IGF-Ⅰ、GH和CLA对脂肪前体细胞增殖、分化和基因表达的影响

为探讨类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、生长激素(GH)和共轭亚油酸(CLA)对不同部位来源脂肪前体细胞的增殖和分化程度的影响,以大鼠(Rattus norveaicus)为实验模型,分别从附睾及皮下脂肪组织分离得到脂肪前体细胞,并在不同浓度的IGF-Ⅰ、GH和CLA处理后,用MTT法检测脂肪前体细胞的增殖,用油红O染色法检测脂肪前体细胞的分化聚脂程度。实验结果表明,各剂量IGF-Ⅰ和CLA均能够显著地促进大鼠附睾及皮下脂肪前体细胞的增殖与分化,但GH对大鼠附睾及皮下脂肪前体细胞的增殖与分化均无明显作用。为进一步观察IGF-Ⅰ和CLA对皮下脂肪组织的作用机制,实验采用半定量RT-PCR法检测细胞中PPARγ和C/EBPα基因表达水平,结果发现,100ng/mL IGF-I可显著上调大鼠脂肪前体细胞中PPARγ与C/EBPα基因表达水平;48ng/m LGH和100μmol/L CLA可显著促进PPARγ基因表达,但对C/EBPα mRNA表达无显著影响。结果示IGF-I可能主要通过上调PPARγ与C/EBPα基因的高水平表达进而促进大鼠脂肪前体细胞的分化,而CLA对脂肪前体细胞的作用在上调PPARγ的表达的同时,还作为PPARγ的配体激活该受体而发挥作用。     

皖西白鹅与朗德鹅下丘脑-垂体-肌肉生长轴基因表达的比较

选择90日龄的皖西白鹅和朗德鹉各20只,取下丘脑、垂体、胸肌组织.采用半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin为内标,对下丘脑中的生长激素释放激素(GHRH)、垂体中的生长激素(GH)、肌肉组织中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-Ⅰ型受体(IGF-1R)的mRNA表达量分别进行比较分析,并分别与鹕的胸肌重及胸肌率进行相关性分析.结果表明:皖西白鹩的屠体质量胸肌重与朗德鹩无显著差异;皖西白鹅垂体中GH的mRNA表达低于朗德鹅(P<0.05),而下丘脑中GHRH和肌肉中GHR、IGF-1、IGF-1R mRNA在两品种间无显著差异;胸肌重与IGF-1 mRNA的表达显著正相关(r=0.57,P<0.01),而与GHR、IGF-1R mRNA无显著的相关性.结果提示,鹅肌肉的生长主要取决于GH的靶机制,而与GH无关.     

猪pGH基因真核表达载体的构建及其表达

从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进行鉴定,并将其转染PK15细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度.结果表明,成功构建了pEGFP-N1-pGH真核表达载体,为转基因猪的研究奠定了基础。     

农民就业新渠道——当个清洗一族

<正>项目介绍:一年多前,一位下岗工人在定淮门一所大院内贴了一张告示,写明自己是某单位的下岗职工,专门为市民上门清洗抽油烟,并留下了电话号码。一时间大院内谁要清洗抽油烟机的都找他,生意做得很红火。现在城市居民几乎家家都有抽油烟机,饮水机。油烟机时间长了要清洗,自己动手吧,一怕分解安装会     

Ghrelin免疫阳性细胞在白来航鸡胸腺内的分布与定位

Ghrelin最初是从哺乳动物胃组织中分离出来的一种具有28个氨基酸残基的生长激素促泌素受体的内源性配体[1]。随后,在脊椎动物的其它类群如鱼、牛蛙和鸡等动物中也分离出Ghrelin。尽管Ghrelin主要是胃肠道的产物,但在包括免疫器官在内的外周器官如胰腺、胎盘、肺、心脏、肾脏、甲状腺等均有表达[2],具有调节垂体分泌生长激素,调节食欲、能量平衡、胃肠功能、生殖功能和心血管功能等广泛的生物学功能。同时,在T、B     

