湖北部分地区鸭疫里氏杆菌的分离鉴定

对湖北省部分地区鸭疫里氏杆菌(RA)进行分离鉴定.应用胰蛋白大豆琼脂(TSA)培养基的分离培养及染色试验、生化试验、PCR鉴定,得到86株RA.染色观察各地RA分离株的细菌形态一致,符合RA特征;生化试验显示86株RA的生理生化特征相似,基本符合RA特征;应用建立的PCR技术均可从这些菌株扩增到RA的特异性基因片段.通...     

酵母糖蛋白和植物精油对蛋鸡产蛋性能及蛋品质的影响

试验旨在研究日粮中添加酵母糖蛋白、植物精油及其复合物对蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响。选取健康、体重及产蛋率接近的31周龄海兰灰蛋鸡288只,随机分为4个处理组,每个处理6个重复,每个重复12只蛋鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加300 mg/kg的酵母糖蛋白、200 mg/kg的植物精油、100 mg/kg的酵母糖蛋白与100 mg/kg的植物精油的复合物。试验期6周。结果显示：(1)日粮中添加酵母糖蛋白或植物精油对1～6周的平均蛋重、平均日采食量、料蛋比和产蛋率均无显著影响(P>0.05);(2)在试验第6周,酵母糖蛋白显著降低了料蛋比(P<0.05),且与对照组和复合物组相比,单独添加酵母糖蛋白或植物精油均提高了产蛋率7%以上;(3)日粮中添加酵母糖蛋白或复合物显著提高了蛋壳厚度(P<0.05),而日粮中添加植物精油或复合物显著提高了蛋壳强度(P<0.05)。以上结果说明,日粮中单独添加酵母糖蛋白或植物精油不影响蛋鸡产蛋性能,但有利于延长产蛋高峰期;在本试验条件下,日粮中同时添加酵母糖蛋白和植物精油有助于提高蛋壳质量。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)协同感染细菌性疾病的分析研究

为了解湖北某养殖场猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）流行毒株的遗传变异和临床感染情况,试验采集10份疑似PRRS发病仔猪的肺脏、淋巴结等临床样品,应用RT-PCR方法扩增PRRSV的Nsp2部分基因用于定性检测分析,并对扩增的其中2份PRRSV阳性样品进行ORF5基因核苷酸序列测定,结合不同疫苗毒株开展同源性比对分析。为进一步揭示病因,通过多重PCR方法对10份发病猪的肺脏和12份鼻拭子样品进行了相关致病菌的鉴定,并对其中的2株不同病原菌开展药敏试验。结果显示,10份临床样品中有5份检测到美洲型变异PRRSV,病原阳性率为50%。ORF5全基因序列分析表明,2个流行毒株间的核苷酸同源性为99.7%,与以TJM-F92、JXA1-R、HuN4-F112等为代表的高致病性致弱疫苗毒株核苷酸同源性最高,为96.7%~97.0%;与美洲型标准毒株VR2332的同源性分别为87.6%和87.9%;与国内较早分离的经典毒株（CH-1R和R98株）的核苷酸同源性分别为92.9%和87.4%、87.7%。患病猪临床常见感染模式为PRRSV+PM+SS、PRRSV+PM或PRRSV+HPS,2株主要致病菌药敏试验表明,多杀性巴氏杆菌对头孢曲松、阿莫西林等药物高度敏感,猪链球菌对阿莫西林、氨苄西林、阿奇霉素等药物高度敏感。本研究揭示了该场保育猪的发病病原,并从分子水平明确了临床PRRSV与不同疫苗毒株的亲缘关系,为弱毒疫苗的合理选择使用和综合防控PRRS提供了实践依据。     

猪圆环病毒2型疫苗与猪支原体肺炎疫苗混合免疫效果评价

为综合评价疫苗混合免疫效果,采用猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗和猪支原体肺炎疫苗混合、分开免疫对比试验,通过对疫苗不良反应率、猪群死淘率、日增重、PCV2抗体水平、肺部病变等比较进行效果评价。结果显示,免疫方式对疫苗不良反应率、死淘率、PCV2抗体水平无显著影响(P0.05),而混合免疫更有利于改善日增重、试验猪肺部病变程度,综合效果评价推荐混合免疫。     

组蛋白H3K4me3甲基化修饰与哺乳动物早期胚胎发育

表观遗传调控是细胞分化过程中的主要机制之一,尤其在生殖细胞分化调控中尤为重要。而组蛋白甲基化修饰是表观遗传信息的重要载体和生命活动的重要调控因子,对细胞的状态和胚胎的发生与发育具有决定性的作用,就组蛋白H3K4me3甲基化修饰与哺乳动物早期胚胎发育研究进展进行了综述。     

哺乳仔猪流行性腹泻的诊治

正猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以猪只急性肠炎、腹泻、呕吐、脱水为主要特征的一种高度接触性肠道传染病~([1])。2010年秋,PEDV变异株在免疫猪群突然出现,在我国多地暴发流行,给养猪业造成巨大经济损失~([2-3])。PED具有发病持续时间长和反复发病的特点,一年     

