番茄黄化曲叶病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立

以纯化的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)外壳蛋白为抗原,免疫家兔制备并纯化出TYLCV的多克隆抗体IgG,以此抗体做包被抗体,并用碱性磷酸酶(AP)对其进行标记作为酶标抗体,从而建立了番茄黄化曲叶病毒的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。通过ELISA方阵试验确定该法的最佳工作浓度为酶标抗体(IgG-AP)作1∶400倍稀释,包被抗体浓度为6.25μg.mL-1;并且确定了抗原最低检出浓度为9.75ng.mL-1。采用该法对山东寿光的田间病样进行了定性和定量检测,结果表明建立的DAS-ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于番茄黄化曲叶病毒的常规检测。     

基于田间性状和花部性状的茶用菊品系高产及适应性评价

[目的]本文旨在建立茶用菊品种的综合评价体系,筛选出适合高产、适应性强的优良茶用菊品种.[方法]基于40个茶用菊品系的田间性状和花部性状,采用专家咨询法、层次分析法以及K-means聚类分析法构建茶用菊的综合评价体系.[结果]共确定10个影响茶用菊产量和品质性状的关键指标.应用层次分析法确定各个指标的权重,其中单株花数...     

云引稻瘟病抗性基因型的初步分析及其近等基因系构建

利用水稻品种稻瘟病抗性基因型鉴定菌株RB01～RB22,对云引苗期叶片进行离体接种,结果表明云引除对RB17和RB20感病外,对其他菌株均表现抗病,通过分析RB01～RB22对目前生产上广泛应用的24个稻瘟病抗性基因的抗性鉴定结果表明,这些基因的反应型均与云引不同,即可能含有除上述抗病基因之外的新的稻瘟病抗原。此外,通过连续回交、分子标记辅助选择和人工注射接菌相结合的方法,构建了以普感稻瘟病品种丽江新团黑谷(LTH)为遗传背景,含有抗稻瘟病菌株"四川-43"基因的近等基因系,为该抗病基因的遗传学研究和应用构建了良好的载体。     

北方保护地蔬菜病害化学防治措施

保护地蔬菜由于生长于相对封闭的环境中，与露地蔬菜在病害发生种类、发生程序及病害循环方面有较大差异，其化学防治措施与露地蔬菜病害的化学防治也有很大的差异，因此防治策略要有针对性，本文就目前北方保护地蔬菜病害普遍采用的化学防治策略措施和应用过程中易出现的问题进行了探讨并提出了建议。     

芜菁花叶病毒不同分离物3'-cDNA片段的克隆及序列分析

 从河北、北京、山东泰安和潍坊等地区的萝卜、大白菜、甘蓝、油菜上得到8个芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)分离物,测定了它们3'-末端cDNA片段的序列。根据衣壳蛋白基因(cp)核苷酸序列可以将这8个分离物与另外2个TuMV分离物分为3组:泰安旧镇大白菜(JZBC)、甘蓝(JZGL)和萝卜(JZLB)分离物为一组;北京(BJILB)、潍坊萝卜分离物(WFLB)与引起萝卜红心病的TuMV分离物(WFLB99)为一组;泰安范镇、河北、潍坊(WFLB04)萝卜和泰安旧镇油菜(JZYC)上的TuMV分离物为一组。农壳蛋白氨基酸序列比较结果与此基本一致,所不同的是分离物WFLB99与所有分离物的差异均较大,形成单独一个分支。有必要对TuMV的变异情况和致病机理进行深入研究。     

蝴蝶花的组织培养和根状茎的诱导

蝴蝶花(IrisjaponicaThunb.)是鸢尾科鸢尾属的多年生常绿宿根草本植物,地下有横走的根状茎;耐荫,是良好的耐荫地被植物。试验于2003年10月至2004年5月进行。选择健康的蝴蝶花植株,取地下的根状茎,选带节的茎段作为外植体,用洗洁精溶液浸泡4～5min,采用75%乙醇60s结合0.1%HgCl212min进行灭菌。根状茎在培养基MS 6BA1.0mg·L-1 KT2.0mg·L-1 NAA0.1mg·L-1,25℃下黑暗培养,腋芽出芽率达65.4%。黑暗比光照更有利于腋芽的萌发,可能是由于蝴蝶花是阴性植物;在自然条件下其根状茎的生长和顶芽的萌发处于暗环境,离体条件下黑暗培养更符合其…     

