| 小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 刘玉洪,花群义,徐自忠,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,许靖逸,高洪.小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达[J].中国兽医科技,2006,36(9):692-695. |
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| 作者姓名： | 刘玉洪 花群义 徐自忠 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 许靖逸 高洪 |
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| 作者单位： | [1]云南农业大学,云南昆明650201 [2]云南出入境检验检疫局技术中心,云南昆明650228 |
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| 基金项目： | 国家“十五”重大科技攻关项目（2001BA804A48） |
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| 摘 要： | 参照GenBank中小反刍兽疫病毒（PPRV）H抗原基因序列，人工合成了PPRVH基因，将其克隆至PUC18-T质粒中，转化E．coli JM109感受态细胞，构建并选择PPRVH基因克隆重组质粒，经核苷酸序列分析正确，将其克隆至pBAD／Thio—TOPO载体中，转化E．coli TOP10感受态细胞，核苷酸序列分析证实，成功构建了PPRVH基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导，可稳定、高效地表达PPRVH抗原。SDS-PAGE分析结果表明，用终浓度为0．2g／L的L-阿拉伯糖诱导5h的表达量最高，表达蛋白为分子质量约83ku的融合蛋白；经薄层扫描分析，其表达产量约占菌体总蛋白的10％。Western-blotting检测表明，诱导的蛋白能与PPRVH蛋白单抗发生特异性反应，说明表达的融合蛋白中含有PPRVH糖蛋白抗原。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 H糖蛋白基因 表达 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）09-0692-04 |
| 收稿时间： | 2006-04-17 |
| 修稿时间： | 2006-06-26 |
Construction of prokaryotic vector and expression of H glycoprotein gene of peste des petits ruminants virus |
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| LIU Yu-hong ,HUA Qun-yi ,XU Zi-zhong ,YANG Yun-qing, ZHOU Xiao-li , DONG-Jun , YIN Shang-lian, XU Jing-yi , GAO Hong.Construction of prokaryotic vector and expression of H glycoprotein gene of peste des petits ruminants virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(9):692-695. |
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| Authors: | LIU Yu-hong HUA Qun-yi XU Zi-zhong YANG Yun-qing ZHOU Xiao-li DONG-Jun YIN Shang-lian XU Jing-yi GAO Hong |
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