羊痘病毒实时荧光定量TaqManPCR检测方法的建立

参照羊痘病毒（CaPV）P32的基因序列，设计合成了2套引物和1条探针，建立了实时荧光定量PCR技术，对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示，用300nmol／L引物浓度和200nmol／L探针浓度，获得的CT值较小，而△Rn最大；可检测到相当于0．1TCID50的病毒DNA；制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽，相关系数为0．9995以上；组内和组间试验重复性的变异系数分别为2．3％和3．4％；与常规的PCR相比较，该方法具有快速、特异、敏感、可定量，可同时检测大量样品等优点。表明，荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法，可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测。     

小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达

参照GenBank中小反刍兽疫病毒（PPRV）H抗原基因序列，人工合成了PPRVH基因，将其克隆至PUC18-T质粒中，转化E．coli JM109感受态细胞，构建并选择PPRVH基因克隆重组质粒，经核苷酸序列分析正确，将其克隆至pBAD／Thio—TOPO载体中，转化E．coli TOP10感受态细胞，核苷酸序列分析证实，成功构建了PPRVH基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导，可稳定、高效地表达PPRVH抗原。SDS-PAGE分析结果表明，用终浓度为0．2g／L的L-阿拉伯糖诱导5h的表达量最高，表达蛋白为分子质量约83ku的融合蛋白；经薄层扫描分析，其表达产量约占菌体总蛋白的10％。Western-blotting检测表明，诱导的蛋白能与PPRVH蛋白单抗发生特异性反应，说明表达的融合蛋白中含有PPRVH糖蛋白抗原。     

猪附红细胞体病的诊断与防治

附红细胞体病是由附红细胞体感染机体引起的一种人畜共患传染病。附红细胞体是寄生于红细胞表面、血浆及骨髓的一类微生物。附红细胞体病通常在猪发生,猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在猪红细胞表面或游离于血浆中引起的一种急性、热性传染病,在许多国家和地区均有发生和流行。该病临床上以发热、贫血、溶血性黄疸、呼吸困难、皮肤发红等为特征,在全国各地均有报道发生,近几年在国内部分省区都呈爆发流行,给养猪业造成严重的经济损失。1流行情况本病最早于1928年Schilling和Dinger分别在啮齿类动物中发现球状附红体,但过去因其对摘除…     

生猪铜中毒的诊治

在生产实践中,生长肥育猪每千克日粮含铜量200毫克左右,可使猪保持良好的生长速度及较高的报酬。如果滥用,日粮中铜的含量长期超过250毫克/千克,会发生铜中毒。近几年来,我们采用以下方法,先后救治生长肥育猪铜中毒猪15头,治愈14头,治愈率达93.3%。现将具体诊治情况报告如下。1临床症状铜中毒的猪表现为食欲减少,甚至废绝,精神委顿,被毛粗乱,头低耳耷;体温正常或偏低;流涎,呕吐,腹泻,粪便呈青绿色,排血尿;皮肤苍白、黄染,皮肤角化不全,继而呈现湿疹和血疹;眼睛凹陷,体弱无力,卧地不起;人为刺激时,出现强直性痉挛,角弓反张,两目瞪圆,气喘,呼…     

重庆市致病性大肠杆菌的血清型鉴定

从重庆市各地发生典型仔猪黄、白痢猪的肛拭粪样及死亡猪的心血和肝脏中分离鉴定出173株致病性大肠杆菌,用20种大肠杆菌O抗原单价血清进行了血清学鉴定。结果表明:173株分离菌有87株能定型,分属14种血清型,其中以O101(17.2%)、O8(14.9%)、O20(14.9%)、O64(11.5%)、O45(9.2%)、O149(8%)等6种为优势血清型。同一地区存在多种血清型,大多数地区有本地的优势血清型。不同地区的优势血清型有的相同,有的不同。     

实施奶牛良好农业规范认证提高原料奶质量

进入21世纪以来,全球性的农产品质量安全问题日益凸现,农产品质量安全已经从局部问题上升到整体问题,从经济问题上升到社会问题,成为全人类共同关注的生存与发展主题.     

野生花卉蓝刺头的根插繁殖

对蓝刺头进行了根插材料和扦插基质的筛选试验,结果表明:根粗在0.5～0.8cm、长3cm扦插效果好,诱导愈伤率、不定芽数、生根数及扦插成活率均高于其它处理,为最佳根繁材料.不同基质在促进蓝刺头插稳发芽和生根方面差异显著,其中河沙:草炭=1:1扦插最为理想.根插10d后,插穗上端首先形成白色突起状愈伤组织,然后分化出不定芽,20d后,下端分化出不定根,通过细胞学观察,其不定芽及不定根发生部位均为中柱鞘周围的细胞,为内生起源.     

新植大樱桃成活率低的原因及对策

近几年来,新植大樱桃园,其栽植成活率一直较低,平均成活率不足60%,有的新植园成活率甚至低于30%,因而造成新发展的大樱桃园,树龄、树势参差不齐,直接影响单位面积产量的提高,挫伤农民发展大樱桃的积极性。针对这一     

南昌地区无公害青蒜苗栽培技术

青蒜苗以其鲜嫩可口,兼可调味,深受消费者青睐;且生长时间短,可提高土地利用率,增加农民收入.青蒜苗已成为南昌地区主要栽培的蔬菜品种之一.随着人民生活水平的不断提高,市场对青蒜苗的需求量日益增大,且对其品质及安全性提出更高要求,因此发展无公害青蒜苗生产成为当务之急.现将南昌地区无公害青蒜苗栽培技术介绍如下.     

鹌鹑附红细胞体与大肠杆菌混合感染的诊断

对某鹌鹑养殖场送检的病、死鹌鹑进行实验室诊断,在血液中检查到附红细胞体;同时从心血、肝脏分离到1株革兰氏阴性短小杆菌,经显微镜观察、培养特性和生化特性鉴定,确认为大肠杆菌,该菌可致死小白鼠,对丁胺卡那霉素、头孢噻肟钠等敏感。