蜘蛛拖丝蛋白基因逆转录病毒载体构建与检测

利用pIRES2-EGF和pMX载体以及前期获得的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)构建逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP.采用磷酸钙法将pMX-2S-IRES-EGFP质粒转染到PlatE细胞并获得重组逆转录病毒.通过小鼠成纤维细胞系NIH3T3检测病毒侵染能力,并采用PCR法检测蜘蛛拖丝蛋白基因在NIH-3T3细胞的整合状况.结果显示,成功构建了逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP;通过感染NIH-3T3细胞测定重组逆转录病毒滴度约为2×105 cfu/mL;PCR鉴定结果显示,目的基因2S-IRES-EGFP已整合入NIH-3T3细胞基因组中.     

转NPR1和CHR3抗病基因提高大豆对疫霉根腐病抗性研究

为检测GmCHR3和广谱抗病基因NPR1双抗基因转化到大豆吉林30中的遗传稳定性和抗病能力,从而为培育出抵抗疫霉根腐病大豆新品种提供有效参考,以大豆品种吉林30转CHR3抗病基因转化品系JL30+GmCHR3为目标受体材料,以吉林30为对照受体材料,利用农杆菌介导法将NPR1导入受体中.利用常规PCR检测基因转化情况,利用Southern杂交和qRT-PCR技术分别鉴定JL30+GmCHR3受体和双抗基因转化株系T1和T2代中两个基因的整合和表达情况,采用下胚轴侵染法鉴定转基因大豆植株对疫霉根腐病的抗性.PCR研究结果显示:转化元件的启动子35s、终止子Nos、筛选标记基因Bar以及目的基因NPR1全部转入到受体基因组中;NPR1基因以单拷贝的形式在转化植株中完成整合;NPR1基因在大豆植株根、茎和叶中均有表达,其中T1代株系在3个部位的相对表达量分别是2.732,1.614和3.316,T2代株系的相对表达量分别是2.936,2.084和3.864;NPR1基因在各组织中的相对表达量为茎＜根＜叶.CHR3和NPR1双抗基因转化株系对疫霉根腐病表现为高抗,NPR1单抗基因转化株系表现为中抗,非转基因吉林30植株表现为感病.结果说明大豆吉林30转入双价抗病基因GmCHR3和NPR1可以增强其对疫霉根腐病的抗性.     

番茄空洞果的成因及防止措施

番茄空洞果是一种生理性病害,尽管对产量影响不是太大,但严重影响其商品性,降低经济效益,在生产中不能不引起重视。     

建平地区烤烟采收环节运输机械的应用研究

[目的]针对建平地区烟叶生产雇工难、雇工贵、用工“野蛮操作”导致烟叶机械损伤严重等问题,对其采收运输机械的研究。[方法]通过合理设计烟田部分垄距增加小型农机进地的可能性,采后烟叶放置于专门的编织袋中,运输工使用改进电动三轮车进烟田运烟,然后用安装有专用运输架的运输车运回烤房进行编烟,编烟后放置于专门挂烟架上,全部编完后装到烤房内。[结果]机械的使用大幅降低了烟叶的机械损伤,显著提高了烟叶等级质量,降低了烟叶采收的劳动强度,大幅缩短了采烟全程时间。[结论]减少人为机械损伤,实现提质增效目标,为烤烟采收环节优化提供参考。     

生态技术在水库农业非点源污染防治中的应用

农业非点源污染现已成为影响水库水质的主要因素,生态工程技术是防治水库农业非点源污染的有效途径之一,治理措施包括源头污染控制和径流污染控制。     

2012年稻瘟病预测预报调查结果分析前进农场现代农业发展中心

一、2008-2012年调查结果:1、稻瘟病孢子形态今年与2010年观察的形态一致,大多数形态都很典型,多为典型的梨形2个隔膜。稻瘟病孢子形态与2008、2009年明显不同,前两年在显微镜下观察发现,梨形2个隔膜的稻瘟病孢子数量很少。     

保护农业生态环境提高农产品的质量

本文分析了苏州市农业生态环境存在的问题,及其对农产品质量的影响。提出了保护和建设农业生态环境,提高家产品质量的建议。     

绿色食品番茄-丝瓜-芹菜一年三熟高效种植模式

近两年,我市加快推进新一轮"菜篮子"工程建设,着力加强"菜篮子"生产基地建设和高效生产技术推广应用。我们在生产中总结出了一系列高效种植模式,其中很多模式产量高、效益好、深受广大菜农欢迎。太仓市双凤镇的番茄—丝瓜—芹菜一年三熟栽培模式即是其中的典型,3种蔬菜都经过农业     

中国林蛙抗菌肽Temporin-1 CEa基因的真核表达载体构建

为了建立大量获取中国林蛙抗菌肽的方法,根据GenBank中的中国林蛙皮肤抗菌肽Temporin-1CEa基因的mRNA序列(EU624139)设计一对特异性引物,以提取的中国林蛙皮肤总RNA反转录出的cDNA为模板,将扩增的编码序列与pEASY-T3克隆载体连接获得Tem-T3;利用酶切、连接等分子生物学手段,将GFP基因连入Tem-T3克隆载体,再经酶切获得Tem-GFP片段,并插入真核表达载体pcDNA3.1,最终得到Tem-GFP-pcD-NA3.1重组质粒;利用脂质体转染法将该质粒转入绵羊成纤维细胞,48 h后可在荧光倒置显微镜下观察到GFP的绿色荧光表达;qPCR数据分析显示,与对照组相比,转染Tem-GFP-pcDNA3.1的绵羊成纤维细胞中融合蛋白Tem-GFP的表达量可提高约300倍。本研究为构建Temporin-1CEa基因山羊乳腺特异表达载体提供依据。     

塑料薄膜包装对冷藏黑宝石李果实品质的影响

以黑宝石李为试材,在冷藏条件下研究了5种塑料薄膜包装对其果实品质及保鲜效果的影响。试验结果表明,0.03 mmPVC袋的果实品质最好;0.02,0.05 mm PE袋的好果率也在92%以上,但果实有轻微冷害,品质受到一定程度的影响;0.05 mmPVC和高渗CO2保鲜袋的保鲜效果最差,冷害和腐烂较重。与贮藏前相比,贮藏结束时,黑宝石李果实硬度和可滴定酸含量有所下降,可溶性固形物含量和果肉相对电导率有所上升,但处理之间差异不明显。