大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响

分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞,用3H-TdR掺入法分别检测了0、0.1、1、10、100和1 000 ng·mL-1 2种大豆异黄酮(大豆黄酮和染料木素)对该细胞生长的影响,并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化.同时,利用翻转的离体小肠囊研究了0、0.1、0.5、1和5 μg·mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响,并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化.结果显示:100 ng·mL-1的大豆异黄酮(大豆黄酮、染料木素)能够提高该细胞3H-TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性,提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性;0.1和0.5 ng·mL-1的大豆黄酮和0.5和1.0 ng·mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用,而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响.     

牛奶内乳过氧化物酶系统（LPS）的体外活化及其抗菌作用

牛奶中乳过氧化物酶系统(LPS)的活化及其作用机理的研究对提高奶牛抗乳房炎能力、防治犊牛腹泻和鲜奶保存有实际意义。本试验采取混合鲜奶,利用SCN~-和Fe~(3 )的络合反应测定牛奶中的SCN~-含量,并通过加入H_2O_2稀释液使奶中的LPS活化。活化奶的抗菌活性用滴定酸度评价。试验表明,乳过氧化物酶催化H_2O_2氧化SCN~-,并随加入的H_2O_2浓度增加(0～0.5mmol/L),30℃时5分钟的SCN~-相对消失率由100％下降到57％左右,I~-对SCN~-的消失有促进,而半胱氨酸(Cys)则稍有抑制。抗菌试验显示,活化的LPS在30℃24小时,SCN~-和H_2O_2为0.25mmol/L/0.25mmol/L浓度比时,抗菌效果最佳;H_2O_2浓度大于或小于0.25mmol/L时,抗菌活性都削弱。I~-的掺入对LPS抗菌活性有抑制,而对Cys无明显影响。     

卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究

【目的】本试验通过卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究，探讨灌注免疫增强剂BCG-PSN对乳腺组织的影响，研究调动乳腺自身的防御功能，以防治乳腺炎的发生。【方法】选取泌乳初期健康睢宁白山羊6只，左乳区经过乳头管灌注卡介菌多糖核酸5 ml，右乳区灌入5 ml注射用生理盐水作为对照，连灌6 d。第7天按50 µg•kg-1体重分别向左、右乳区灌注大肠杆菌内毒素。灌注前及灌注后0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、24 h观察山羊整体及乳房局部变化。灌注24 h后，处死动物，取乳腺组织，部分Bouin氏液固定、部分液氮保存。【结果】临床症状及病理切片观察均显示，山羊表现典型的急性乳腺炎症状。与灌注生理盐水对照相比，乳腺灌注卡介菌多糖核酸能显著降低乳腺组织中部分炎症相关因子的含量及其基因表达水平。其中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）、髓过氧化物酶（MPO）、碱性磷酸酶（AKP）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）活性显著降低（P<0.05）；IL-1β、TNF-α的含量及其mRNA表达水平均显著降低（P<0.05），IL-6的含量显著降低（P<0.05），其mRNA表达水平有所降低但差异不显著（P>0.05）。【结论】灌注卡介菌多糖核酸可以抑制乳腺组织内IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子及和炎症相关酶的过度释放、减轻炎症因子对乳腺上皮细胞的损伤，对内毒素诱发的山羊实验性乳腺炎有较强的保护作用。     

视黄醇对LPS诱发的原代培养大鼠乳腺上皮细胞炎症反应的调节

本研究旨在优化大鼠乳腺上皮细胞培养体系,建立LPS诱发的炎症反应模型,研究视黄醇对其炎症反应的调节机制.采用胶原酶与透明质酸酶联合消化分离大鼠乳腺上皮细胞.待细胞铺满整个培养瓶的90％时,(1)用不同浓度的LPS处理乳腺上皮细胞,24 h收集细胞及培养上清液；(2)分为试验组(添加1 μmol· L-1视黄醇)和对照组,处理24 h后更换培养液,用10μg·mL-1的LPS处理细胞,分别于不同时间点收集细胞.结果表明:LPS 处理大鼠乳腺上皮细胞后引起各个时间点炎性因子mRNA表达极显著升高,视黄醇能显著下调上述炎性细胞因子的表达.视黄醇预处理能减轻LPS诱发的大鼠乳腺上皮细胞的炎症损伤.     

黄芪多糖对内毒素诱发奶牛实验性乳腺炎影响初探

选择同处于泌乳后期、日均产奶量相当的荷斯坦奶牛3头。每天早上挤奶后．于右后乳区经过乳头管灌注黄芪多糖（APS）20mL，左后乳区注入20mL生理盐水（PSS）作为对照，连续10d。第11天早上挤奶后，两侧乳区均灌注含有100μg大肠杆菌内毒素的生理盐水10mL。分别于灌注黄芪多糖前、灌注内毒素前1h及灌注后3、6、9、12、2dh采集两个乳区的乳样进行指标测定。实验结果表明。与灌注内毒素前相比，灌注PSS的对照乳区乳中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力在注入内毒素后9h时达到峰值（12．65U／mgprotein），24h时乳中NAGase活力下降到灌注内毒素前的水平（P〉0．051；而施用了APS的实验乳区，在注入内毒素后，乳中的NAGase活力6h时达到峰值（16．79U／mgprotein），9h时乳中NAGase活力已下降到灌注内毒素以前的水平（P〉0．05）。总抗氧化能力（T—AOC）的测定结果表明。奶牛乳导管注入内毒素后。两种处理的乳区乳中的总抗氧化能力显著下降（P〈0．05），两种处理的乳区乳之间比较无显著差异（P〉0．05）。结果表明．通过乳头管连续灌注APS，可使乳中多形核嗜中性白细胞fPMN）快速聚集到感染部位消灭抗原．有助于奶牛乳腺炎的预后良好。     

