板芪益肺散药效学试验

为了研究自拟中药方剂板芪益肺散的止咳、平喘、祛痰和抗炎效果,本试验选用清肺散为对照中药,采用浓氨水引咳法、组织胺和乙酰胆碱引喘法、小鼠气管酚红排泌法和二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型法,检测了高、中、低剂量板芪益肺散[35.00、17.50、8.75 g/(kg·bw)]的药效。结果显示,板芪益肺散与清肺散的止咳作用相近(P>0.05),但2种中药方剂的止咳效果均明显低于阳性对照枸橼酸喷托维林(P<0.01);板芪益肺散具有良好的平喘效果,且其高剂量组平喘效果优于阳性对照氨茶碱与清肺散(P<0.01);板芪益肺散祛痰效果极显著优于阳性对照盐酸溴己新(P<0.01),但与清肺散作用相近(P>0.05);板芪益肺散具有一定的抗炎效果,抗炎效果极显著优于清肺散(P<0.01),但极显著低于阳性对照氢化可的松(P<0.01)。结果表明,自拟方剂板芪益肺散较传统方剂清肺散具有更为良好的平喘功效,止咳、祛痰作用明显,同时还有一定的抗炎活性,为该方剂的临床应用提供了数据支持。     

林可霉素微球制剂在鹅体内的药代动力学研究

为了解林可霉素微球制剂在动物机体内的药代情况,在鹅体内进行了两种剂型药物的药代动力学比较研究。试验选取健康鹅分为两组,即对照组肌肉注射30%林可霉素水溶液,试验组肌肉注射30%林可霉素微球溶液,0.5 mL/只。选取0~72 h内的不同时间点采集鹅血浆样品,应用高效液相色谱法(HPLC)对鹅血浆中林可霉素的含量进行检测。结果显示：试验组24 h内血液中林可霉素浓度维持在0.3 mg/L以上,72 h内血浆中林可霉素含量在0.145 mg/L以上;对照组24 h后血浆中检测不到林可霉素。结论为林可霉素微球制剂较林可霉素水溶液的药效持久,具有缓释性能并能够在较长时间内具有抑菌作用。     

牛粪有机肥与化肥配施对土壤重金属形态的影响

为缓解畜牧业产能的提高和日益严峻的畜禽粪污污染之间的矛盾,充分挖掘畜禽粪污肥料化利用的潜力,避免过量施用对环境带来的潜在重金属危害,本试验采用牛粪有机肥为研究对象进行盆栽试验,根据牛粪有机肥和化肥的不同配施比例,设置5个处理,测定收获后不同处理土壤中重金属铜、锌各形态质量分数,并进行土壤有机碳和pH的测定。结果表明,与CK组相比,配施牛粪有机肥可以降低土壤中重金属Cu、Zn的总质量分数,DF1处理组降低幅度最大,分别下降了25.54%、39.20%;与CK组相比,DF1和DF2处理组可交换态Cu分配率从15.86%分别提高至28.13%、42.02%,促进残渣态向可交换态转化,DF2处理组对分配率的提高幅度最大;与CK组相比,CD和DF1处理组残渣态Zn分配率分别降低至39.27%、38.40%,DF2处理组变化幅度最大,降低至24.33%。配施牛粪有机肥后,土壤pH、有机碳含量有上升趋势,其中土壤有机碳与土壤中有效态铜、锌的分配率变化趋势呈正相关,相关性显著(P<0.05),同时土壤有效态锌与土壤pH的变化趋势呈正相关,相关性显著(P<0.05),但重金属铜的有效态与pH...     

清肺颗粒固态发酵培养基成分研究

【目的】 筛选最佳的清肺颗粒固态发酵培养基碳源、氮源、无机盐种类,优化清肺颗粒发酵培养基组成,提高组方中（R,S）-告依春的含量。【方法】 建立发酵物中（R,S）-告依春含量的高效液相色谱法（HPLC）检测方法;单因素试验筛选清肺颗粒固态发酵培养基的碳源（葡萄糖、蔗糖、甘露醇、麦芽糖、玉米面、可溶性淀粉和清肺组方中药）、氮源（蛋白胨、黄豆粉、麸皮、酵母浸膏、硫酸铵、氯化铵和尿素）和无机盐（碳酸钙、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸锰和氯化钠）成分,HPLC测定每克固态发酵培养物中（R,S）-告依春含量;4因素（碳源、氮源、无机盐和水）3水平响应面分析优化各培养基成分比例,用筛选出的最适培养基成分替代基础培养基中相应物质,接种解淀粉芽孢杆菌,于37 ℃、130 r/min振荡培养22 h,再以每克固态发酵培养物中（R,S）-告依春含量为评价指标,以响应面分析筛选培养基各组分含量。【结果】 清肺颗粒最适固态发酵培养基碳源为组方中药粉,无机盐为CaCO₃,氮源为黄豆粉以及水;响应面分析优化的各培养基成分含量为：中药粉30%、黄豆粉10%、CaCO₃ 0.2%和水59.8%,此时固态发酵物中（R,S）-告依春含量达0.0184 mg/g,而未优化前清肺颗粒组方中（R,S）-告依春含量为0.0150 mg/g,二者差异极显著（P<0.01）,说明解淀粉芽孢杆菌的发酵工艺更有利于清肺颗粒组方有效成分的释放。【结论】 优化的固态发酵培养基易于解淀粉芽孢杆菌生长。     

