墙藓属(Tortula Hedw.)2种藓类植物孢子萌发与原丝体发育特征研究

旨在根据墙藓属2种藓类植物原丝体发育特征,探析其孢子萌发型与系统发育及生态选择的相关性。通过室内人工培养的方式,对墙藓属无疣墙藓(Tortula mucronifolia Schw?gr.)和中华墙藓(Tortula sinensia Broth.)2种藓类植物孢子萌发、原丝体发育及配子体发生过程进行试验研究。结果表明:(1)两种藓类植物孢子均为壁外萌发;(2)无疣墙藓产生由短圆柱状细胞组成的丝状绿丝;中华墙藓产生块状原丝体和不发达的丝状绿丝体;(3)无疣墙藓和中华墙藓的配子体分别在绿丝体和轴丝体上分化产生。参照Nishida对藓类植物孢子萌发型的划分标准,墙藓属无疣墙藓和中华墙藓原丝体发育类型分别为真藓型(Bryum-type)和缩叶藓型(Ptychomitrium-type)。     

海带配子体保存过程中污染菌的分离纯化及药敏试验

该论文通过对海带配子体保存中污染菌的分离纯化及药敏试验,分离获得一些主要的污染菌群并探索有效的抗生素及使用浓度。将污染的样本涂板,待长出菌落后,反复3区划线,分出单个菌落,得到纯培养。该试验分出2株真菌(粗丝和细丝)和1株细菌,然后再接种于液体培养基增菌,收集细菌或真菌用相应的方法提取DNA。真菌用18 s r DNA通用引物,细菌用16 s r DNA通用引物进行PCR反应,最后将PCR反应产物送基因公司测序,将测序结果在GeneBank中比对。结果表明:粗丝18 s r DNA序列与Fusarium proliferatum同源性最高,为100%;细丝18 s r DNA序列与Nectria mauritiicola同源性最高,为99%;细菌16 s r DNA序列与Halomonas sp.同源性最高,为99%。通过药敏试验观察发现粗丝的制霉菌素敏感抑菌圈直径为13～15 mm;细丝的先锋霉素敏感抑菌圈直径为14～16 mm;细菌的盐酸青霉素较敏感,其抑菌圈为15～17 mm。     

碎米桠小孢子发生与雄配子体发育

采用半薄切片和石蜡切片法对碎米桠小孢子发生及雄配子体的发育进行了研究。结果表明:1)碎米桠的花药具有4个花粉囊,花药壁有4层结构,从外到内依次是表皮、药室内壁、中层和绒毡层,花药壁的发育属于双子叶型;2)药室内壁呈纤维状加厚,绒毡层为分泌型绒毡层;3)小孢子母细胞减数分裂过程中胞质分裂为同时型;4)四分体小孢子呈四面体形排列,成熟花粉为2-细胞型,具有6个萌发沟。研究发现,碎米桠小孢子发生和雄配子体发育特征与多数已经研究的唇形科的基本一致。     

大量制备毒害艾美耳球虫配子体方法的研究

鸡经嗉囊接种毒害艾美耳球虫孢子化卵囊148 h后,从鸡小肠中段分离成熟的第二代裂殖子;经外科手术方法,将第二代裂殖子直接注入鸡盲肠内,使第二代裂殖子同步发育至配子体;手术后30 h剖检鸡,刮取盲肠黏膜,随后依次通过透明质酸酶消化、滤膜过滤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等步骤,分离、纯化毒害艾美耳球虫配子体。结果显示,通过本方法分离、纯化的配子体纯度高、数量多,可用于基因转录组学、蛋白质组学、免疫学和疫苗等方面的研究。     

华山矾大小孢子的发育和雌雄配子体的形成

研究了华山矾大、小孢子发育和花粉壁的形成以及大孢子的发生和雌配子体的发育过程。华山矾的花药四室。绒毡层腺质型，发育后期出现双核至多核。小孢子四分体四面体型，胞质分裂连续型。成熟花粉具2细胞。子房2室，中轴胎座。胚珠倒生，单珠被，薄珠心，胚囊发育为蓼型。该研究为山矾科的胚胎学提供了新资料。     

