地高辛(DIG)和碱性磷酸酶标记cDNA探针检测PRSV

根据GenBank发表的PRSV(番木瓜环斑病毒)中国Sm株系的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,以美中红(Caricapapaya L.cv.Meizhonghong)带病样品的RNA为模板进行RT-PCR扩增,将其目的cDNA片段克隆到pGEM-Teasy质粒载体上。以重组质粒作模板,用PCR-DIG标记方法制备cDNA探针,另一种非放射性探针是经凝胶电泳分离、纯化cDNA片段,用碱性磷酸酶直接进行标记。利用地高辛(DIG)标记和碱性磷酸酶直接标记的cDNA探针核酸分子杂交及RT-PCR方法对PRSV进行了检测。结果表明,(1)测序结果表明美中红No.2序列与中国优势株系Sm的同源性为94.7%;(2)DIG标记的3种cDNA探针(861,455和215bp)对样品的总RNA检测结果一致,且861bp的探针杂交斑点最为清晰,上述核酸杂交结果与RT-PCR检测结果相符,核酸分子杂交检测的灵敏度和特异性能满足常规检测的需要;(3)碱性磷酸酶直接标记861bp的cDNA探针可进行PRSV的斑点杂交检测,可获得有效的杂交结果;(4)DIG标记探针对叶脉进行了印迹杂交检测,结果与RT-PCR检测结果相符。     

Gateway^TM系统快速构建番木瓜环斑病毒CP基因反向重复序列表达载体

设计含有attB侧翼序列的引物,用于番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus)的外壳蛋白基因(CP)基因的PCR扩增.在BP重组酶的作用下,将CP基因与受体载体pDONRTM221发生重组反应,产生入门克隆.在LR重组酶作用下,将入门克隆与目的载体pHellsgate12发生重组反应,再进行平板培养筛选及PCR扩增和酶切反应.结果证明,用限制性内切酶Xho I酶切消化后,琼脂糖凝胶电泳获得了预期长度为1700 bp的重组片段;以启动子和外壳蛋白基因及外壳蛋白基因和终止子序列为基础,分别设计2对引物,经PCR扩增分别获得582和773 bp片段.结果表明,获得了含有内含子的CP基因反向重复结构的表达载体.     

邹平县玉米高产技术

邹平县玉米高产创建活动从2008年开始实施,高产攻关田平均每667平方米(1亩)产量连续3年达到1000千克左右。高产栽培技术如下:一、地力基本情况     

牛蒡栽培及加工研究现状

牛蒡属菊科中的稀特蔬菜，其营养价值越来越受到人们的重视。介绍牛蒡的春播露地（大田）、春播地膜、秋播拱棚等栽培技术及牛蒡丝、牛蒡茶、牛蒡罐头、速冻牛蒡、牛蒡调味酱、牛蒡冲剂、牛蒡咀嚼片、木质素和多酚的加工提取技术，并对牛蒡发展前景进行了展望。     

邹平县农作物水肥一体化技术的应用及成效

正2016年山东省邹平县开始在农作物上推广水肥一体化技术,至2018年3月底,全县农作物水肥一体化推广面积达8.6万亩,占同期农作物播种面积的10%。水肥一体化技术,变"浇地"为"浇作物",变"土壤施肥"为"作物施肥",较好地实现了国家提出的化学肥料"零增长,减量化"的目标要求,走出了一条节肥、节水、省力、绿色高效的现代农业发展之路。为全面了解邹平县水肥一体化技术推广应用及     

橘小实蝇胚胎发育及生理生化的初步研究

通过石蜡切片法研究了橘小实蝇胚胎发育的一般过程和特点;同时应用GC/MS测定出橘小实蝇胚胎发育中含有5种主要化学物质以及分析了这5种物质在橘小实蝇胚胎发育中的变化趋势;另外还通过生化方法测定了0.5～72小时橘小实蝇卵内Ac小时E酶活、Pr的含量变化。     

柑橘衰退病和碎叶病复合感染病原的脱毒研究

以带毒柑橘品种为试材,采用植物中药制剂处理与热处理结合、茎尖微芽嫁接与植物中药制剂处理结合,用RT-PCR法检测病原带毒情况,并在药剂处理后1、3、5、7、9 d取样,检测抗性相关酶活性的含量变化,结果表明:采用板蓝根和黄芩混合中药制剂处理8次,结合热处理,在PC板制成的温室(白天40℃(6 h/d),晚上25℃,处理...