小麦氮硫配施效应研究

1997-1999年先后采用二因素二次饱和D-最优设计,在沿淮和淮北5个国营试验点分别设置6个N-S配比水平的小区试验以及继后的大田示范试验,研究了N-S配合施用对小麦的效应.小区试验结果表明,绝大多数N-S配施的小麦产量每公顷增产134～989 kg;与无S配合的单施N处理相比,不同水平N-S配比的增产和减N节本,使每亩实际增收值达10～130元;N-S配施的绝大部分处理的产投比达到10～60,极少数N-S配施处理减产出现在施N水平低于183 kg/ha情况,但因减N节本,实际增收值仍较高.F值大达到显著或极显著水平.相关分析表明,小麦产量与N-S水平间间呈二元二次相关关系,R=0.7693*-0.9658**.相关方程及相应图形可用作产量预测和N、S肥用量的最优选择.N-S配施提高了籽粒蛋白质含量0.5～2个百分点并在不同程度上提高了N肥和S肥的利用率.3个大田示范试验进一步验证了所选出的3组N-S配施水平在提高小麦产量的有效促进作用.     

国产硫酸安普霉素对鸡在体盲肠内常在菌的影响及其对鸡的保护作用

硫酸安普霉素是美国礼莱公司从黑暗链霉菌发酵产物中分离出来的一种氨基糖甙类抗生素,它能抑制细菌蛋白质的合成,结构特殊,与目前临床应用的氨基糖甙类抗生素不易产生交叉耐药性,抗菌谱广,对革兰阴性菌和阳性菌均有很强的抑制或杀灭作用,在国外已经用于防治大肠杆菌、沙门杆菌等引起的腹泻、肠炎,巴氏杆菌引起的败血症、小牛腹泻及火鸡肠道疾病等,但对鸡在体肠道菌的影响及其保护作用方面还未见报道,遂以国产硫酸安普霉素作为试验药物,进行以下试验,现报道如下。1材料与方法1.1材料药物:硫酸安普霉素,山东鲁抗舍里乐药业有限公司,批号为0102…     

切花菊14个品种的核形态学研究

 采用常规压片法对不同花序类型、不同花色的14个切花菊品种进行了核形态学研究。结果表明：（1）间期核均为复杂染色中心型，前期染色体属于中间型。(2)体细胞染色体在品种内和品种间均呈现多数目性，染色体数变动范围在48~56之间，以54条为主。（3）核型呈现多样性，由中部、近中部和近端部着丝粒染色体组成，‘神马’、‘小红娘’、‘九月黄’和‘小菊双色’有1或2条随体染色体；染色体相对长度为2.04%~5.26%；核型不对称系数为62.39%~67.32%；‘长紫’、‘意大利红’、‘小红娘’和‘阿里格斯’核型类型为“2B”，其它品种为“2A”型。（4）有丝分裂后期和末期除‘清露’外均正常。基于观察结果分析了切花菊核型多样性及进化趋势。     

潍坊萝卜中芜菁花叶病毒分离物的分子特性及CP基因的表达

 从表现红心病的潍坊萝卜块根上得到一芜菁花叶病毒( Turnip m osaic virus, TuMV) 分离物(TuMV-Ra) , 通过RT-PCR获得了该分离物的外壳蛋白(CP) 基因, 对其进行了序列测定, 并将其核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中登录的其它20个TuMV萝卜分离物的相应序列进行比较和分析。结果表明, TuMV-Ra与这20个分离物CP基因核苷酸序列的同源性为89.9% ～99.0% , CP氨基酸序列同源性为94.8%～99.7%; 其中与中国浙江杭州萝卜的两个分离物HZLB1、HZLB2同源性最高, 核苷酸序列的同源性为98.7%和99.0% , 氨基酸序列同源性为99.0%和99.7%。TuMV-Ra与1999年从表现相同症状的潍坊萝卜得到的分离物CHINA-WF CP基因核苷酸同源性为93.66% , 氨基酸同源性为96.53% , 说明病毒发生了比较大的变异, 而且变异的位点主要在CP的N末端。将TuMV-Ra CP基因克隆到原核表达载体pET-22b ( + ) , 在大肠杆菌BL21 (DE3) 中表达出分子量为38 kD的融合蛋白。Western blotting分析证明TuMV-Ra CP在大肠杆菌中得到了正确表达。