绒山羊主要经济性状相关基因研究进展

随着分子生物学和生物信息学的发展及应用,目前已有诸多研究从影响绒山羊产羔率、繁殖力、产绒性状等主要经济性状相关基因方面着手,对相关基因进行了筛选和鉴定。对绒山羊繁殖性能、生长性状、产绒性状尤其是毛囊发育等主要经济性状相关基因的研究进行了综述,为后续开展绒山羊育种工作,建立高品质羊群提供借鉴和参考。     

山羊卵泡发育相关基因的筛选及分析

【背景】山羊第一卵泡波中的优势卵泡（dominant follicles, DF）和从属卵泡（subordinate follicles, SF）是整个卵泡发育过程中最为关键的两个阶段。随着卵泡的进一步发育,最终DF可能发育成为成熟卵泡,直到排卵;SF将走向闭锁,其中颗粒细胞的凋亡是导致卵泡发生闭锁的关键因素。然而目前对促进卵泡的优势化或导致其闭锁的分子机理尚不清楚。【目的】通过对山羊第一卵泡波中DF和SF颗粒细胞进行高通量测序,旨在筛选影响卵泡发育的关键基因,为深入探究卵泡发育的调控机制提供理论依据。【方法】选取10只1岁龄健康的贵州白山羊分别注射前列腺素F_2α,使其同期发情,此后每天用B超检测并记录卵泡的生长情况,发情3 d后,统一屠宰并采集第一卵泡波中DF (直径4.5—6 mm)与SF (直径3 —4.5 mm),分别分离其中的颗粒细胞,提取总RNA、构建文库后通过Illumina Hiseq 2500平台进行测序。利用FastQC对测序产出raw reads进行质量评估并经过过滤后,获得品质较高的clean reads;使用Trinity对得到的clean reads进行重新组装,从而获得unigenes;使用CLC Genomics Workbench将unigenes与山羊RefSeq数据库进行比对获得mRNA;使用DESeq2 软件对获得的mRNA进行差异表达分析;分别采用goseq和kobas软件对得到的差异表达基因进行GO分析及KEGG信号通路分析;最终通过qRT-PCR对筛选出的可能影响卵泡发育的关键基因进行验证。【结果】分别对测序得到的raw reads进行过滤后,在DF颗粒细胞中获得43 217 934条clean reads,占raw reads的比例为95.19%;SF颗粒细胞中获得40 766 348条clean reads,占raw reads的比例为95.35%。将得到的unigenes与山羊的RefSeq 数据库进行比对后,共得到33 896条带有注释的转录本,再通过设定FPKM>1, q value<0.05,共在两种卵泡颗粒细胞中获得13 644个基因。设定参数：FPKM≥1,SF-FPKM/DF-FPKM>1,P<0.05,获得695个差异表达mRNA,其中233个在SF颗粒细胞中表达显著上调,462个表达显著下调;对所获得695个差异表达mRNA进行GO功能富集分析,共分为三大类42组：其中生物学过程占47.6%,细胞组分占47.6%,分子功能占4.8%;KEGG信号通路分析,发现20条通路,其中与核糖体通路相关的基因富集最为显著。通过在Genecard中进行功能分析后,筛选6个可能与山羊卵泡发育密切相关的基因,其中PRLR、PTX3、RGN在SF颗粒细胞中表现为上调;DKK3、ALDH1A2、RARRES1则表现为下调。qRT-PCR显示PRLR、RGN、DKK3、ALDH1A2、RARRES1的表达趋势与高通量测序结果一致,且RGN在从属卵泡颗粒细胞中的表达量极显著地高于优势卵泡（P<0.01）;DKK3、ALDH1A2、RARRES1在优势卵泡颗粒细胞中的表达量极显著地高于从属卵泡（P<0.01）。【结论】DKK3、ALDH1A2、RARRES1和RGN在优势卵泡和从属卵泡中表达量存在极显著差异,推测在山羊卵泡发育过程中可能促进卵泡的优势化或导致闭锁,对深入探究卵泡发育的调控机制具有重要意义。     

