Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒三种定量检测方法的比较与评价

为了解决Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus genotypeⅡ,GCRV-Ⅱ)含量和滴度测定方法的选择问题,本研究利用荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)、免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)和间接免疫荧光试验(indirect fluorescent assay,IFA)三种方法来对GCRV-Ⅱ进行检测和含量测定,从特异性、敏感性、可靠性和检测结果的相关性来比较这三种方法对于GCRV-Ⅱ定量检测的差异。结果显示:qPCR、IPMA和IFA三种方法检测GCRV-Ⅱ的最低限分别为8.6、86和86拷贝/μL,qPCR的检测灵敏度比IPMA和IFA高一个数量级;特异性分析表明,qPCR、IPMA和IFA三种方法均只能检测出GCRV-Ⅱ型分离株,而其它病毒和未感染病毒的阴性对照细胞均为检测阴性,表明这三种方法均具有较高的特异性;3种方法分别检测60份已知临床样品,qPCR、IPMA和IFA的诊断敏感性和特异性分别为96.7%(29/30)和100%(30/30)、100%(30/30)和93.3%(28/30)及100%(30/30)和100%(30/30);三种方法对于GCRV-Ⅱ的定量检测结果中病毒拷贝数和病毒滴度之间具有较好的相关性,其拟合曲线分别为:Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=23.629X-536 174(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.996)、Y(IFA,TCID_(50)/mL)=20.318X-575 062(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.995)和Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=1.161X-1 176(IFA,TCID_(50)/mL)(R~2=0.999)。结果表明,GCRV-Ⅱ病毒滴度的测定,除了用IPMA和IFA外,也可以采用qPCR方法通过测定病毒的核酸拷贝数来测算其病毒滴度。     

利用葡萄非商品果酿造蒸馏酒技术

葡萄生产过程中由于气候或技术原因会产生大量非商品果,目前多以等外果廉价销售或遗弃田间地头,未得到有效利用。为此,以在桂林栽培的夏黑、巨峰和玫瑰香3个鲜食葡萄非商品果为原料,开展了葡萄非商品果酿制蒸馏酒的技术试验。结果表明,3个鲜食葡萄品种非商品果酿制蒸馏酒得率分别为9.7%、11.1%和10.7%,酒体澄清透明、清亮无杂质,无刺激感和异味,具有相应的葡萄品种香。该技术可为葡萄非商品果的回收利用提供参考。     

肉兔标准化生产中主要疫病免疫程序及其应用效果

笔者分析了目前我国肉兔工厂化、规模化生产中在主要疫病防疫方面存在的主要问题及其所产生的危害,并针对我国的国情和生产规模等方面的不同,制定了规模化标准化肉兔生产中主要疫病的防疫程序。     

植物免疫诱导剂在草莓中的应用情况

为了助力实现草莓的安全生产,对一类能诱导植物产生免疫防御反应的植物免疫诱导剂在草莓中的应用情况进行综述。主要阐述了植物免疫诱导剂的种类、诱导机理及其在草莓栽培上的应用现状,发现:植物免疫诱导剂能促进草莓生长和发育、诱导抗病性、提高产量、改善果实品质、提高耐贮性等,从而减少了化学农药的使用,有利于草莓高质量生产,应用前景广阔。     

富硒乳酸菌中药制剂对育肥猪免疫、抗氧化能力的影响

本试验旨在研究富硒乳酸菌中药制剂(LSTCM)对育肥猪免疫、抗氧化能力的影响。选取日龄相近、体重(57±1.50)kg、体况良好的杜×长×大三元杂交育肥猪60头,分为4个组,每组3个重复,每重复5头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加0.1%、0.3%、0.5%的LSTCM(硒含量为100 mg/kg)。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:与对照组相比,0.3%、0.5%LSTCM组IgA含量极显著提高,而IgG及IgM含量显著提高;与对照组相比,0.3%LSTCM组血清、肌肉、肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均提高(P<0.01),肾脏中T-AOC、SOD活性均提高(P<0.01),GSH-Px活性提高(P<0.05),血清、肌肉、肾脏中丙二醛含量均降低(P<0.01),肝脏中降低(P<0.05)。综上所述,富硒乳酸菌中药制剂能显著提高育肥猪免疫能力以及血清及组织的抗氧化能力。     

