鹅源鼠伤寒沙门菌crp、hfq基因缺失株的构建及生物学特性分析

为构建鹅鼠伤寒沙门菌单基因缺失株并鉴定其生物学特性，本研究以广东地区鹅源鼠伤寒沙门菌流行株A29为研究对象，采用λ-Red同源重组技术，分别构建crp、hfq基因缺失株(A29Δcrp和A29Δhfq)及相应基因回补株，并分别采用相应引物经PCR鉴定。通过细菌培养，对各菌株生物学特性进行比较；通过PCR鉴定各菌株的遗传稳定性；采用K-B纸片扩散法检测各菌株的药物敏感性；将各菌株纯培养物经腹腔注射4周龄小鼠，测定各菌株对小鼠的毒力，并观察感染后小鼠的临床症状及各组织剖检病变与组织病理变化。PCR和测序结果表明，正确构建各基因缺失株和相应回补株。生物学特性试验结果显示，与亲本株相比，A29Δcrp菌落直径极显著变小(P<0.001)，不产酸、不产生H₂S，菌体极显著变短(P<0.001);A29Δhfq菌落边缘不整齐，不产生H₂S，菌体极显著变长(P<0.001)，表明crp、hfq基因影响细菌的菌落形态、生化特性和形态特征。菌株遗传稳定试验结果显示，菌株传至60代时，基因缺失株仍能够稳定缺失。药敏试验结果显示，与亲本株比较，A...     

番茄红素合成调控基因 SISGR1的分子特征及sgRNA分析

旨在明确番茄 SlSGR1基因的分子特征及其sgRNA的分布，为利用CRISPR/Cas9 技术对 SlSGR1及其上游启动子序列进行定点突变或片段删除、调控 SlSGR1的表达为提高番茄果实的番茄红素含量提供技术支持。利用Blast分析番茄红素合成调控基因 SlSGR1的分子特征，结果表明 SlSGR1基因位于番茄第8号染色体，含4个外显子和3个内含子，编码区长度为819 nt，编码272 aa，其中48～200 aa为典型的staygreen superfamily保守结构域。基于对RNA-seq建立的 SlSGR1数字表达谱分析表明， SlSGR1呈果实特异性表达，在植株的根、茎、叶等部位不表达。利用在线工具CRISPRdirect 分析表明， SlSGR1外显子区域含有PAM为NGG的sgRNA有64条，其中1条为番茄全基因组上唯一邻近PAM 12 nt 特异性最高的种子序列，预示该sgRNA可用于番茄不同品种 SlSGR1基因的靶向编辑并可有效避免脱靶效应。对 SlSGR1上游1 500 bp启动子序列分析表明，该序列含有2条番茄全基因组上特异性较好的唯一sgRNA序列，7条分别含有不同顺式元件的sgRNA，意味着选用这些sgRNA进行基因编辑，可使所含的启动子元件序列发生突变致使功能变化，以提高番茄红素含量。     

福白菊施用不同有机肥料替代化肥效果比较试验

_{在2019年福白菊开展商品有机肥替代化肥试验的基础上,进一步开展福白菊施用不同有机肥料替代化肥试验,探索施用不同有机肥料替代化肥的效果及有机肥最佳施用量和合理施用范围。试验结果表明：在施用地佳有机肥(2水平6750.0kg/hm²)处理^,,比“地佳有机肥+配方肥”处理,增产304.1kg/hm2,增产率14.6%,增加纯收入14012.50元/hm2；施用菜籽饼肥(2水平3375.0 kg/hm2)处理,比“地佳有机肥+配方肥”处理增产525.5 kg/hm2,增产率25.2%,增加纯收入16870.0元/hm2,比施用地佳地佳有机肥(2水平6750.0 kg/hm2)处理增产221.4 kg/hm2,增产率为9.3%,增加纯收入1665.00元/hm2。用地佳有机肥、菜籽饼肥全量替代化肥的最佳施用量分别为6274.5 kg/hm2、2901.0kg/hm2；施用适量菜籽饼肥栽培更有利用于福白菊增产增收。}     

超高效液相色谱-质谱法同时检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分

建立检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分的超高效液相色谱-质谱方法。恒温酶解样品中的胶类特征性肽段，采用超高效液相色谱-质谱识别技术分别对龟甲胶和鹿角胶进行鉴别，ESI+电离模式进行多响应监测。结果表明，本方法重复性好，精密度和稳定性考察RSD均小于6.0%，龟甲胶及鹿角胶检出限分别为0.02 mg/mL和0.01 mg/mL。用建立的检测方法测定6批次龟鹿补肾丸样品，均检测出了龟甲胶及鹿角胶特征性成分。说明该方法简便准确，灵敏度高，适用性强，可为龟鹿补肾丸中胶类成分的质量管控提供依据。     

