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本试验建立了绵羊血浆中多拉菌素的荧光高效液相色谱(HPLC)检测法。用乙腈作为血浆中蛋白质的沉淀剂和多拉菌素的提取剂,离心后取上清液用旋转真空蒸发器挥干溶剂,用5%乙腈-水溶解残渣后用ODS-C18固相萃取法对提取的多拉菌素进行纯化。用氮气在60℃沙浴中对提取和纯化后的多拉菌素进行干燥。在无水条件下,用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑作荧光衍生化试剂,在常温避光条件下对多拉菌素进行荧光衍生化。用荧光HPLC进行检测,检测条件:流动相为无水甲醇,流速1.0 mL/min,激发波长365 nm,发射波长475 nm,进样量20μL,柱温为20℃。结果表明,本方法的检测限为0.1 ng/mL,在1100 ng/mL血浆浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;样品的回收率为89.5%100 ng/mL血浆浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;样品的回收率为89.5%95.67%;不同浓度水平的日内变异系数和日间变异系数分别小于4%和5%。结果显示,本方法样品提取、纯化和衍生化过程准确、灵敏度高、干扰少、重复性好。 相似文献
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为研究鸡艾美耳球虫哈尔滨株单一虫种的生物学特性,本研究利用单卵囊分离技术分离了6种鸡艾美耳球虫哈尔滨株,用分离的单卵囊接种雏鸡,同时应用PCR方法对收集的单卵囊分离株进行球虫种类鉴定并进行同源性和系统进化分析.结果显示,分离得到的6株鸡艾美耳球虫分别为柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫,PCR结果表明单卵囊分离株确为该6种纯株.本研究表明毛细吸管单卵囊分离法简便易行,使接种难度降低,提高了接种成功率,为球虫的分子生物学研究奠定了基础. 相似文献
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为探讨外源NO(SNP为供体)对50 mol/L铜、镉毒害的缓解效应,采用营养液培养方法,研究了不同程度的铜、镉毒害(5 mol/L和50 mol/L)对番茄幼苗生物量、根系活力、硝酸还原酶、光合特性及生物膜ATPase、H+-PPase等功能蛋白酶活性的影响。结果表明,铜、镉胁迫显著抑制番茄生长。随处理浓度增加,番茄根系活力、硝酸还原酶活性显著降低,番茄长势越差; 铜、镉胁迫对根系离子吸收的影响远远大于叶片,尤其是铜胁迫,50 mol/L铜胁迫使番茄根系铜含量增加了12倍。铜浓度的增加对镉含量无影响,镉浓度的增加降低了铜的吸收。铜、镉胁迫使番茄净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)显著降低,胞间CO2浓度(Ci)显著增加,表现为非气孔限制。50 mol/L 铜、镉处理显著降低叶片、根系质膜H+-ATPase、Ca2+-ATPase和根系液泡膜H+-ATPase、Ca2+-ATPase和H+-PPase活性; 提高了5和50 mol/L部分处理叶片液泡膜H+-ATPase、Ca2+-ATPase和H+-PPase的活性。表明生物膜功能蛋白对不同程度铜、镉胁迫的响应时间和部位存在差异。铜毒害对细胞质膜ATPase的影响较大,而镉毒害对液泡膜伤害的程度较大。100 mol/L SNP可以显著缓解铜、镉胁迫导致的番茄生长受抑,铜、镉总吸收量显著高于胁迫处理。 相似文献