核糖开关的研究与应用

核糖开关被定义为一类位于mRNA3''-或5''-UTR上的能够结合小分子代谢物以调控基因的转录和翻译的mRNA顺时作用元件。这个来源于RNA世界的分子化石已经引起了越来越多的人的关注，本文就核糖开关的作用机理及其应用做一综述。     

切腹接嫁接仁用杏试验

仁用杏杏仁富含营养,用途广泛,是食品、医药等多种行业的重要原料,其产品在国际市场上供不应求,各地栽植的势头逐年高涨。由于仁用杏木质较硬,皮层较薄,接后遇雨易出现流胶,愈伤组织形成时间长,所以育苗中嫁接成活率较低,因此苗木短缺已成为实际问题,造成生产中出现用低档劣质苗木建园的现象。     

永胜县农机化发展现状分析与对策

永胜县是云南省农业大县，全县耕地总面积2．7万hm^2，2008年全县粮食播种面积达3．5万hm^2，粮食总产17．07万t，是全国、全省商品粮基地县。全县可机耕面积1．1万hm^2，2008年完成机耕作业面积5733hm^2，机收面积156hm^2。近年来，我县的农机化呈现出快速发展的态势，农机装备总量持续增长，为改善农业生产条件，提高劳动生产率，促进农业节本增效，农民增产、增收做出了重大贡献，农机化已成为推动我县农业发展的重要力量。     

基于ipaH基因的志贺菌LAMP检测方法的建立及应用

为建立一种快速、特异、敏感的志贺菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法,试验针对志贺菌属侵袭性质粒抗原H基因(invasive plasmid, ipaH)设计一套特异性引物,条件优化及特异性和敏感性验证后建立了该菌的LAMP检测方法,并应用于临床样本的检测。结果显示,62℃恒温扩增1 h能得到明显的扩增产物,除志贺菌标准菌株扩增结果为阳性外,沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和阴性对照均为阴性,检测限值达到120 fg/μL。利用建立的方法检测了20株疑似菌株和38份粪样样品,结果显示20株疑似菌和27份粪样样品为阳性,阳性率分别为100%和71.05%,说明建立的LAMP检测法具有良好的特异性和敏感性,在粪便等临床样本中志贺菌的检测与鉴定方面具有优势和应用前景。     

鱼塘石砌护坡勾缝技术要点

一、实验条件我场地处闽西北的丘陵山区,为办城市淡水鱼商品基地,八十年代初只好采用沙壤土的“烂冬田”建造鱼塘,而该种土质的土坝经二三年养殖中的风浪冲刷,底层鱼类挖掘便逐渐崩塌,水位降低,产量减少。若遇上下两口鱼塘落差大,极易形成险坝。过去曾发生一口面积７．８８亩鱼塘垮坝逃鱼事件,渔农经济损失极为惨重。为建成高标准的基地与解决这一难题,我们在１９８４年就利用从附近山上开采的花岗岩石先砌护坡,尔后用水泥沙浆勾缝,由于池塘有机肥呈酸性,对水泥的腐蚀,以及缝隙用水泥砂浆无法填满,使用二三年就开始脱落,在扦捕商品鱼时,小规…     

核桃冬季管理“五字诀”

冬季是核桃Juglans regia L.管理的重要季节,对提高来年核桃产量与品质,具有十分重要的意义。在林业生产实践中,核桃冬管方法比较多,应因地制宜地采取相应措施进行冬管。归纳冬管方法,用5个字可以概括：翻、肥、砍、剪、防。（1）翻：就是将核桃树下的土壤深翻一下。     

地衣芽孢杆菌GXN151的纤维素酶基因cel12A的序列分析及其在大肠杆菌中的表达

地衣芽孢杆菌菌株GXNl51的cell2A基因为783bp,可编码含261个氨基酸的羧甲基纤维素酶Cel12A,Cel12A的N-末端第1～28氨基酸具典型的信号肽特征、第9～31氨基酸具跨膜功能域特征、第104～261氨基酸形成家族12糖基水解酶(glycosyl hydrolase)功能域。将编码其第73-261氨基酸的DNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET一30a( )得表达质粒pGXNl2A,用1mmol／IPTG诱导处理JMl09(DE3)／pGXNl2A的培养液6h pGXNl2A的表达量达到最高,在JMl09(DE3)和BL21(DE3)pLysS中该表达蛋白质可分别占菌体胞内总蛋白的54．3％和20．9％。在含羧甲基纤维素的LA平板上JMl09(DE3)／pGXNl2A和BL21(DE3)pLysS／pGXNl2A表现有较弱的羧甲基纤维素酶活性,说明重组的Cell2A的催化功能域具有独立的催化活性。包含体检测表明pGXNl2A在JMl09(DE3)中的表达产物大部分形成不溶性包含体。     

鸭疫里默氏杆菌recA基因突变对其生长及DNA损伤反应的影响

DNA损伤反应（SOS response）是细菌应对基因组DNA损伤的一种重要的保护机制。RecA蛋白在许多细菌中对SOS反应的诱导都起关键调控作用,其同源蛋白广泛存在于各种生物体中。本研究对鸭疫里默氏杆菌RecA蛋白是否调控其SOS反应进行探索。构建recA基因缺失株和回复株,检测亲本株、缺失株和回复株在紫外线辐照损伤下的生长能力、recA基因的转录水平以及SOS反应。结果表明,成功构建了recA基因缺失株ΔrecA和回复株cΔrecA;recA基因灭活对鸭疫里默氏杆菌RA-GD株的生长速率无明显影响;在紫外线辐照损伤下,亲本株recA基因的转录水平明显升高,缺失株的存活能力及其基因组的完整性都显著低于亲本株和回复株。本研究证实RecA蛋白参与鸭疫里默氏杆菌的SOS反应。     

重组牛IFN-γ蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化和鉴定

为合成与天然构象相似的干扰素γ蛋白,通过优化干扰素序列的密码子序列,利用杆状病毒表达系统合成真核重组牛IFN-γ蛋白。实验化学合成牛IFN-γ基因,并将该基因克隆至真核表达载体pFastBacHTA中,将构建成功的重组载体与DH10Bac感受态大肠杆菌进行转座形成穿梭载体,穿梭载体质粒瞬时转染至SF9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒,最后利用SF9昆虫细胞悬浮培养大量表达目的蛋白。蛋白纯化后经Western Blotting和BOVIGAM牛分枝杆菌IFN-γELISA检测试剂盒检测分析,具有较好的免疫原性和反应原性。研究结果为牛IFN-γ的单克隆抗体制备以及牛结核病临床诊断奠定了基础。