柑桔黄龙病亚洲种病原的PCR-SSCP分析

应用PCR—SSCP技术对采自我国柑桔主产区、泰国和法国留尼湾等8个不同地方的柑桔黄龙病亚洲种的病原(Candidatus Liberibacter asiaticus)进行研究。对引物P1、P2扩增的PCR产物进行SSCP分析，得到两条清晰且泳动速率一致的条带，表明不同地方柑桔黄龙病亚洲种病原扩增的DNA片段之间没有差异。     

海涂柑桔无病苗示范园的建立与措施

柑桔黄龙病长期威胁福建柑桔的发展，１９８５年，我场利用海滩地种植柑桔无病苗，面积１３０８亩，１０年来，通过改土排盐，高墩栽培，加强病虫防疫，取得成效，至今未发现柑桔黄龙病及其它危险性病害，长势良好，平均亩产２．２９吨，是福建省滩地建园大面积高产的示范园。     

柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测

【目的】为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。【方法】利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1，以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBR Green I荧光染料法两种荧光定量PCR（共3种）反应体系；确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性，据此对3种体系进行了比较；从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测。【结果】两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级，而TaqMan探针法由于使用了杂交探针，其特异性尤其可靠，另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性，加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势，使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测。【结论】本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术。     

温岭高橙黄化原因探析

柑橘黄龙病是世界柑橘产区的重要检疫性细菌病害之一,严重阻碍柑橘产业的健康持续发展。果树感病后轻者影响产量和品质,重者则造成整株树枯死,对于严重发病的产区只有将病树挖除烧毁,被称为柑橘上的“癌症”。病区内新植幼树极易感病,一旦发病就会导致树势衰弱,而成年果树感病较轻,发病后还可维持2～3年时间,但若管理不善,果园几年之内就完全失去经济价值。     

沙田柚黄龙病病原16S rDNA片段的克隆与序列分析

采集田间表现斑驳症状的沙田柚叶脉,用CTAB法提取总DNA。根据柑橘黄龙病病原16S rDNA的核苷酸序列设计引物P1/P2,进行PCR扩增,获得1条大小为1 167 bp的片段。酶切分析显示,该片段可被切成大小分别约为640 bp和520 bp的2个片段。扩增产物经纯化,与pM D 18-T V ector连接,转化大肠杆菌(E scherich ia coli)DH 5α,筛选克隆重组子。对PCR产物进行测序及序列分析,结果表明,与柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA的同源性为99%,与非洲种的同源性为97%,与美洲种的同源性为96%。认为,沙田柚的斑驳症状是由黄龙病病原引致的,称之为沙田柚黄龙病。该沙田柚黄龙病病原属于柑橘黄龙病病原亚洲种(L iberobacter as iaticus)中的一个成员。系统进化树分析显示,沙田柚黄龙病病原与中国柑橘黄龙病病原亲缘关系最近,推测是直接来自中国柑橘黄龙病病原。     

果树脱毒(毒素和病毒)种植技术

<正>中国农技推广网.cn重点推荐技术防治树叶黄化病,果实裂果、褐腐及其它烂果有绝招用奇农素、农用链霉素、硫酸铜、硫酸亚铁、石灰、食醋发泡溶化,制成多种混合液,加水喷施和灌根,极难发生病虫。可防治极难治的全部病毒病(柑桔黄龙病,梨苹果花脸病、缩果病、花叶病、痘石病、根腐病,桃根癌病、流胶病,枣疯病,柿疯病,香蕉束顶病、花叶心     

基层植物检疫部门防治有害生物措施

2004年，浙江省柑橘黄龙病已扩展到20个县，发病面积9612．3hm^2，加拿大一枝黄花发生面积1191hm^2。目前，防止红火蚁入侵又成了全省植物检疫工作的重点。这些危险性有害生物直接威胁着农业生产。     

柑橘黄龙病的综合防治技术

柑橘黄龙病又叫黄梢病,它不仅使叶片转黄,还能使柑橘产量降低、品质下降,病情严重时会使根系腐烂,甚至会造成整片柑橘被毁,是柑橘管护中的重要防治对象.