'京白梨'不同序位果实发育动态及成熟期内在品质差异分析

以‘京白梨’为材料,本试验比较研究其高、低序位果实发育动态及成熟期内在品质差异。结果表明,整个果实发育期内,高序位果实的果形指数高于低序位果实,但单果重低于低序位果实;果实成熟时,低序位果实单果重达到特级果要求,果形指数也符合京白梨标准果形。高、低序位果实硬度差异不显著,但低序位果实可溶性固形物显著高于高序位果实。低序位果实的蔗糖、果糖含量显著高于高序位果实,但高、低序位果实在葡萄糖含量及各糖组分占比上均差异不显著;低序位果实L-苹果酸含量及其占比显著高于高序位果实,琥珀酸含量及占比则显著低于高序位果实,低序位果实固酸比显著高于高序位果实。     

饲养密度和硫辛酸对肉鸡血清指标、行为及骨骼发育的影响

本试验旨在研究高饲养密度条件下饲粮中添加硫辛酸(LA)对肉鸡血清指标、行为及骨骼发育的影响。试验选取健康状况良好、体重相近的1530只21日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分成3组,即常规饲养密度组(ND组,15只/m^2,饲喂基础饲粮)、高饲养密度组(HD组,18只/m^2,饲喂基础饲粮)和高饲养密度+LA组(HD+LA组,18只/m^2,在基础饲粮在添加300 mg/kg LA),每组6个重复。试验期为3周。结果表明:1)与ND组相比,HD组肉鸡血清钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性显著下降(P<0.05),血清皮质酮(CORT)含量以及还原型辅酶Ⅱ氧化酶(NOX)和髓过氧化物酶(MPO)活性显著上升(P<0.05)。2)与ND组相比,HD组肉鸡行走、梳翅、采食频次与时间占比显著降低(P<0.05),而饮水频次以及饮水和趴卧时间占比显著升高(P<0.05)。3)与ND组相比,高饲养密度显著降低肉鸡胫骨与股骨直径、重量、密度、强度以及钙、磷、灰分和矿物盐含量(P<0.05)。4)与HD组相比,HD+LA组肉鸡血清钙含量和ALP活性显著升高(P<0.05),血清CORT含量以及NOX和MPO活性显著下降(P<0.05);采食频次和时间占比显著增加(P<0.05),饮水频次和趴卧时间占比显著降低(P<0.05);胫骨质量以及钙、磷含量与股骨密度、强度和钙含量显著上升(P<0.05)。综上所述,高饲养密度致使肉鸡发生氧化应激,改变了肉鸡行为,并使肉鸡骨骼质量下降,而饲粮中添加LA能在一定程度上缓解高饲养密度对肉鸡造成的损伤。     

干扰TP53INP2抑制牛成肌细胞分化

【背景】肌肉可以维持哺乳动物运动功能并调节机体代谢,它的数量和分布对肉质有重要影响,骨骼肌的生长发育及其遗传特性在很大程度上影响甚至决定家畜的产肉量和肉品质,研究骨骼肌的生长发育具有重要意义。TP53INP2对自噬的调控作用以及对前体脂肪细胞分化的调控机制已有研究,而对于牛成肌细胞分化的影响尚未报道。【目的】探究TP53INP2对秦川牛成肌细胞分化的影响,为肉牛肉用性状分子育种工作提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR）技术检测了TP53INP2在24月龄秦川牛不同组织中的表达特性,同时分析了其在体外培养的牛骨骼肌成肌细胞不同分化时期的表达规律;合成TP53INP2基因siRNA并转染秦川牛成肌细胞,转染后12h进行诱导分化,观察成肌细胞表型变化,并利用RT-qPCR技术和Western Blot技术分别检测其在诱导分化第四天时分化标志基因和蛋白的表达情况。【结果】1.RT-qPCR结果显示,TP53INP2在成年秦川牛背最长肌组织中表达量最高,在小肠组织中表达量最低。TP53INP2在成年牛心脏、肝脏、肾脏、网胃、瘤胃中表达量较高,在其余组织中表达量较低（与背最长肌相比）。2.随着成肌细胞的分化,该基因在第0—4天表达量呈上升趋势且在第4天达到峰值,随后表达量呈下降趋势。3.在成肌细胞中干扰TP53INP2后,试验组肌管的数量和长度均显著低于对照组。4.干扰TP53INP2并提取细胞总RNA,RT-qPCR结果显示,成肌细胞分化标志基因肌细胞生成素（MYOG）和肌球重链蛋白3（MYH3）相对于对照组表达量显著降低。5.干扰TP53INP2并提取细胞总蛋白,Western Blot结果显示,试验组MYOG、MYH3、MYOD的蛋白表达量均降低且与对照组相比差异极显著。【结论】干扰TP53INP2对牛成肌细胞的分化具有抑制作用,提示该基因可能对秦川牛肌肉组织的生长发育具有重要的调控作用,可对其进行深入的功能研究以期用于肉牛的分子育种实践中。     