谷氨酰胺对内毒素诱发大鼠实验性乳腺炎的影响

40只SD雌性大鼠使之交配受孕。在确定其怀孕后，取35只孕鼠随机分成正常对照组（Con，n=5）、阳性对照组（P，n=15）和实验组（T,n=15）。阳性对照组与实验组内分为3个剂量组，分别为P1、P2、R组和T1、T2、T3组。实验组大鼠每天按体质量灌喂谷氨酰胺（Glutamine，GIn）0．34mmol／kg，直至处死，而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水（PSS）。孕鼠于产后72h，分别用灭菌PSS（正常对照组）和不同剂量（5、10、50μg）的大肠杆菌内毒素（阳性对照组和实验组）经乳头管灌注到大鼠第4时（腹部）乳腺内。灌注后24h处死大鼠，取乳腺组织固定，进行组织学观察。观察显示。3个剂量的内毒素均可诱发大鼠实验性乳腺炎。其中P3组大鼠乳腺组织破坏得最为严重。P3组大鼠乳腺组织中肿瘤坏死因子α（TNF—α）浓度、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力，与正常对照组相比显著升高（P〈0.05）；T3组大鼠乳腺组织中TNF—α浓度。与P3组相比显著降低（P〈0．05）。阳性对照组大鼠乳腺组织中白细胞介素-2（IL-2）浓度，与正常对照组相比有所降低；T3组大鼠乳腺组织中IL-2浓度，与P3组相比显著升高（P〈0．05）。与正常对照组相比。阳性对照组与实验组大鼠乳腺组织中碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，AKP）活力显著升高（P〈0．05）。与正常对照组相比，阳性对照组与实验组大鼠血清中细胞因子和分泌性IgA浓度、酶的活力均无显著变化（P〉0．05）。由此表明，灌喂Gln可以抑制乳腺组织内炎性细胞因子TNF—α的释放，减轻炎症对T淋巴细胞增殖反应的抑制，对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的保护作用。     

酶标SPA-Western-blot法鉴定猪IgG的研究

用健康二花脸母猪的新生仔猪，随机分为两组：出生后即刻隔离人工哺喂葡萄糖盐水（ＧＳ组）及自然哺乳组（ＰＣ组）。采集出生后２４小时的仔猪血清样品，用酶标ＳＰＡ－Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ法鉴定其中的ＩｇＧ。结果，ＰＣ组仔猪出现阳性反应，在非还原状态ＳＰＡ与ＩｇＧ结合，在还原状态下，ＳＰＡ与ＩｇＧ的重链结合；ＧＳ组仔猪呈阴性反应。表明，酶标ＳＰＡ－Ｗｅｓｔｅｒ－ｌｂｏｔ法鉴定猪ＩｇＧ具有简便、省时、省力、灵敏、准确的优点，值得推广     

灌喂大豆蛋白胃蛋白酶酶解物对大鼠免疫功能的影响

经碱提酸沉法制备大豆蛋白,胃蛋白酶水解,茚三酮法测定水解液水解度,系统观察了灌喂1mL的5mg/mL的大豆蛋白酶解物对大鼠免疫功能的影响。结果表明:大豆蛋白水解液含氮量为(2.15±0104)mg/mL,水解度为14.49%,平均肽链长度为6.9。灌喂21d后,发现胸腺、脾脏指数较对照组分别上升了24%(P<0101)和32%(P<0101);灌喂大豆蛋白酶解物能显著促进大鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性;该组比对照组A570上升67%(P<0101);大鼠外周血淋巴细胞转化明显增强,试验组较对照组上升了82.8%。能显著提高大鼠血清抗体的血凝抑制效价(hemagglutination inhibition titer,HI),试验组比对照组HI值上升了33.3%,差异极显著(P<0101);试验组的肠腔sIgA水平较对照组上升了34.3%,差异极显著(P<0101);灌喂大豆蛋白酶解物能极显著提高血液IL22和Leptin水平。试验结果表明灌喂大豆蛋白酶解物能增强大鼠免疫功能,主要是酶解肽的生物活性的作用结果,并非营养调节作用的结果,酶解物对大鼠消化代谢影响不大。     

大鼠胃肠道食糜中β-Casomorphin-7样物质的酶联免疫吸附分析

利用建立的一种酶联免疫吸附试验 (ELISA)对大鼠胃肠道食糜中的 β 酪啡呔 7(β Casomorphin 7)样物质进行了检测分析。动物试验采用30只成年大鼠 ,随机分为 5组。对照组Ⅰ ,仅喂葡萄糖盐水 ;对照组Ⅱ ,喂大豆和饮水 ;试验组Ⅰ ,仅喂牛奶 ;试验组Ⅱ ,喂不含乳的普通饲料和饮水 ;试验组Ⅲ ,喂混有乳的普通饲料和牛奶。各组均自由采食 ,4d后处死。采集胃和十二指肠食糜 ,对其中 β Casomorphin 7样物质进行定量分析。结果 :在试验组Ⅰ和Ⅲ大鼠的胃、十二指肠食糜中检测到显著量的 β Casomorphin 7样物质 ,平均含量分别为 (1 60 52± 1 0 1 9) ,(1 0 6± 6 85)ng/g和 (2 2 0 48± 1 1 91 ) ,(1 4 2 84±7 72 )ng/g。试验组Ⅱ大鼠的胃和十二指肠食糜中也检测到 β Casomorphin 7样物质 ,提示非乳源的食物蛋白质也可能是酪啡肽的潜在来源