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苏云金芽胞杆菌新型vip3Aa基因的克隆、表达与活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为了发掘新型vip3基因,本研究采用PCR和高分辨熔解曲线的方法对72株菌株中vip3基因进行了鉴定和分析,结果表明,有18株菌呈阳性,分别含有vip3Aa、vip3Af和vip3Ba共3类vip3基因。根据已知vip3基因的全长序列设计引物,以菌株T03B001(B.thuringiensis subsp.sumiyoshiensis)的总DNA为模板扩增出长为2.37kb的全长基因,插入表达载体pEB,转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)菌株,在低温条件下经IPTG诱导后,表达88kD的蛋白,该蛋白由789个氨基酸组成,与已知的Vip3Aa氨基酸一致性为96%,已被国际Bt命名委员会正式命名为Vip3Aa39,GenBank登录号为HMI17631。Vip3Aa39蛋白与本实验室此前获得的Vip3Aa11蛋白进行比较,发现两者存在39个氨基酸的差异。两种蛋白的表达产物采用饲喂法分别对小地老虎(Agrotis ipsilon)、小菜蛾(Plutella xylostella)、棉铃虫(Helicoverpa armigera)和甜菜夜蛾(Spodoptera exigua... 相似文献
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辣椒叶片离体培养与植株再生 总被引:20,自引:0,他引:20
以辣椒无菌苗叶片为外植体,就激素对其不定芽分化及植株再生的影响进行了研究。结果表明,BA对叶片不定芽的诱导效果最好,ZT次之,KT不能有效地诱导叶片形成不定芽;IAA与BA相配合使叶片不定芽分化频率明显提高;IBA或NAA与BA的激素组合使叶片不定芽分化频率有所下降;2,4-D对叶片不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加1.0mg/L GA3有利于不定芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的MS 相似文献
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