蛋鸡育成期的的饲养管理

蛋鸡育成期是指蛋鸡7周龄到产蛋前这一时期。育成阶段是蛋鸡骨骼、肌肉和生理器官发育的关键时期。为了使全价饲料中能量和蛋白质更符合育成鸡的发育阶段特点和营养要求,一般需改换日粮配方两次：第一阶段是7-12周龄,第二阶段是13周龄-开产5%左右。现将蛋鸡育成期的饲养管理要点介绍如下,供广大养殖者参考。     

玉米的生育期划分及生长发育特性

1按生育期分类玉米生育期是指玉米从播种到新种子成熟所经历的天数，生育期的长短因品种、播种期、光照、温度等环境条件差异而有所不同。玉米全生育期分为播种、出苗、三叶、七叶、拔节、抽雄、开花、灌浆、乳熟、成熟等主要发育时期。播种期为播种当天日期，出苗期不全田苗高2~3厘米左右的幼苗出土达60％以上。拔节期为全田60％以上的植株基部茎节开始伸长。大喇叭口期为全田60％以上的植株上部叶片呈现喇叭口形。抽雄期为全田60％以上的植株雄穗尖端露出顶叶3~5厘米。吐丝期为全田60％以上的植株雌穗花丝露出苞叶。成熟期为全田90％以上的植株籽粒硬化，并呈现出品种固有颜色和光泽，籽粒乳线消失。全生育期适宜的气象条件为平均日温超过15℃无霜期内，均可种植玉米。生育期耗水量500~800毫米，春种全生育期日照时数为900小时，回茬为610小时，套种比回茬高280小时。不利气象条件为积温减少100℃，减产7.6%。     

苏北地区金纹细蛾发生规律初报

苏北地区是江苏重要的苹果生产基地,近年来金纹细蛾发生危害较为严重。笔者在２０００ 年至２００３年,通过田间调查和室内测定,研究了金纹细蛾的生活史、生活习性、越冬情况,系统测定了其田间种群消长规律和发育进度,摸清了发生与环境条件的关系。研究成果对苹果金纹细蛾的防治具有指导意义。     

养殖场使用兽药原粉与制剂的利弊浅析

定州一位养鸡户饲养的5000只蛋鸡,现200日龄,产蛋率仅达到83%。解剖病死鸡2只,一只腹腔内有一个似大枣状硬硬的团块,将其切开,呈现黄白色干酪样物,且与腹气囊相通;卵巢未发育,输卵管未发育,内有花生粒大小浅黄色干酪样物。另一只鸡输卵管异常增粗,内有大量干酪样块状物占据了整个腹腔。经过询问,该养殖户为了降低养殖成本,经常使用原粉治疗鸡病。该鸡群是发生支原体以及大肠杆菌病后使用原粉时间过长,治疗不彻底造成的输卵管炎后遗症。类似病例在临床上时有发生,对此笔者就兽药原粉的危害和     

不同饲养模式对当雄藏系母绵羊体重发育的影响

试验在不计饲养成本的条件下,研究了自由放牧、半舍饲、全舍饲3种饲养模式对当雄藏系母绵羊体重变化的影响。结果表明:9月龄到周岁阶段,补饲燕麦干草的半舍饲组较自由放牧组试验羊体重下降少;燕麦青干草+精料颗粒料全舍饲饲养组,试验羊6月龄体重可达成年羊体重的73.18%,9月龄体重可达成年羊体重的88.80%,周岁体重可达成年羊体重的112.06%;在晚间补饲燕麦青干草和精料颗粒料的半舍饲条件下,试验羊6月龄体重可达成年羊体重的70.23%,9月龄体重可达成年羊体重的86.09%,周岁体重可达成年羊体重的93.43%;与其他各试验组相比,以全舍饲的燕麦青干草+精料颗粒料组为最好。