体细胞核移植技术生产猪植酸酶转基因胚胎的研究

为获得具有植酸酶腮腺特异性表达的猪转基因克隆胚胎,本研究使用植酸酶腮腺特异性表达的DNA质粒(包含腮腺分泌蛋白(parotid secretary protein,PSP)启动子与终止子序列、Neo筛选基因、绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因和高比活的植酸酶appA基因),采用脂质体转染和基因素418(G418)药物抗性筛选的方法获取稳转细胞系,并利用体细胞核移植技术获得植酸酶转基因胚胎。结果表明,本研究构建的DNA质粒可用于细胞筛选,且质粒越小,细胞的转染效率越高,14.89 kb的YM6552仅获得了7.1%的转染率,EGFP质粒则获得了43.4%的转染效率。在单克隆形成上,较小的pYN3600也获得了更高的单克隆形成数(25个),其中表达EGFP的单克隆有14个,植酸酶PCR阳性集落有11个,高于YM6552的单克隆数(19、8和6)。转基因细胞构建重构胚胎后,所有的胚胎均能表达绿色荧光蛋白,虽其体外发育能力有所下降,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,本研究所采用的植酸酶质粒、细胞筛选方法和核移植技术可生产植酸酶重构胚。     

植酸酶对肉鸡矿物质代谢的影响

植物性饲料是家禽饲料中的主要成分。植物性饲料中三分之二的磷以植酸盐的形式存在。由于单胃动物的消化道内缺少植酸酶,以植酸形式存在的植酸磷很少被单胃动物所利用。一方面,饲料生产中需要添加价值昂贵的商品磷源,另一方面,由于动物(特别是单胃动物)不能或很少利用植物饲料中的植酸磷,大量未被动物吸收利用的植酸磷随粪便排出体外,既造成了磷资源的浪费,同时又给环境造成了污染。畜禽粪便中磷对环境的污染已成为一些国家畜牧业发展的制约因素。 Nelson(1968a)首次报道了添加植酸酶可提高仔鸡对磷的利用率,但当时由于植酸酶的提取成本高、产量少、植酸酶的研究与应用未能引起人们的足够重视。近些年来,非植酸磷对环境的     

外源酶和柠檬酸对奥尼罗非鱼内源消化酶活性的影响

分别研究了饲料中添加外源消化酶、非淀粉多糖酶、植酸酶和柠檬酸对奥尼罗非鱼内源消化酶活性的影响.实验结果表明,与对照组相比,饲料中分别添加15 g·kg-1和30 g·kg-1的消化酶制剂,胃、肝胰脏、肠道蛋白酶活性分别升高了22.3%、17.7%、12.5%(P＜0.05)和42.0%、25.2%、16.5%(P＜0.01),肝胰脏、肠道淀粉酶活性分别升高了62.4%、28.8%(P＜0.05)和54.0%、27.4%(P＜0.05),肠道脂肪酶活性分别升高了23.2%(P＜0.05)和43.6%(P＜0.01);添加1 g·kg-1非淀粉多糖酶和植酸酶,肝胰脏、肠道淀粉酶活性分别上升11.4%、49.5%(P＜0.01)和14.0%、24.1%(P＜0.05),对胃、肝胰脏、肠道蛋白酶活性无显著影响;饲料中添加10 g·kg-1柠檬酸使胃蛋白酶活性提高29.6%(P＜0.01),肠道蛋白酶活性下降35.1%(P＜0.01),肝胰脏和肠道淀粉酶分别上升30.7%和29.4%(P＜0.01);饲料中添加非淀粉多糖酶、植酸酶和柠檬酸对肠道脂肪酶活性均无显著影响.     

低磷饲粮中超量添加植酸酶对肉鸡生长性能、屠宰性能、消化器官指数、养分表观利用率及胫骨指标的影响

本试验旨在研究低磷饲粮中超量添加植酸酶对肉鸡生长性能、屠宰性能、消化器官指数、养分表观利用率及胫骨指标的影响。选取1日龄罗斯308商品肉仔鸡公雏2 160只,随机分为5组,每组12个重复,每个重复36只。正对照组(PC组)饲喂基础饲粮,负对照组(NC组)饲喂低磷饲粮(钙和有效磷水平均比PC组降低0.15%),试验组在低磷饲粮的基础上分别添加500(NC500)、1 500(NC1500)和4 500 FTU/kg(NC4500)的植酸酶。试验期39 d。结果表明:1)NC和NC500组14、25和38日龄体重以及1~14日龄、15~25日龄和1~38日龄平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、育肥指数显著低于PC组(P<0.05)。除NC4500组1~38日龄ADFI显著高于PC组(P<0.05)外,NC1500和NC4500组38日龄体重以及1~38日龄ADG、ADFI、育肥指数与PC组差异不显著(P>0.05)。2) NC组钙表观利用率显著低于PC组(P<0.05),NC500、NC1500和NC4500组日均排钙量显著低于PC组(P<0.05)。NC500、NC1500和NC4500组磷表观利用率显著高于NC和PC组(P<0.05),日均排磷量显著低于NC和PC组(P<0.05)。3)NC组胫骨强度显著低于其他各组(P<0.05),NC4500组胫骨强度显著高于其他各组(P<0.05)。4) NC组26、39日龄肝脏指数显著高于PC组(P<0.05),NC1500和NC4500组26日龄空肠、回肠指数显著低于PC和NC组(P<0.05),NC1500和NC4500组39日龄肝脏、胰腺、十二指肠、空肠指数显著低于NC组(P<0.05)。5) NC组全净膛率、腿率均显著低于PC组(P<0.05),NC1500和NC4500组全净膛率显著高于NC组(P <0.05),NC500、NC1500和NC4500组腿率显著高于NC组(P<0.05)。6)与PC组相比,NC1500、NC4500组每只鸡收益分别增加了0.61、0.49元。由此可见,本试验条件下,低磷饲粮中超量添加植酸酶能改善肉鸡生长性能、屠宰性能,提高钙、磷利用率及胫骨强度,提高经济效益,其中植酸酶适宜添加量为4 500 FTU/kg。     

