实现了样本组织的批量获取及目标个体的精确对应。改良的 TRIS-EDTA 法提取 96 个水稻样本 DNA 的效率显著高于传统的 CTAB 法。【结论】基于 96 孔板的水稻根部组织批量获取及 DNA 高效 提取方法,对于提升水稻分子育种效率具有实践意义。     

磁性纳米颗粒负载质粒DNA的研究

【目的】研究磁性纳米颗粒(MNP)负载质粒DNA形成的纳米载体-基因复合物的生物物理学特性、负载形态与负载机理,为基于磁性纳米载体定向编辑技术的应用奠定基础。【方法】以MNP作为基因载体,与质粒DNA pRGEB32制备纳米载体-基因复合物MNP-pRGEB32,分析MNP负载、保护pRGEB32的能力,并对其粒度分布、Zeta电位、结合形态进行研究。【结果】MNP通过静电作用压缩、吸附、聚集pRGEB32,形成纳米载体-基因复合物。MNP能有效负载并保护pRGEB32。【结论】MNP可作为一种理想的基因转移载体。