南方地区规模化养羊场粪污处理与利用

基于南方地区气候生态和养羊现状,介绍了规模化养羊场的粪污特点、粪污收集和处理相关设施设备、基本原则,重点分析了动态翻抛堆肥、商品有机肥加工的工艺流程以及氧化塘、水生植物塘、沼气工程等污水处理方法,提出了科技创新、政策支持、模式推介等建议促进有机肥还田利用,为规模化养羊场粪污处理利用提供参考。     

circ-13267通过let-7-19/ERBB4通路调控蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡

【背景】蛋鸭卵泡发育是决定其产蛋性能的关键因素。已有研究表明,禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程,目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解,但作为决定产蛋量的重要因素,卵泡发育的具体调控机理仍需进一步深入研究。颗粒细胞是卵泡中主要的功能细胞,可调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟,同时也精确的调控卵泡的生长发育,维持卵巢的正常功能（诱导排卵、维持成熟分裂的阻断、为卵母细胞提供底物等）。circRNA是一类新型的内源性非编码RNA,在卵泡发育中发挥重要的调控作用。【目的】通过构建circRNA过表达载体上调circ-13267的表达,研究circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞中的作用及其调控机制,为蛋鸭卵泡发育的调控机制解析提供依据。【方法】首先,利用Q-PCR检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质与细胞核中circ-13267的表达水平;构建circ-13267的过表达载体circ-13267-pLCDH,在蛋鸭颗粒细胞中过表达circ-13267后,利用Q-PCR法检测circ-13267、let-7-19、ERBB4、FAS和BCL2的表达水平;分别转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR于蛋鸭卵泡颗粒细胞,24 h后利用EdU法检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的增殖能力;将circ-13267的线性序列或ERBB4的3′ UTR克隆到pmirGLo载体中,同时对上述野生型序列中的let-7-19结合位点进行突变,得到表达突变型序列的载体,利用双荧光素酶报告基因验证circ-13267与let-7-19及let-7-19与靶基因ERBB4的结合关系;在蛋鸭卵泡颗粒细胞中转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR,利用流式细胞术和Annexin V-FITC检测蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡情况。【结果】环状RNA circ-13267在细胞质和细胞核中均有表达;双荧光素酶报告基因试验结果显示,let-7-19能与ERBB4结合,进而下调荧光素酶的活性,当ERBB4序列中let-7-19的结合位点突变后,let-7-19则无法抑制荧光素酶的表达,说明ERBB4是let-7-19的一个靶基因;荧光定量检测结果显示,过表达环状RNAcirc-13267后BCL2基因的表达显著降低（P<0.05）,而FAS和ERBB4基因的表达量显著升高（P<0.05）,当过表达let-7-19后,ERBB4基因的表达量显著升高（P<0.05）,而抑制let-7-19后ERBB4基因的表达量显著降低（P<0.05）;EdU试验结果显示,过表达circ-13267后蛋鸭卵泡颗粒细胞数量显著减少,说明其促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡;然而,在蛋鸭卵泡颗粒细胞中共转染circ-13267和let-7-19后,与对照组相比共转染组中BCL2和FAS的表达量均无显著变化（P>0.05）,而与过表达circ-13267组相比,共转组中BCL2基因的表达量极显著降低（P<0.01）、FAS的表达量极显著升高（P<0.01）,说明circ-13267促进蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡的作用被抑制;利用流式细胞仪检测转染后的蛋鸭卵泡颗粒细胞发现,与共转染circ-13267和let-7-19组相比,仅过表达circ-13267后,晚期凋亡细胞数和总凋亡细胞数均显著增加（P<0.05）,而活细胞数显著降低（P<0.05）。【结论】蛋鸭circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质和细胞核中均有表达,circ-13267可以吸附let-7-19并靶向ERBB4基因,从而促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡,为解析蛋鸭卵泡发育的调控机制提供理论依据。     

麻城黑山羊体重体尺分析

采用常规测量手段,测定麻城黑山羊母羊在不同生长阶段的体重和体尺数据,探讨其生长发育情况及选育进展,并与国内优秀山羊品种进行比较。结果表明,12月龄体重占成年体重的61.37%,6月龄和12月龄的体高分别占成年体高的81.06%和88.78%,体长分别占66.78%和86.51%,胸围分别占73.37%和79.98%,12月龄体尺指标基本达到和超过成年的80.00%,生长发育较快。与该场2009年数据相比,体重无显著变化,表明该场麻城黑山羊选育进展不明显,但品种也未出现明显退化现象;与国内其他优秀山羊品种比较,麻城黑山羊体重、体尺处于中等水平,应继续加大选育力度。     

湖北麻鸡多杀性巴氏杆菌的分离和PCR鉴定

从发病的湖北麻鸡中采集病料,通过细菌分离、生化鉴定,初步判定分离菌株为多杀性巴氏杆菌;应用PCR分别对病料组织和分离菌株进行检测,均能扩增出特异性的条带,PCR产物测序后经NCBIBlast分析,与多杀性巴氏杆菌同源性为99%。经过以上的试验分析,确诊为多杀性巴氏杆菌感染。