番茄抗青枯病品系(种)在恶劣条件下的抗性反应

对番茄青枯病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）具有抗性的１６个番茄品系（种）在温室条件下，分别测定第３和第７星期两个苗龄的植株对青枯病菌的抗性。结果表明：苗龄３星期与苗龄７星期植株的抗性无显著相关性；参试的大部分抗病品系在恶劣条件下（高温、高湿、高病菌接种体）抗性会丧失；提出ＧＡ１５６５－２－４ＢＷＴ和７５Ｗ－ＮＲＳ－１是两个高抗的抗病品系；可作为高温、潮湿地区抗病育种较为理想的抗源。     

番木瓜体胚间接发生方式的研究

 为了建立小果型番木瓜(Carica papaya L.)高效外源基因遗传转化体系，以小果型番木瓜'美中红'的幼胚(授粉受精后90~120 d)为材料,通过组织切片和电镜观察了体胚发生方式。结果表明，培养8~12 d，愈伤组织首先发生于幼胚的胚根端；培养26 d，整个幼胚的胚轴愈伤化，愈伤组织分为粘性透明和干性两大类，组织切片分为明显的两层，外层疏松易脱落，内层结构紧密；培养38 d，淡黄色的体胚前体发生于幼胚的胚芽端。番木瓜体胚的形态各异，大多数是形态正常的体胚，少数体胚的形态发生变异。     

香蕉细菌性软腐病菌的寄主范围及香蕉品种的抗性测定

以分离获得的3个香蕉细菌性软腐病菌为接种菌株,采用针刺和注射等接种方法进行了香蕉细菌性软腐病菌寄主范围的鉴定,并对香蕉不同品种的抗性进行了测定.结果表明,在供试的15科22种植物中有21种植物可以被病原菌侵染而发病,表明该病原菌寄主范围广泛.对我国普遍栽种的7个香蕉品种的抗性测定结果表明,不同香蕉品种抗性存在差异,其中皇帝蕉为高抗品种;农科1号、大蕉和巴西蕉为中抗品种;而金粉、广粉和威廉斯B6为中感品种.     

香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备

 制备香蕉线条病毒广东分离物（BSV-GD）的抗血清,可为BSV-GD 的快速检测和进一步研 究BSV 编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法,克隆了BSV-GD 衣壳蛋白（Coat protein, CP）功能域基因,构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP,并诱导表达了大小约为46.5 kD 的融合蛋 白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His 标签纯化试剂盒对目的蛋白进行纯 化、回收,获得了高纯度的融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原免疫健康大耳白兔,成功制备了BSV-GD CP 功能域基因编码蛋白的兔抗血清。Western-blotting 分析表明该抗血清具有很强的特异性,间接ELISA 法检测抗血清效价达204 800 倍以上,对植物材料的合适检测浓度为1︰1 600 ~ 1︰6 400。     

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用

 以受番木瓜环斑病毒（Papaya ring spot virus,PRSV）侵染的番木瓜（Carica papaya）叶片为供试材料,采用RT-PCR 方法克隆其外壳蛋白基因cp,并将其连接到原核表达载体pET-28b（+）上,酶切鉴定及克隆测序确定开放阅读框的正确性,将获得的重组质粒转化大肠杆菌表达宿主菌。通过摸索转化的表达宿主菌种类、IPTG 浓度及诱导时间,获得高效表达PRSV cp 的条件。SDS-PAGE 分析结果表明,CP 融合蛋白分子量为36.8 kD。以Ni2+-NTA 亲和层析柱纯化的融合蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备得到高效价抗体,间接ELISA 测定效价为1︰16 384。Western blot 检测结果表明,制备的抗血清可与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应。通过ID-ELISA 检测田间样品证实了制备的抗血清与PRSV 侵染病叶发生了良好的特异性反应。本试验为PRSV 的快速检测以及PRSV 编码蛋白的功能研究奠定了基础。     

转基因植物及其应用

综述了目前转基因植物的种类及其应用现状,介绍了有关转基因植物安全性的一些思考,对我国转基因植物的研究现状及其发展方向提出了一些看法。      

香蕉束顶病的研究进展

综述了香蕉束顶病的发生、危害、病原、病害流行学、病原的分类及其防治,探讨了今后需进一步澄清和解决的问题。     

银杏超小卷叶蛾成虫羽化规律及其预测模型初探

银杏超小卷叶蛾的虫情调查和虫情预测通常是基于成虫羽化后留下的蛹壳来实现.基于2015—2019年的多年多点观测数据,明确了成虫蛹壳分布及成虫羽化规律,并探讨了温度与羽化进度之间的相关性,初步构建了该虫羽化始盛期预测模型.银杏超小卷叶蛾蛹壳分布与寄主植株胸径有关,胸径20—30 cm的植株上蛹壳最多,太粗和太细的植株蛹壳数均偏少.此外,其分布还与光照有关,总体以向阳面偏多,背阴面偏少.银杏超小卷叶蛾有2个羽化高峰,其中3月底至4月初的羽化高峰期较为明显,羽化量占当年羽化总数的50％以上.通过多元逐步回归分析方法,基于2月下旬和3月上旬的平均温度,初步建立了银杏超小卷叶蛾成虫羽化始盛期预测模型y=95.545-0.509x2-0.031x1 x2,其R2为0.9999,P为0.0001,达到极显著水平,可以作为银杏超小卷叶蛾成虫测报模型参考应用.     

香蕉线条病毒MP功能域基因的克隆、原核表达及抗血清制备

【目的】制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清,为BSV基因编码蛋白功能的研究提供条件.【方法】对BSV-GD ORF3基因氨基酸序列进行生物信息学分析,得出MP功能域基因序列,克隆该基因并插入载体pET-28b(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用超声波裂解法进行蛋白可溶性分析,利用组氨酸标签纯化试剂盒对目的融合蛋白进行纯化和回收,然后以纯化的目的蛋白为抗原免疫健康家兔制备其多克隆抗血清;通过Western-blot分析该抗血清的特异性,间接ELISA法检测该抗血清的效价.【结果和结论】MP功能域基因在ORF3中的序列为61~311 aa处,核酸序列长753 bp.试验克隆了该基因并成功构建了其原核表达载体pET28b-MP,经IPTG诱导1 h后表达了相对分子质量约为30 800的融合蛋白6His·MP.可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在,纯化获得了高纯度的目的融合蛋白,以其为抗原成功制备了BSV-GD MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清;分析表明该抗血清具有很强的特异性,其效价高达204 800倍以上.     

水稻瘤矮病毒基因组第6片段（S6）序列测定与分析

 【目的】了解水稻瘤矮病毒（RGDV）基因组结构与功能。【方法】根据已报道的RGDV基因组各片段末端序列及其反向重复特性，采用4轮RT-PCR的方法扩增RGDV基因组第6片段（S6），用生物学软件进行序列分析。【结果】得到了该病毒S6的全序列。S6全长1 651 bp，G+C含量39.13%，包含一个长的ORF，起始于第25位，终止于第1 497位，编码490个氨基酸，分子量为53.3 kD。 【结论】该蛋白与伤瘤病毒（WTV）的P7的相似性为30.0%，与水稻矮缩病毒(RDV)的P7的相似性为31.7%。这是RGDV S6全序列的首次报道。