盐溶蛋白电泳鉴定玉米种子纯度应用中存在问题及应注意问题

盐溶蛋白电泳鉴定玉米种子纯度具有快速、准确、低廉等优点,特别是2001年列入本行业标准以后,被各检验室广泛采用。我单位于1996年开始利用盐溶蛋白电泳测定玉米种子纯度,经多年实践探索,发现实验结果存在以下问题及实验当中应该注意的一些问题。     

通过圆二色谱研究蛋白激发子PeaT1的耐热性

PeaT1是来自于极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)的一种具有耐热特性的蛋白激发子,包含一个初生多肽聚合复合物(nascent polypeptide associated complex,NAC)的结构域.为了研究PeaT1的耐热性机理,将其进行原核表达,经过亲和层析、离子交换层析和分子筛纯化后得到高纯度的PeaT1,通过同步辐射真空紫外圆二色谱(SRCD)对PeaT1的二级结构在不同温度下的变化进行了检测,温度从4℃经25℃、55℃升高到85℃,随后又经55℃、25℃回落到4℃.结果表明,在此过程中,α螺旋、转角结构比例先减少后增加;无规则卷曲比例先增加后减少,最后都基本恢复为原来的水平;而β折叠比例则变化不大.结合PeaT1的结构域信息,说明PeaT1主要是靠由β折叠组成的NAC结构域形成二聚体维持其热稳定性.     

山羊c-Myc原癌基因克隆、原核表达和GST-Myc融合蛋白纯化

本研究的目的是通过分子克隆、原核表达和蛋白纯化技术获得山羊GST-Sox2融合蛋白.用RT-PCR方法从山羊(Capra hircus)肠组织克隆了c-Myc基因,通过TA克隆,构建了pMD18-T-Myc质粒.DNA测序证明,山羊c-Myc全长cDNA约1320 bp,该序列包含一个完整的开放阅读框,编码439个氨基酸,经分析该序列与绵羊(Ovis aries)的c-Myc序列同源性为99.2%.将该cDNA片段亚克隆至pGEX-KG载体,构建了重组质粒pGEX-KG-Myc.经酶切鉴定和测序,将重组质粒导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,由IPTG诱导表达,以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和纯化GST-Myc融合蛋白.SDS-PAGE分析表明,纯化的GST-Myc融合蛋白约75 kD,与预期值相符,且呈现清晰的单一条带.Western blot检测证实,该融合蛋白能够被GST抗体所识别.本实验克隆了山羊c-Myc基因,获得了高纯度的GST-Myc融合蛋白,为其多克隆或单克隆抗体的制备提供了基础资料,为山羊iPS细胞(induced pluripotent stem cells)检测创造了条件.     

养鸽企业要注重健康养殖

被誉为“一鸽胜九鸡”禽中珍品的鸽子，历来被中外宫廷奉为御席精品。中国医学《本草纲目》认为鸽肉性平，入肝肾径，有调益气、滋肾养血和祛风解毒之功效。肉用乳鸽体型大、肉质好、营养价值高、药用效果好；肉质细嫩、味道鲜美、入口纯香、久食不厌，是低脂肪高蛋白低胆固醇的高级滋补佳品。乳鸽的肉质蛋白含量超过牛、羊、兔、鸡、鸭、鹅等肉类食品，而脂肪含量又低于其他肉类。据营养学家分析，鸽肉的营养成分每100克含量为水分68%～70%、蛋白质含量16.5%～20%、脂肪含量0.5%～1%。肉鸽含有丰富的人体必要的氨基酸、钙、铁、硒等10多种微量元素以及维生素A、E、B1、B2、叶酸等。鸽蛋含有丰富的铁传递蛋白、卵磷脂、乙酰碱、r-氨基酸等营养成分。     

磺胺类球虫药物的应用

球虫病属于原虫病,在家禽上是一种常见的寄生虫病,球虫主要寄生在胆管及肠道上皮细胞内。磺胺类药物是最为常见的防治球虫病的药物之一,常用的有磺胺喹噁啉、磺胺氯吡嗪、磺胺二甲嘧啶。磺胺喹噁啉、磺胺氯吡嗪、磺胺二甲嘧啶的作用机制是相同的。由于磺胺类药物的基本结构与对氨苯甲酸相似,因而可互相争夺二氢叶酸合成酶,影响二氢叶酸形成,最终影响核蛋白合成,从而抑制细菌和球虫的生长繁殖。磺胺喹噁啉主要抑制球虫第二代裂殖体的发育,对第一代裂殖体也有一     

汽车冷却系统的常见问题

冷却系统最常见的问题是发动机过热、冷却液漏失、电腐蚀和预热缓慢。据调查，在发动机过早出现的故障中，53％是由于忽略了对冷却系统的维护而引起的。从维修的观点来看，冷却系统需要注意以下几个方面：（1）散热器、压力盖、风扇、皮带、皮带轮、水泵、机油冷却器、恒温器、软管、密封垫和加热器；（2）冷却系统的热传导或“湿边”（冷却液与金属接触的部位）。此部位在发生损坏之前是很少被考虑到的。     

化学镀N_i-P-B合金镀层研究

化学镀工业的研究发展非常之快,近几年研究化学镀的人也很多。但他们所研究的大部分限于使用单一的还原剂来在金属表面获得效理想的镀层。本文所研究的是突破传统思维,研究同时使用两种还原剂,使之在非金属表面获得金属镀层,且采用目前价格较便宜的二甲胺基硼烷和次磷酸钠同时作为还原剂,获得成果较好。     

流感病毒A/Brevig Mission/1918/1(H1N1)片段7和8 mRNAs的低效拼接提高NS1蛋白表达量的研究

A型流感病毒编码的2个片段(7和8)产生的mRNAs拼接后,可潜在地改变NS1蛋白和NS2蛋白及M1蛋白和蛋白M2的比例。本试验研究了A型流感病毒自然发生的序列多态性对其mRNAs拼接的影响,通过对A/Brevig Mission/1918/1(H1N1)和A/Netherlands/178/95(H3N2)及多个H5N1禽流感病毒株片段7和8mRNAs拼接效率进行比较,发现与其他毒株的片段7和8mRNAs相比,A/Brevig Mission/1918/1(H1N1)片段7和8 mRNAs拼接效率低,导致更高水平的NS1功能蛋白的产生,可能有利于A/Brevig Mission/1918/1(H1N1)的致病性。结果还显示,A/Brevig Mission/1918/1(H1N1)片段8 mRNAs对SR蛋白过表达的应答与A/Netherlands/178/95(H3N2)不同。     

《农产品加工·学刊》2012年第1期～第12期总目次

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鸟痘病毒的新分类方法

痘病毒感染的物种已经超过230个,这种感染的普遍性给人们提出了一个问题:痘病毒的感染是如何在世界范围内传播的?Gyuranecz等在近期出版的《Journal of Virology》发表了相关论文:利用DNA聚合酶基因,结合4b核心蛋白基因区序列,通过对111个鸟痘病毒自然感染病例的分析获得了痘病毒更加完善的遗传发育框架。这为鸟痘病毒基因提供了一个更加宽泛和完善的遗传分析、测序及分类的方法。