猪铜蓝蛋白的分离纯化及对垂体细胞分泌生长激素的影响

采用硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-sepharose离子交换,羟基磷灰石吸附层析,Superdex-200凝胶过滤纯化,从猪血清中分离纯化出电泳纯的一种蛋白质.进一步研究,其相对分子质量为123 500,等电点为5.08,分子含铜原子数为6个,含糖量为7.8%,亚基数为1,经分析为猪血清铜蓝蛋白.用含不同质量浓度铜蓝蛋白(0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2 g/L)的无血清培养液培养已培养48 h的新生仔猪脑垂体细胞12 h,于2、4、8、12 h分别收集培养液,用放免法测定培养液中GH浓度,结果表明铜蓝蛋白质量浓度为0.2、0.4、0.8、1.2 g/L组垂体细胞生长激素的分泌显著高于0 g/L组,其中以0.4 g/L组、换液培养8 h,垂体细胞生长激素分泌最为明显.     

稀土增欲剂IPF89对生长猪生长激素及有关代谢激素的影响

动物体内几乎所有激素都直接或间接参与生长调节,而其中最为重要的是由下丘脑-垂体-靶腺构成的神经内分泌生长轴(the somatotropic axis)[1].动物饲养试验结果表明,稀土(IP)和食欲促进剂F89(氟安定)分别具有增进食欲、促进生长、提高饲料利用率的作用.为了进一步确定IPF89的效果,本试验旨在研究IPF8.协同作用对生长猪生长激素的脉冲释放及与生长有关的激素的影响,探讨其作用机理,为生产应用提供依据.     

腐植酸钠的兽医药理功能

从国内外实践证明，腐植酸不仅是一种良好的生物生长激素，而且还是一种用途广泛的药物。腐植酸的组成结构，迄今尚未完全清楚，已知腐植酸分子中含有苯环、稠环和某些杂环（如吡咯、呋喃、吲哚等），各芳环之间有桥键相连，芳环上有各种功能基团，主要是羧基、酚羟基、甲氧基、醌基等。由于腐植酸有如此复杂的分子结构，因此有可能表现出多种的物理化学特性。     

蒙古绵羊卵丘细胞ghrelin部分序列的鉴定

为了研究生长激素释放多肽(ghrelin)mRNA是否在蒙古绵羊卵丘细胞中表达,试验根据Gen-Bank中报道的绵羊ghrelin序列设计1对特异性引物,以蒙古绵羊卵丘细胞中的RNA为模板,采用实时定量RT-PCR技术扩增蒙古绵羊ghrelin的cDNA,并进行测序分析。结果表明:扩增得到的蒙古绵羊ghrelin cDNA为ghrelin的部分序列,将测序结果与已发表的绵羊ghrelin序列进行比对发现,233个碱基中有1个碱基的差异,该差异不影响翻译后多肽的序列;该cDNA片段包含长度为231 bp的开放读码框(ORF),编码77个氨基酸的绵羊ghrelin前原肽。     

牛生长激素基因工程茵的构建及其诱导表达

为获得牛生长激素（BST）蛋白，构建了工程菌并进行了诱导表达．先设计2对引物，从pUCm—T-BST克隆中扩增出BST成熟蛋白编码序列，双酶切后分别插入表达载体（pET30a和pET29a），转化E．coli DH5a并进行阳性克隆鉴定；再将重组质粒分别转化到E．coli BL21（DE3）和RosettaTM（DE3）pLysS中，构建BST原核工程菌；最后进行诱导表达．结果表明，重组表达载体pET30a—BST和pET29a—BST中均插入了正确的目的基因；经IPTG诱导后，以BL21（DE3）为宿主的工程菌无目的蛋白表达，而pET30a—BST／Rosetta^TM和pET29a．BST／Rosetta^TM分别可见分子量约29．5，26．5kD的融合蛋白表达，约占菌体蛋白的26％，35％．说明稀有密码子限制BST基因在E．coli中的表达。选择适宜的宿主菌可克服此障碍．