新疾病：母羊生殖应激及其综合征

母羊的生殖应激主要包括母羊主动应激、母羊被动应激以及胎羊宫内应激。适当的生殖应激是正常发情、维持妊娠、发动分娩、顺利哺乳的重要生理基础。但长期或过度的生殖应激，将引起母羊代谢紊乱、免疫功能损害、生殖障碍以及胎羊或羔羊发育受阻等，这一系列能造成母体健康损害的疾病和临床表现，被定义为“母羊生殖应激综合征”。本文对母羊生殖应激及母羊生殖应激综合征进行了定义，并对生殖应激理论的综合临床应用进行了探讨，为预防和治疗生殖疾病(如妊娠期毒血症、产后乏力、子宫内膜炎等)提供了理论依据。     

高产稳产大穗玉米新品种冀玉902的选育及栽培技术要点

冀玉902是由河北省农林科学院粮油作物研究所以自选自交系冀PBA为母本、冀SW3-2为父本杂交选育而成的玉米新品种,2020年通过国家审定。该品种表现出高产、稳产、大穗、耐瘠薄、粮饲通用等特点。适宜在黄淮海夏播玉米区推广种植。     

甘肃省泾河流域地表水资源量变化趋势研究

为研究泾河流域地表水资源量变化趋势，本文以杨家坪、雨落坪流量控制站系列水文资料为基础，采用Mann-Kendall趋势检验法、Spearman秩相关系数法、线性趋势法对甘肃省泾河流域地表水资源进行研究。结果表明泾河杨家坪、雨落坪水文站1956—2020年实测径流量呈显著减小趋势，经趋势显著性判别计算发现杨家坪站跳跃点年份为1986年、雨落坪跳跃点年份为1997年；2001—2020年泾河还原后天然值为8.924亿m³,1956—2020年泾河还原后天然值为11.393亿m³；杨家坪、雨落坪水文站周期规律表现出不稳定性，时间尺度为23～32年，丰枯变换周期为2.6～4.0年，由此得出泾河未来3～6年可能处于丰水期或平水期。     

健康与罹患青枯病的番茄土壤细菌群落特征比较

应用实时荧光定量PCR及MiSeq高通量测序技术,全面地研究了连作番茄田块中健康与感染青枯病植株周围土体及根际土壤细菌群落结构和组成。结果表明:健康番茄土体土壤的pH及全碳含量显著高于感病番茄土体土壤;土体及根际土壤的细菌群落结构和组成明显不同于感病番茄土体及根际土壤细菌群落。与感病番茄根际相比,健康番茄根际细菌的数量显著升高而青枯菌数量显著降低;细菌群落的Shannon多样性指数显著增高;拟杆菌门及其所含的噬几丁质菌属、金杆菌属、动杆菌属、黄杆菌属及Taibaiella的相对丰度显著增高而变形菌门及其所含的青枯菌属的相对丰度显著降低。综上,抑制土传青枯病发生的番茄根际土壤细菌群落特征明显,其生物量及多样性高,土著有益菌群数量多而病原菌数量少,为番茄土传青枯病的生物防控提供了指导方向与理论依据。     

青枯病不同发病率土壤对番茄植株氮素吸收效率的影响

为研究青枯病不同发病率土壤对番茄植株氮素吸收效率的影响，以番茄为供试植物，采集连作多年后6种青枯病不同发病率(12.5%、21.9%、40.0%、59.4%、83.3%和91.6%)的土壤，进行盆栽试验。结果表明，随着初始土壤青枯病发病率逐渐升高，番茄植株生物量和氮素吸收效率呈下降趋势，且存在显著相关性；初始土壤中全氮、铵态氮和硝态氮含量与植株的氮素吸收效率无显著相关；初始土壤的细菌多样性和群落组成与植株的氮素吸收效率无显著相关，但基于OTU的细菌群落变化与植物氮素吸收效率呈显著相关性，溶杆菌属(Lysobacter)和藤黄单胞菌属(Luteimonas)细菌与植株氮素吸收效率呈显著正相关，其中溶杆菌属(Lysobacter)细菌同时与发病率呈显著负相关。综上，本研究发现，受不同程度的连作障碍影响，土壤的氮素含量与植物氮素吸收效率无显著相关性，而初始土壤的细菌群落与植物氮素吸收效率存在显著相关性。