鹅星状病毒、鹅细小病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用

为快速鉴别诊断鹅星状病毒(GoAstV)和鹅细小病毒(GPV),根据GoAstV和GPV基因序列保守区域设计了两对特异性引物,通过PCR扩增目的片段并构建重组质粒,建立了一种可同时检测这两种病毒的PCR诊断方法。该方法能够特异性扩增出两种病毒的相应片段,而对鹅副粘病毒(GPMV)、鹅流感病毒(GAIV)、鹅腺病毒(GADV)、鹅圆环病毒(GoCV)均无扩增,对重组质粒的最低检测拷贝数分别为1.25×10³ copies和1.25×10⁵ copies。应用该方法对50份鹅临床脏器样品进行检测,结果检测出GoAstV 35份、GPV 2份,GoAstV和GPV混合感染2份。结果表明,研究建立的双重PCR检测方法快速、特异、敏感,可用于GoAstV和GPV的流行病学调查和疾病监测。     

一株干酪乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本研究旨在分离既能用于微生态制剂又能用于青贮饲料发酵剂的优良乳酸菌,采集规模化牛场青贮饲料,取梯度稀释液涂布MRS平板,进行厌氧培养,筛选优势菌株,观察其菌落形态,并进行生化试验和特异性PCR鉴定。研究自筛乳酸菌的生长曲线、产酸曲线、培养温度及培养基初始pH对菌株生长的影响,并研究其抑菌特性、药物敏感性和安全性。试验筛选到1株菌落形态圆形、边缘整齐、表面光滑、乳白色、镜检为革兰氏阳性的无芽孢杆菌。生化结果显示,分离菌株可厌氧生长,运动性试验、过氧化氢酶试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、吲哚试验结果均为阴性,15种糖醇发酵试验结果符合干酪乳杆菌生化特征。用干酪乳酸杆菌特异性引物对菌株进行PCR鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果显示在727 bp处出现特异性扩增条带,与生化鉴定结果相符,将分离菌株命名为RS1。RS1在0~4 h时发酵液pH变化不明显,处于生长延迟期;4~16 h时发酵液pH下降较快,进入对数生长期;16~36 h时发酵液pH下降缓慢,进入稳定期。RS1在培养温度为20~50 ℃范围内均能生长,适宜生长温度为25~40 ℃;在培养液初始pH 1.0~9.0条件下均能生长,最适pH为6.0~8.0;对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为23 mm,对大肠杆菌的抑菌圈直径为17 mm;对恩诺沙星和头孢他啶耐药;经14 d灌服小鼠生长状况良好。上述结果表明,本试验筛选到的干酪乳杆菌RS1安全、无致病性,在微生态制剂及生物饲料添加剂领域具有潜在的开发价值。     

一株产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定及其酶促反应适宜条件初步研究

为了分离、筛选产纤维素酶益生菌,确定其酶促反应适宜条件,利用羧甲基纤维素钠等作为筛选培养基,结合刚果红染色法,从玉米青贮饲料样品中筛选产纤维素酶益生菌,并通过形态学和系统进化树方法鉴定分离菌。同时对培养时间、pH和温度等酶促反应条件进行了研究。结果表明,筛选出1株可降解羧甲基纤维素,并产生清晰透明圈的菌株。经形态学观察和16SrRNA基因序列分析,鉴定该菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。粗酶液中滤纸酶活为1.5U/mL,外切葡聚糖酶活为1.3U/mL,内切葡聚糖酶活为6.4U/mL,β-葡萄糖苷酶活为2.3U/mL。酶促反应的适宜条件为pH 5.5,温度50℃,粗酶液为培养3d后发酵液上清。解淀粉芽孢杆菌分离株具有一定的产纤维素酶能力,在玉米秸秆生物降解与利用方面具有潜在的开发价值。     

干乳期奶牛乳房炎防治与保健

在奶牛妊娠后期,随着机体与乳腺生理的变化,奶牛泌乳量不断下降。为修复乳腺组织,使下一泌乳期能够达到理想的产奶量,同时为胎儿生长发育提供良好营养条件,奶牛需要干乳期进行调整。从停止挤奶至产犊前15天这段时期通常称为干乳期。干乳期包括自动退化期、退化稳定期和生乳期。     

解淀粉芽孢杆菌SSY2颉颃霉菌物质的鉴定及其理化性质研究

试验旨在鉴定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗霉菌物质及其理化性质。通过活性组分分析、硫酸铵沉淀、超滤除盐等方法鉴定并提取抗菌物质；通过对抗霉菌物质产生的时间、酶活性、温度、酸碱度（pH）、稳定性及储存温度的检测初步确定其理化性质。结果表明，不同组分对霉菌的降解率不同，菌液上清液对霉菌的降解能力最强，菌液发酵液的降解能力次之，胞内液降解能力最差。因此，初步确定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗菌物质活性成分是一种胞外分泌物，主要存在于菌液上清液；经30%、60%、80%和100%饱和硫酸铵沉淀，确定最佳硫酸铵饱和浓度为60%；超滤纯化后得到分子质量大于3 ku的抗菌活性物质。理化性质检测结果表明，该抗菌物质能在对数期早期（24 h）开始产生；具有产蛋白酶活性，对胃蛋白酶具有一定抵抗力，但对蛋白酶K、碱性和中性蛋白酶的抵抗力较低；在60~121℃抗菌活性稳定，证明其对热不敏感；耐酸性较强，在pH 6.0~8.0环境中对霉菌的抗菌活性稳定；此外，抗菌物质具有良好的传代稳定性，可在4℃条件下长期保存。本试验结果可为后续研发霉菌生物防控制剂提供依据。