HPLC法测定金银花中绿原酸含量

以绿原酸含量为指标评价金银花品质。采用索氏提取法提取其叶中的绿原酸,用高效液相色谱法对绿原酸含量进行测定。结果表明:检测波长选择为242 nm,绿原酸在0.20～1.00μg呈现良好的线性关系,RSD=1.08,回归方程为Y=30 517.234 X+4.433,r=0.999 9(n=5),绿原酸含量为2.6%。可见金银花品质较好,具有巨大的开发和利用价值。     

绿原酸在家兔体内的药动学研究

建立了血浆中绿原酸的HPLC分析方法,比较了金银花三种注射液中绿原酸在家兔体内的药动学差异,旨在为研究金银花连翘药提供实验数据。将18只健康无伤的家兔随机分成三组,按0.5 mL/kg单次肌肉注射给药,HPLC同时测定不同时间点血浆中绿原酸浓度。用MCPKP程序计算动力学参数。健康家兔肌注金银花单提注射液(A),金银花、连翘混合提取注射液(B),金银花、连翘单提合并注射液(C)后,绿原酸在家兔体内的药动学过程均符合一级吸收二室模型。B、C注射液中绿原酸的Tmax、Tα/2、T1/2ka与A相比呈差异显著性,而Tβ/2差异不显著,表明金银花配伍连翘后能促进绿原酸在体内吸收分布,迅速达到血峰浓度,对消除半衰期的影响不大。B与C中绿原酸的药动学参数差异不显著,表明连翘与金银花配伍时,不管是混提还是单提后合并,对绿原酸在家兔体内的药动学特征无明显影响。     

忻城县金银花种质资源调查及绿原酸含量比较

调查了忻城县金银花种质资源情况。结果表明,忻城县共有红腺忍冬、毛花柱忍冬和细毡毛忍冬3种金银花分布。不同金银花样品的绿原酸含量和千花蕾鲜重／干重存在品种间和地区间差异,且随海拔升高而增加。毛花柱忍冬经济性状综合积分最高,其次为红腺忍冬。     

不同采收时间·花期及干燥方法对秀山金银花中绿原酸含量的影响

[目的]测定不同采收时间、花期和干燥方法制备的秀山金银花中的绿原酸含量。[方法]按2005年版《中国药典》规定的HPLC法测定样品中绿原酸。[结果]绿原酸的标准曲线为Y=3.6E＋7X-1.5E＋5,r=0.999 7。[结论]金银花的采摘时间、花期、干燥方法均是影响金银花药材绿原酸含量的重要因素,建议在7：00前采摘二白期金银花,采用杀青烘干。     

金板青颗粒中绿原酸的提取工艺和含量测定

建立金板青颗粒中绿原酸的提取工艺并对其有效成分含量进行测定。选择L9(34)正交表安排试验,用HPLC测定金板青颗粒中绿原酸的含量。结果表明,金板青颗粒中绿原酸的最佳提取工艺为12倍用量水提取3次,每次2.5 h。绿原酸线性范围在10.0~100μg/mL,r=0.9999,平均回收率100.75%(RSD=1.62%,n=6)。试验结果说明,本工艺稳定可行、科学可靠,含量测定方法简便准确,重复性好,可用于控制该颗粒剂的质量。     

正交试验法优化金银花中绿原酸提取工艺的研究

以金银花为原料,采用乙醇为提取剂,提取了金银花中的绿原酸。通过正交试验优化了金银花中绿原酸的提取工艺,结果表明最佳工艺条件是:浸提温度为60℃,料液比为1:25,乙醇浓度为60%,浸提时间为45分钟,pH为7。在此条件下,绿原酸的得率为5.117毫克/克。     

响应面法对金银花中绿原酸提取工艺的优化

为优化金银花中绿原酸提取率的最佳工艺条件,在单因素试验的基础上,应用Box-Behnken中心组合设计研究了乙醇质量分数、水浴时间、微波温度3个独立因子对金银花中绿原酸提取率的影响,再利用响应面分析法优化提取工艺条件。结果表明:绿原酸微波辅助提取最佳工艺条件为微波功率400W,微波温度58℃处理70 s,料液比1∶25,乙醇质量分数72%,60℃水浴加热51 min。经实际提取验证,绿原酸提取率为4.643 mg/g。     

IP3敏感的钙离子通透性通道参与茉莉酸诱导的钙动员

以低温导入法将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶片细胞中,利用LAS AF（Leica Application Suite-Advanced Fluorescence）软件记录肝素对茉莉酸（JA）诱导的胞内钙离子荧光强度的变化。结果显示,经不同浓度的肝素预处理后,拟南芥叶细胞中胞内钙离子的荧光强度降低,再用100 μmol/L JA处理时,其荧光强度升高,但仅与未经肝素处理的荧光强度相当。实验证明,肝素预处理可抑制JA诱导的胞内钙离子浓度的升高。     

HPLC-MS/MS检测杜仲中绿原酸等4种活性成分的分析方法

杜仲作为一种传统的中药材,其活性成分主要包括绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸等。本研究建立了一种HPLC-MS/MS(高效液相色谱质谱联用仪)检测的方法,可同时检测杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷、京尼平苷酸和绿原酸的含量。建立的色谱条件:色谱柱XD-C18,流动相为0.1%甲酸水溶液和甲醇,流速0.15mL/min,柱温30℃。质谱条件: ESI离子源作为裂解源,裂解温度280℃,源内电压4kV,鞘气辅助气为氮气,流速30psi,雾化气为氦气,流速10psi。结果表明:4种目标化合物的色谱峰分离情况良好,质谱鉴定为目标物;绿原酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸标准曲线的相关性系数分别为0.9935、0.9942、0.9969、0.9948;最低检测限的范围是7.603~8.853pmol;加样回收率范围是91.838%~108.326%。测定得到杜仲叶中桃叶珊瑚苷的含量为(20.552±4.032)ng/mg干质量,京尼平苷酸含量为(6.913±0.654)ng/mg干质量,绿原酸含量为(25.986±3.412)ng/mg干质量,京尼平苷含量为(0.205±0.015 )ng/mg干质量。利用该方法在7种植物组织中进行方法验证,测定得到4种目标化合物的含量,表明本方法有效且适用性广。      

“华金6号”金银花新品种药材适宜采收期研究

【目的】探讨确定"华金6号"金银花新品种药材适宜采收期。【方法】采集三青期、二白期及大白期后不同时间内的花蕾,用游标卡尺和电子天平测定花蕾的长度、最粗处直径、干重等指标;HPLC法测定绿原酸及木犀草苷含量。【结果】在三青期至大白期,花蕾外观性状变化明显且呈上升趋势,花蕾长度、直径及干重分别由0.17cm、2.05cm、0.19g上升至0.24cm、2.80cm、0.25g,大白期后第2天至第11天,三者均趋于稳定;在三青期至大白期,绿原酸含量由33.59mg/g下降至24.32mg/g,木犀草苷含量由0.55mg/g上升至0.95mg/g,大白期后第2天至第11天,绿原酸含量呈缓慢下降趋势,最低至17.73mg/g,但木犀草苷含量持续上升,最高至1.93mg/g。【结论】"华金6号"金银花在整个大白期内,花蕾干重,绿原酸、木犀草苷含量均相对稳定,考虑到花蕾发育的一致性及药材外观性状,本研究认为"华金6号"金银花在整个大白期内均可采摘。