黄瓜叶酸合成关键基因克隆与分析

【目的】分析黄瓜基因组中与叶酸合成代谢相关的基因数量、定位以及表达特征,对关键酶基因进行生物信息学分析与克隆,旨在为黄瓜叶酸合成调控研究奠定基础。【方法】根据已报道的拟南芥叶酸合成相关基因,利用黄瓜基因组数据库中9930_V3版本进行BLAST比对。利用MapChart绘制黄瓜染色体物理图谱并对基因定位。利用qRT-PCR分析这些基因在黄瓜果实发育不同时期和不同材料中的表达量。通过MEGA、WebLOGO、ExPASy等工具对关键酶基因进行生物信息学分析。通过PCR扩增对关键酶基因进行克隆,并测序分析基因的序列差异。【结果】同源比对获得19个黄瓜叶酸代谢相关基因,这些基因不均匀分布在黄瓜7条染色体上,且以Chr.4和Chr.5上分布最多。通过对其中11个调控叶酸合成的基因在测序黄瓜9930果实发育不同时期以及果实叶酸含量高低差异显著的2份材料的表达量分析,发现CsFPGS、CsHPPK/CsDHPS和CsDHNA 3个基因与果实叶酸含量变化趋势完全一致;CsADCS、CsADCL、CsDHNA、CsHPPK/CsDHFS、CsFPGS、CsDHFS等基因的表达量在2份材料中具有显著差异。通过对2个调控叶酸合成限速步骤的关键酶基因CsGCHI和CsADCS的蛋白序列及蛋白结构域分析,发现各物种中CsGCHI的同源基因均具有2个GTP_cyclohydroI结构域;CsADCS的同源基因均具有2个GATase结构域、1个Anth_synt_I_N结构域和1个Chorismate_bind结构域。它们在不同物种中高度保守,进化树分析亲缘关系近的物种聚类到一起。分别扩增黄瓜果实低叶酸含量自交系65G和高叶酸含量自交系02245中CsGCHI和CsADCS的同源基因,序列分析表明CsaV3_1G041250全长为3 012 bp,CDS序列长度为1 413 bp,3个SNP位点的突变导致了氨基酸序列的变异;CsaV3_7G026240全长为3 047 bp,CDS长度1 407 bp,序列无变异;CsaV3_5G036360全长7 941 bp,CDS序列长度为2 706 bp,序列无变异。【结论】鉴定出19个不均匀分布在7条染色体上的黄瓜叶酸代谢相关基因,基因CsFPGS、CsHPPK/CsDHPS 、CsDHNA和CsADCS是影响黄瓜果实叶酸含量变化、导致叶酸含量高低显著差异的关键基因,调控叶酸合成限速步骤的关键酶基因GCHI及ADCS功能相对保守,CsGCHI在65G、02245中有3个SNP位点的突变导致了氨基酸序列的差异。     

活性叶酸对母猪产仔数的影响

本试验的目的是检验活性叶酸对东山母猪产仔数的影响。笔者选用了基本条件相近的32头母猪随机平分成试验组和对照组,在相同的饲养条件下,试验组饲料中添加0.8mg/kg的活性叶酸进行试验。试验结果表明,当a=0.05,df=30时,t=2.09大于临界值t0.05=2.043,本试验产仔数效果差异显著。     

叶酸在反刍动物营养上的研究进展

叶酸是反刍动物生长和生产过程中一种重要的B族维生素,对于保障反刍动物健康、增强机体免疫力、提高繁殖力和产奶量以及改善乳品质等方面有着重要作用,但国内对于叶酸的研究主要集中在单胃动物,反刍动物的相关研究较少,一些生产参数尚没有统一规定。本文围绕反刍动物就叶酸的理化性质、营养生理功能、消化吸收代谢、营养需要、来源等方面进行综述,为叶酸在反刍动物生产上的合理应用提供参考。     

辣椒落花、落叶、落果、卷叶和 畸形果的发生及防治

辣椒属于双子叶植物纲茄目辣椒属,为一年生或多年生草本植物,含有丰富的维生素C、β-胡萝卜素、叶酸、镁及钾,其中维生素C含量在各类蔬菜中居第一位,并且其含有的辣椒素具有消炎和抗氧化作用. 辣椒是我国重要的蔬菜种类,是国内种植栽培面积最大的蔬菜作物之一,随着现代高效农业的推进,我国辣椒产业迅速发展,栽培面积迅速扩大, 现其经济总产值和效益居各类蔬菜作物之首,主要有朝天椒、甜椒、泡椒、螺丝椒、线椒和牛、羊角椒等品种.     