非热处理对蜂花粉杀菌效果及品质的影响

为探究更有利于保留蜂花粉原有营养和风味的杀菌方法,本研究分别用辐照、超高压和高压静电场3种非热杀菌技术处理蜂花粉,并测定营养及风味的指标。结果表明,7 kGy辐照、500 MPa超高压、30 kV高场强处理对蜂花粉中的微生物均有抑制作用,且辐照对细菌的抑制效果较好,超高压和高压静电场对真菌的抑制效果较好。经500 MPa超高压处理后,蜂花粉脂类含量增加了23.3%,酚酸等活性成分含量增加,且其抗氧化活性降低程度最小,颜色和风味最接近未处理蜂花粉;30 kV高场强处理后,蜂花粉抗氧化活性显著下降、颜色偏深偏暗;7 kGy辐照处理后产生了明显的辐照味。综上,蜂花粉经超高压灭菌能达到较好的杀菌效果,而且能最大限度保持蜂花粉原有品质。本研究为非热杀菌技术在蜂花粉加工产业中的应用提供了理论依据。     

不同温度下TMV侵染枯斑三生烟的LncRNA差异表达

【目的】 筛选不同温度下烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）侵染后枯斑三生烟（Nicotiana tabacum var. Samsun NN）差异表达的长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）,研究lncRNA在枯斑三生烟抗性反应中的作用。【方法】 N基因的温度敏感性使枯斑三生烟在25℃时具备对TMV的抗性、在31℃抗性丧失,在这两个温度条件下对枯斑三生烟接种TMV和磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline,PBS）,48 h后提取系统叶总RNA,构建链特异性文库后进行深度测序。对测序结果进行过滤后利用HTSeq将有效数据与近缘品种TN90（N. tabacum var. TN90）基因组比对,筛选得到lncRNA后利用FPKM法估计lncRNA的表达水平。通过edgeR筛选差异表达lncRNA（differentially expressed lncRNA,DElncRNA）,并利用qRT-PCR技术对这一结果进行验证。通过共定位及共表达分析预测DElncRNA的靶基因,通过参考基因组注释、GO和KEGG富集分析研究靶基因的功能。【结果】 4个处理共12个样本经lncRNA-seq各测得约8 000万条clean reads,共获得4 737条已知lncRNA、40 169条新lncRNA。其中64个lncRNA在不同温度条件下TMV侵染后存在差异表达,qRT-PCR测定结果显示这些lncRNA的测序正确率在80%左右,表明本研究所得测序数据具备较高的可信度。对DElncRNA进行靶基因预测,发现一些基因同时被25℃下调和31℃上调的DElncRNA靶向。靶基因注释功能丰富,主要参与植物抗病、激素和代谢等生理过程。部分可能与激素通路相关的lncRNA,在25℃下TMV侵染时呈现下调趋势,而在31℃下TMV侵染则呈现上调趋势。GO富集分析显示靶基因主要参与构成膜、囊泡等组分,具备钙、钾离子通道抑制剂活性等分子功能,使相应离子得以转运引发随后的反应,同时也参与发病、抗原加工和呈现、细胞分裂素代谢等生理过程。KEGG分析发现靶基因显著富集在植物激素信号转导通路,25℃下调和31℃上调的DElncRNA靶基因同时富集在激素信号传导、ABC运输蛋白、苯丙烷类生物合成等通路。【结论】 不同温度（25℃和31℃）条件下TMV侵染枯斑三生烟后,长链非编码RNA差异表达,DElncRNA通过作用于激素信号传导、物质转运等过程参与寄主系统获得性抗性反应。研究结果可为揭示植物系统获得性抗性中lncRNA的调控功能以及新型抗病毒技术开发提供依据。     

舅姥(非虚构)

是一个深秋中为数不多的温暖天气,我漫长暑假的最后一天,一个在之前我连听都没听说过的远房亲戚住进了我家旁边的医院。我和爸妈象征性地去医院看那个亲戚。路上,左手边金黄,右手边红艳,蝉鸣遁。一推门,一股病人特有的气味扑面而来,我不禁皱了下眉头,却在看见一具瘦得只剩骨头的躯体挣扎着爬起与我打招呼的一刹那,开始愿意接受这难闻的气味,哪怕我刚才还恐惧它会在我肺上熏出个洞来。     

设施蔬菜冻害原因及防控措施

作物冻害是指气温降至冰点以下,作物因细胞间隙结冰引起的伤害。属于非侵染性病害,它是由于气候因素引起的生理性病害。1冻害发生原因当温度过低时,植物细胞内的原生质就会结冰,冰晶会刺穿细胞膜造成细胞被破坏,融化后植物细胞内的原生质流出,细胞失去活性,再加上冬季冰的升华和液态水的蒸发,最后导致植物细胞脱水。