利用SMART技术构建海带配子体cDNA文库

用Trizol试剂提取海带配子体总RNA,用SMART cDNA文库构建试剂盒构建cDNA文库。经测定原始文库滴度达到1.1×108Pfu/ml,文库有500μl体积,库容量为5.5×107Pfu,通过PCR检测,文库的重组率达100%,扩增出的片段主要集中在0.8~1.8 kb,平均插入片段长度约为1.34 kb。这些数据表明,已获得高质量的海带cDNA文库,为海带基因资源保存及新基因的克隆奠定了基础。     

棉团铁线莲小孢子发生和雄配子体的形成

采用石蜡切片技术,观察棉团铁线莲小孢子发生和雄配子体的形成过程。结果表明:棉团铁线莲每个花药横切面呈蝶形,具4个花粉囊;小孢子在四分体中的排列以四面体型为主;成熟花粉粒近球形,属2-细胞型,具有3条萌发沟;花粉囊壁由4层细胞构成,即表皮(1层)、药室内壁(1层)、中层(数层)、绒毡层(1层);绒毡层发育属分泌型。     

南瓜花粉母细胞减数分裂及雄配子体发育研究

[目的]研究南瓜花粉母细胞的减数分裂及其雄配子体发育过程,以期为南瓜花药培养等方面研究提供一定细胞学依据。[方法]采用爱氏苏木精染色-冬青油透明技术对南瓜"天虹"的花粉母细胞减数分裂及其雄配子体发育过程中细胞结构变化和染色体行为进行了观察研究。[结果]南瓜花粉母细胞在细胞核分裂过程中,核膜核仁于中期I消失,末期I重新出现,此时形成2个新月形的细胞核,两核之间出现成膜体,但未出现细胞壁,该成膜体在中期Ⅱ又逐渐消失,末期Ⅱ重新出现。第2次分裂纺锤体中央离心扩散的成膜体与第1次分裂两核相对的中央界面形成的成膜体相连,小孢子细胞壁向心产生。多数四分体中包含四个子细胞,少数还含有额外的小细胞。单核靠边期核仁由1个分解成2～3个或多个,进入有丝分裂前期,成熟花粉为二细胞型。1.0～2.0 cm长花蕾中多数花粉细胞处于单核期,可以将其作为花药或小孢子培养的取材依据。[结论]该研究结果为南瓜细胞遗传学方面的研究奠定了基础。     

海南本地槟榔小孢子发生及雄配子体形成研究

采用常规压片法,对海南本地槟榔(Areca cathecu Linnaeus)小孢子减数分裂和雄配子体发育过程进行了研究,并将其不同发育阶段与花、花序的外部形态特征相联系,结果显示:海南本地槟榔小孢子母细胞减数分裂的胞质分裂属于同时型,小孢子排列呈四面体状,成熟花粉粒为2-细胞型;花序外部形态与内部结构具有一定的对应关系。     

籼粳细胞质和海拔差异对水稻F1配子体基因型的选择效应

为研究籼粳细胞质背景和海拔引起的环境温度变化对水稻F1配子体基因型的选择效应,利用云南海拔2 650 m高寒稻区种植的地方粳稻老品种小麻谷与具有籼稻细胞质背景的改良品系南34为亲本,分析比较了在400、1 860、2 200 m 3个不同海拔下正反交F1的花粉育性和小穗育性,以及在3个不同海拔下产生的F2群体的生物学性状。结果表明:在3个不同海拔、粳稻细胞质背景下的杂种F1的花粉育性和小穗育性均显著高于其在籼稻细胞质背景下的表现,其中花粉育性的差异更为明显。除细胞质外,海拔也同样极显著影响杂种F1的花粉育性,但对其小穗育性影响很小。在不同海拔下产生的F2群体的生物学性状存在显著或极显著差异,同一海拔下产生的正反交F2群体间的生物学性状也存在显著差异。结果表明不同细胞质背景和海拔差异对水稻F1的雄配子基因型具有明显的选择效应,选择压力引起雄配子的败育导致其后代孢子体的基因型发生选择。