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[目的]建立适用于禾本科作物不同组织总RNA的快速、高效提取方法,为进行后续的分子生物学研究奠定基础.[方法]采用Trizol试剂法,通过改变抽提上清液吸取量、沉淀方法及沉淀漂洗次数,对甘蔗、玉米和水稻的叶片、茎尖和根尖的总RNA提取方法进行优化.[结果]与吸取0.4 mL上清液相比,吸取0.2 mL上清液的总RNA OD260/OD280、OD260/OD230值分别在1.95~2.00和2.11~2.44,所获得的总RNA纯度较高.沉淀漂洗两次的OD260/OD230值(2.11~2.47)明显高于沉淀漂洗1次的总RNA OD260/OD230值(1.01~1.61),总RNA纯度较高.经异丙醇沉淀所得的各材料的总RNA 28S、18S和5S谱带清晰,无拖尾现象,总RNA完整性较好;LiCl沉淀法的RNA条带较模糊粘连,5S条带明显弥散,总RNA产率相对较低.以Trizol-异丙醇法提取的甘蔗总RNA为模板进行GAPDH基因片段扩增,所获甘蔗的叶片、茎尖和根尖的GAPDH基因表达丰度很强,无特异扩增,目的片段长度为153bp.[结论]改良Trizol-异丙醇法提取甘蔗、玉米和水稻不同组织的总RNA带型清晰、完整性好、纯度和产率高,适用于快速、高效提取禾本科植物不同组织总RNA. 相似文献
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HMBi对肉牛肉品质、血清生化指标和肌肉组织H-FABP基因mRNA表达水平的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
选择平均年龄4-5岁、体重相近的徐州黄牛16头进行配对,随机分为对照组和试验组,每组8头,在相同的条件下饲养.试验组分别在每头肉牛的精料中添加8 g·d-1蛋氨酸羟基类似物异丙醇酯(HMBi),对照组的精料不添加HMBi.试验结束后统一屠宰,并测定相关指标,研究HMBi对肉牛胴体品质、血清生化指标、肌内脂肪含量以及心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA表达水平的影响.结果表明:在肉牛胴体品质方面,与对照组相比,试验组肉牛的肌肉色、脂肪色、剪切力和蒸煮损失均无显著差异(P>0.05);但大理石花纹等级高于对照组(P>0.05).在血清生化指标方面,试验组肉牛血清的甘油三酯含量在试验后极显著低于对照组(P<0.01);尿素氮浓度在试验后较试验前极显著降低(P<0.01),且试验期间试验组低于对照组(P>0.05);试验组葡萄糖浓度高于对照组(P>0.05),而脂肪酶活性,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇浓度则无显著变化(P>0.05).试验组肉牛背最长肌和臀中肌的肌内脂肪含量高于对照组(P>0.05).试验组肉牛背最长肌H-FABP基因mRNA的表达量高于对照组(P>0.05).可见,在日粮精料中添加8 g·d-1HMBi能降低肉血清甘油三酯水平,有提高大理石花纹等级的趋势,对肌内脂肪含量以及背最长肌H-FABP基因mRNA的表达量无显著影响. 相似文献
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本课题主要利用化工过程模拟软件Aspen Plus 2006对环己烷—异丙醇共沸物系的一般分离方法和变压精馏分离方法稳态过程进行了模拟,对总理论板数、回流比、进料位置、进料温度等操作参数进行了优化。对于一般分离方法的普通精馏、萃取精馏过程进行模拟,萃取精馏稳态过程选取乙二醇作为萃取剂,对塔的工艺操作参数进行了优化,环己烷和异丙醇产品浓度均达到99.9wt%以上;对于变压精馏稳态过程,主要研究了减压塔进料(包括常压塔回减压塔的循环物流进料和原料进料)位置,温度对分离过程的影响,最终对工艺操作参数进行优化,产品浓度均能够达到99.9wt%。实验过程研究了环己烷-异丙醇共沸物的变压精馏分离过程。分别利用间歇精馏研究了减压塔和常压塔部分实验过程,实验结果与模拟结果较为吻合。模拟以及实验研究结果表明,变压精馏分离共沸物具有工艺过程简单,不引入额外杂质的优点,同时也有能耗高的不足。在本文的最后对变压精馏节能方面进行了研究,通过热集成过程和盐效应改变共沸组成,达到了节约能耗的目的。 相似文献
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以大豆为原料,采用异丙醇为溶剂提取大豆油脂。影响提取大豆油脂的主要因素有提取次数、提取温度、提取时间和油料与溶剂的质量比等,通过单因素和优化提取条件正交试验分析,筛选出提取大豆油脂的最适条件是:提取次数为3次、提取温度为75℃、提取时间为2h和油料与溶剂比为1∶3。 相似文献
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分别吸附收集白星花金龟Potosia brevitarsis Lewis成虫取食桃果实过程及桃果实单独存在环境中的挥发性物质, 经GC-MS分析发现,成虫取食桃果实环境中含有桃果实中检测不到的信号化合物乙醇。在田间初步评价了乙醇及其8种类似物甲醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、正戊醇、正己醇对白星花金龟成虫的引诱活性。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇及异丙醇等对试虫均有一定的引诱作用,其中乙醇及异丙醇的引诱活性最高;乙醇10倍稀释液的引诱活性与未经稀释的乙醇相当,100倍稀释液的引诱活性明显降低;异丙醇的引诱活性随着供试浓度的降低而降低;乙醇与异丙醇以等体积混合时的引诱活性较佳,其3种比例混合物的引诱活性均随着使用浓度的降低而降低。 相似文献
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