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在构建了含伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)湖北株部分PK基因和gG基因转移载体的基础上,利用平端连接的方法将绿色荧光蛋白(GFP)的基因表达盒插入到缺失的部分,并在下游引入了1个多克隆位点,构建了重组转移载体KGDF。用限制性内切酶鉴定重组转移载体KGDF。根据质粒EGFP-C1中的GFP基因序列设计1对引物鉴定GFP表达盒插入的正确性。用脂质体转染试剂盒将KGDF和PRVFIB的基因组或病毒共转染BHK-21细胞,在荧光显微镜下将出现病变的荧光斑挑出得到重组病毒。将重组病毒扩大培养后提取基因组鉴定重组病毒中的GFP基因,并通过挑取病变的荧光斑的方法纯化重组病毒。 相似文献
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半坡式暖棚羊舍的设计与推广 总被引:1,自引:0,他引:1
在保护生态环境成为当今世界主流的今天,恢复草原植被,加强草原保护与建设,已同保护和建设生态环境有机地结合起来。草原禁牧、轮牧、牛羊退出草原,由放牧转向舍饲、半舍饲,是今后发展草食畜牧业的必由之路。舍饲的关键是必须修建适宜的圈舍。目前,我县推广使用的半坡式暖棚羊舍,设计科学,投资成本低,使用效果好,深受广大养羊户的欢迎。现将此型羊舍介绍给养羊户,供参考使用: 相似文献
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重组伪狂犬病病毒TK-/FMDV VP1的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
以伪狂犬病病毒(PRV)为载体表达其他病原体抗原蛋白是伪狂犬病疫苗研究的一个重要方向.本文以广东地方分离株(以下简称YA)为亲本株,用PCR方法得到同源左右臂,然后将重组转移载体和PRV YA的基因组共转染,用BUDR筛选出了表达口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)结构蛋白VP1的TK-重组病毒,用PCR和SDS-PAGE的方法对VP1蛋白进行了初步鉴定,并且对重组病毒的某些生物学特性进行了研究. 相似文献
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CFG桩意为水泥粉煤灰碎石桩,该工艺在粉土、砂土、粘土、杂填土以及淤泥质土等地基均有广泛而大量成功的运用。目前,高速铁路路基地段软土地基处理最常采用的方法即是CFG桩。CFG桩能否达到地基处理的目的,直接取决于其试桩的准确性。本文针对某高速铁路CFG桩试桩过程,浅析高速铁路CFG桩试桩工艺。 相似文献
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参照genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列,设计l对2型特异的引物,对广东省20个猪场送检的患病断奶仔猪的病料进行PCR扩增,并将PCR产物连接到pMDl8-T载体上,对重组质粒进行PCR、酶切鉴定及测序,最后发现PCR检测均为阳性。 相似文献
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