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通过大肠杆菌表达系统表达编码旋毛虫53kDa、49kDa ES基因重组蛋白P53、P49,这两种蛋白均可被感染旋毛虫(T.spiralis)小鼠阳性血清识别,应用重组蛋白P53和P49建立的两种间接ELISA检测感染鼠血清,探讨相关抗体消长规律及不同攻虫量血清抗体阳性时间差异.结果表明,血清相应抗体水平随感染时间的延长而增高,分别于27 d和31 d达到峰值,之后进入稳定期;不同数量T.spiralis攻虫后,各时期抗体阳性检出率P49-ELISA均优于P53-ELISA.综合敏感性和特异性,P49基因重组蛋白的敏感性和特异性更为适合用作检测旋毛虫病的理想抗原,并可应用于早期诊断,适合用于ELISA检测试剂盒的建立. 相似文献
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东北地区猪链球菌对大环内酯类药物耐药机制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用微量稀释法及双纸片扩散法测定了28株猪链球菌(S.suis)对大环内酯类药物的耐药性和耐药表型,红霉素、阿奇霉素和泰乐菌素耐药率分别为92.8%、92.8%和89.3%,耐药表型以内在型(cMLSB)为主。利用聚合酶链反应(PCR)检测红霉素耐药基因erm和mef,对ermA/B/C分型扩增、克隆、测序,26株菌扩增到ermB基因,16株菌扩增到ermA基因,其中15株同时扩增到ermB和ermA基因,1株未扩增到这两种基因的任一种;28株猪链球菌中均未扩增到ermC和mef基因。16株菌的c17nA基因核苷酸序列与GenBank中同源序列同源性为83%~100%,氨基酸序列与参照序列(X03216,1)相比突变点较多,有11株菌在34个位点处同时发生了改变;26株菌的ermB基因核苷酸序列与GenBank中同源序列相似性为98%~100%,氨基酸序列与参照序列(AY183117.1)相比突变点较少,与参照序列完全一致的有7株,其余株仅1~3个氨基酸不同。说明本地区猪链球菌对大环内酯类药物耐药情况很严重,耐药基因为甲基化酶ermA和/或ermB,ermA基因突变点较多,ermB基因相对稳定。 相似文献
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猪源链球菌对环丙沙星耐药性与耐药基因突变的相关性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过微量稀释法测定28株猪源链球菌对环丙沙星的MIC值,研究东北地区猪源链球菌对环丙沙星耐药性与parC、gyrA基因突变的相关性.通过PCR方法扩增parC和gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)并测序分析;18株耐药菌在parC基因80位的突变(AGC→ATT)导致氨基酸Ser→Ile突变,11株高度耐药菌在gyrA基因81位的突变(CAG→)CAT、CTT或CTA)导致氨基酸Ser→Ile、Phe或Tyr的突变.当菌株对环丙沙星的MIC值≤1μ/mL时,parC和gyrA基因的QRDR区均未有突变;而当MIC ≥2μg/mL时,ParC的氨基酸发生了Ser80→Ile的突变,同时发生GyrA氨基酸Ser81突变的菌株,耐药水平很高.研究表明,环丙沙星低水平类耐药是由于拓扑异构酶Ⅳ改变引起,而高水平耐药是由拓扑异构酶Ⅳ、DNA旋转酶共同改变引起的.实验结果证明,在一定条件下,耐药性的高低与突变位点的多少成正比. 相似文献
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以纯化的本地毛形线虫P49排泄分泌(ES)重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并确定了最适反应参数:抗原包被浓度4μg/mL;血清稀释度1:100,作用时间90 min;酶标二抗稀释度1:10 000,作用时间60min;最适封闭液为5 g/L聚乙烯醇(PVA);最适稀释液为含20 g/L PEG6000的PBS;底物最佳显色时间15 min.ELISA体系评价结果表明,该方法重复性好,灵敏度高,且可用于不同种株旋毛虫感染的P49血清抗体检测. 相似文献
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为找到促进苗木生长的最佳保水剂.辽宁省桓仁县林业种苗管理站进行了羧甲基纤维素钠与几种营养剂和保水基质混合施用的效果试验。结果表明,羧甲基纤维素钠与秸杆粉、氨基酸混合施用效果最佳。 相似文献
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