广东西瓜上检测到甜瓜黄斑病毒

在广东发现了可能被番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒侵染的西瓜,采用ELISA和RT-PCR法对该西瓜病样进行了检测,西瓜病叶粗汁液不与番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)和西瓜银斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)的血清发生反应;利用引物J13/UHP通过RT-PCR可以扩增出约1400 bp的基因片段,该片段包括一个840 bp的核衣壳蛋白ORF,其推导的氨基酸序列与已报道的Melon yellow spot virus(MYSV)NP基因氨基酸序列的同源率都为99%,进化树分析表明侵染广东西瓜的病毒(命名为MYSV-GZ)属于Tospovirus的MYSV血清组。     

应用TaqMan real-time PCR研究BSV在带毒香蕉组培苗中传递

由香蕉线条病毒(Banana streak virus,BSV)引起的香蕉线条病,严重影响了香蕉产量及种质资源交流。本研究根据BSV ORF Ⅲ基因保守序列设计引物和探针,建立了BSV的实时荧光定量PCR检测方法。该法检测BSV时,与黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)无交叉反应;不论是检测质粒DNA还是香蕉病株总DNA,其灵敏度都比普通PCR高,检测质粒DNA的灵敏度比普通PCR高100倍,检测香蕉病株总DNA的灵敏度比普通PCR高10倍,且具有良好的重复性。利用建立的实时荧光定量PCR方法检测我国主栽的不同香蕉品种‘大蕉’、‘粉蕉’和‘粤优抗一号’香蕉组培苗中BSV的浓度,发现不同品种BSV传递规律不同。‘大蕉’第3代、第9代组培分化芽中BSV含量较原代显著减少;‘粉蕉’中BSV含量随继代数增加表现为先增加后减少;‘粤优抗一号’中BSV含量随继代数增加呈增加趋势。BSV在‘粉蕉’、‘大蕉’和‘粤优抗一号’第10代到第12代组培苗中以顶部第1片或(及)第2片叶中含量最高。直接结合PCR分析初步表明不同品种在原代和组培至第12代,其植株中的BSV均为游离状态。本文通过对带毒香蕉组培苗中BSV的含量监测,明确了BSV在不同品种带毒香蕉组培苗中的传递和分布规律,为研究BSV与寄主互作及BSV检测提供了理论依据。     

我国南方1～6月水生蔬水生蔬菜主要病虫无公害防治

我国南方1～6月栽培的主要水生蔬菜有豆瓣菜(俗称西洋菜)、水蕹菜(又叫水通菜)、莲藕、菱等,为害严重的主要病虫有福寿螺、斜纹夜蛾、褐斑病等.     

番木瓜快繁研究进展

综述了番木瓜快繁中植体取材,灭菌,增殖和诱根等环节的影响因素,并对快繁中存在的问题进行了探讨。     

“植物保护学”教学优化与实践

"植物保护学"是植物生产类非植保专业本科生的专业基础课程,理论性和实践性很强。为了适应专业培养和社会人才的需求,课程组基于多年教学积累,进行了"植物保护学"教学改革。从优化教学内容,重视学科前沿融合;病虫害相结合开展实践,增加综合性探索实验,注重创新能力培养;有效利用新媒体技术,完善教学方法;改进考核评价体系等方面进行探索和实践,激发了学生的学习热情,提高了教学质量,获得了较好的教学效果,为高等院校"植物保护学"的课程建设提供思路。     

香蕉上两种病毒在香蕉分化芽中的PCR检测

香蕉线条病毒Banana streak virus（BSV）引起的香蕉线条病，与黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus（CMV）引起的香蕉花叶心腐病初期症状相似，香蕉Musa spp．感染这两种病毒后，产量和品质都受影响，防治香蕉病毒病的有效方法之一是种植无毒试管苗。通过检测香蕉分化芽中CMV，减少了香蕉花叶心腐病在广东的发生。[第一段]     

黄瓜花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立检测香蕉中黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV)的实时荧光定量方法.【方法】根据CMV外壳蛋白(CP)保守序列设计了TaqMan实时荧光定量PCR特异性探针及引物,优化反应体系检测TaqMan探针实时荧光定量方法的灵敏度、特异性和重复性.【结果和结论】该方法检测灵敏度为4.2×102μL-1,比普通PCR高100倍,且与香蕉束顶病毒Banana bunchy top virus(BBTV)、香蕉线条病毒Banana streak virus(BSV)无交叉反应,特异性和重复性都较好.用实时荧光定量PCR检测14份田间香蕉样品有5份样品为阳性,进一步证明建立的实时荧光定量方法可用于香蕉CMV的检测.     

番木瓜环斑病毒融合基因植物表达载体的构建

利用PCR重叠延伸技术（gene splicing by overlap extension，SOE）将番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus，PRSV）Vb株系的外壳蛋白（coat protein，CP）基因和Ys株系的复制酶（replicase protein，RP）基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进，并对改进的SOE的反应体系进行了优化，其中以Pyrobest DNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因n’构建在植物表达载体pCAMBIA2300上，测序结果表明，该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建，可为进一步获得对PRSV广谱抗性的转基因番木瓜奠定基础。     

香蕉病毒病发生和防控

【导读】香蕉是我国南方重要农业支柱产业之一,产量居世界第二位,是我国第四大水果,在海南、广东、云南、广西、福建和台湾等地大面积种植。我国香蕉病毒病害主要有香蕉束顶病、香蕉花叶心腐病和香蕉线条病,这3种病毒病在我国香蕉产区普遍发生,对香蕉病毒病害的防控有利于我国香蕉产业发展。     

建兰花叶病毒TGBp1自身互作研究

Cymbidium mosaic virus (CymMV) is one of the most important viruses that cause orchids great losses. Triple gene block protein 1 (TGBp1) is a multifunctional protein of CymMV. Homologous interaction of CymMV TGBp1 is essential for its biological functions, but little is known about the site of homologous interaction of TGBp1. In this study, three truncated mutants of TGBp1-1 (motif I, Ia), TGBp1-2 (motif II, III, IV) and TGBp1-3 (motif V, VI) were constructed based on its motifs respectively. Yeast two-hybrid (Y2H), bimolecular fluorescence complementation (BiFC) and GST pull-down were used to screen the site of homologous interaction among three truncated mutants of TGBp1 and TGBp1. The results showed that TGBp1-2 (motif II, III, IV) was the main site of homologous interaction of TGBp1. Our results provide a foundation for further research on the movement and replication of CymMV.