日粮磷、植酸酶和25-羟胆钙化醇对平而笼养肉鸡生长性能的影响

采用三个平面笼养肉鸡试验（试验一、二、三）研究非植酸磷（NPP：nonphytin phosphorus）需要的应用及层架式鸡笼试验中确定的植酸酶（PHY）和25-羟胆钙化醇（25D）对节约NPP的影响，试验期为49天。设定6个NPP日粮处理组，肉鸡分四阶段饲养。处理1到6分别如下：NRC（1994）的NPP（C）、马里兰大学NPP（UMD）、UMD NPP-0．0064％（UMD＋PHY）、     

植酸酶在不同反应条件下对大口黑鲈饲料中植酸磷降解率的影响

在大口黑鲈饲料中添加不同水平植酸酶(500、1000、1500U/kg),研究在不同反应时间、温度和pH值条件下饲料中植酸磷的降解率的变化。结果显示,植酸磷的降解率与植酸酶添加量的关系为1500U/kg>1000U/kg>500U/kg。饲料中添加500U/kg植酸酶可分解70%左右的植酸磷,添加1000U/kg植酸酶可分解85%左右的植酸磷,添加1500U/kg植酸酶可分解93%左右的植酸磷。1500和1000U/kg组植酸磷的降解率在催化3h后基本趋于平缓,500U/kg组植酸磷降解率在催化4h后趋于平缓。在20～40℃范围内,植酸磷的降解率随催化温度的升高而增加。在pH值1.5～6.5范围内,植酸磷降解率有两个高峰点,分别出现在pH值为2.5与5.5,在pH值为6.5时,各组饲料中植酸磷的降解率最低。在大口黑鲈饲料中添加植酸酶是可行的。     

有效磷和植酸酶对蛋鸡营养物质存留率的影响

研究了0.1%、0.2%、0.4%有效磷 (AP) 蛋鸡日粮中添加粗制植酸酶(CPE),对营养物质存留率的影响.结果表明,在0.1%、0.2%、0.4% 三个AP日粮中,添加CPE,使总能(GE)、粗蛋白(CP)、钙(Ca)的表观存留率显著增加(P＜0.05);使总磷(TP)的表观存留率极显著增加(P＜0.01).添加CPE后,当AP为0.1%时,使铁(Fe)、锰(Mn)的表观存留率显著增加(P＜0.05);锌(Zn)的表观存留率极显著增加(P＜0.01).当AP为0.2%时,使Mn的表观存留率显著增加(P＜0.05);Zn的表观存留率极显著增加(P＜0.01).当AP为0.4%时,Mn的表观存留率显著降低(P＜0.05);Cu的表观存留率极显著降低(P＜0.01).     

植酸酶在蛋鸡日粮中的应用

磷元素是动物生长、生产所需要的重要营养物质,而植物饲料中的磷６０％～８０％是以植酸磷的形式存在。由于家禽消化道缺少植酸酶,故对植酸磷的利用率很低。在饲料中添加植酸酶可以将磷从植酸酶中释放出来,这样就可以减少无机磷酸盐的添加。为了验证其对产蛋鸡的饲养效...     

植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建

植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以满足我国植酸酶转基因作物监管需要。此外,我们将6大作物(小麦、水稻、棉花、大豆、玉米和油菜)的内标准基因和植酸酶基因克隆到同一载体上,构建成了阳性质粒分子pBS Endogenous-phytase。该质粒分子适用于这6大作物中植酸酶基因的筛查检测。本研究为转植酸酶基因作物的安全监管提供了阳性材料和检测方法。     

植酸酶在动物生产中的应用概述

动物常规植物性饲料中约有60％～70％的磷是以植酸磷的形式存在于稳定的植酸盐复合物中,这些磷只有在植酸分解酶的作用下才能游离出来供动物吸收利用。单胃动物除成年禽外消化道中缺乏植酸酶,因而对植酸磷的利用率极低。许多研究证明,猪只能利用玉米中磷的10％～20％,豆饼中磷的25％～35％,家禽除成年禽外对植酸磷的利用率还略低于猪。饲料中大量的植酸磷不仅不能被利用而随粪便排入环境,造成