叶酸对猪卵母细胞体外成熟的影响

将体外收集的猪卵母细胞随机分成对照组和试验组(0、1、10、50μg/L),研究叶酸对猪卵母细胞GVBD率、成熟率和孤雌激活发育潜能的影响。结果表明,10μg/L叶酸能有效的促进GVBD发生、成熟率和激活胚的发育能力,与对照组相比具有上升趋势,其中成熟率显著提高(P0.05)。当叶酸质量浓度为50μg/L时,GVBD率、成熟率和激活胚的发育能力呈下降趋势,其中GVBD率(P0.05)和成熟率(P0.01)显著低于其他处理组。综上所述,叶酸能提高猪卵母细胞体外成熟效果,在本研究中以添加10μg/L叶酸效果最明显。     

叶酸蛋与国民健康

2010年,沈阳华美畜禽有限公司斥资3000万元,从日本引进了叶酸蛋的生产技术,并将建设500万只叶酸蛋蛋鸡饲养基地。那么,叶酸蛋到底是怎么回事？对提高国民身体素质究竟有何意义？     

叶酸对铅中毒幼年大鼠中枢神经系统的保护作用

通过研究铅对大鼠中枢神经元的损伤以及应用叶酸后的影响，探讨了叶酸对铅中毒条件下中枢神经元的保护作用。将健康清洁级初断乳3周龄SD大鼠随机分为铅染毒组，叶酸给药组及生理盐水组。各组于处理后第2、3、4周取材。铅染毒组、叶酸给药组每组各30只，生理盐水组12只，共72只。测量血铅，分别进行海马和小脑组织的H—E染色及凋亡抑制基因Bcl—2、凋亡基因Bax的蛋白免疫电泳，并作光密度分析。结果，通过对各个时间段各组血铅测定，可得叶酸给药组血铅含量低于铅染毒组。铅染毒组Bcl-2蛋白表达量少于给药组，而Bax多于给药组，H—E染色结果铅染毒组神经细胞数量明显少于叶酸给药组。结果表明，叶酸可降低铅中毒大鼠的血铅浓度，并具有一定抗细胞损伤作用，对铅中毒大鼠的中枢神经元具有一定的保护作用。     

圈养羊贫血病的原因、表现及防治

羊群在长期圈养的条件下,最容易发生羔羊的贫血病.因为低营养水平下的母羊奶水不能满足羔羊的营养需要,尤其羔羊生长速度快,长期圈养后,不接触较多的地面,摄入铁量不足,导致生长发育缓慢,以至造成羔羊的急性死亡,应引起足够重视. 1 发病原因 营养性贫血是缺乏造血必需的营养物质而造血功能低下的贫血病.羔羊哺乳期至育成前的生长期主要缺乏铁和维生素B12和叶酸,影响血红蛋白的合成所引起的贫血.     

高效液相色谱法测定饲料预混剂中烟酰胺,叶酸方法研究

反相色谱污测定饲料预混剂中的水溶性维生素烟酰胺、叶酸，采用中华人民共和国国家标准ＧＢ／Ｇ１４７０２～１９９３提取方法，甲醇－－水－－磷酸－－辛基磺酸（辛基磺酸为离子对试剂）作流动相，Ｃ１８为图定相，用紫外可见光检测器，既得到良好的分离效果，测定结果准确，又使检测时间大大缩短。     

叶酸在养猪生产中的应用

叶酸在体内核酸、蛋白质合成方面发挥着作为辅酶的作用，如果没有它，核酸不能合成，细胞也就无法进行分裂，组织细胞也就无法生长。猪有许多生理学特性，叶酸的代谢、利用特点是其生理特性之一。1猪叶酸代谢的特点1．1猪的叶酸代谢率高猪的血浆中含有大量的叶酸结合蛋白。由肝脏合成的活性叶酸可以在血液中蓄积，被结合蛋白所包裹，变得很稳定。这种被包裹结合的叶酸随血流进入细胞，就不会浪费了，还可以按照需要立即向组织提供。其它动物常没有太多的叶酸结合蛋白。人、小白鼠。狗、羊、马、牛血浆中叶酸结合蛋白的量只有猪的百分之一到…