苹果营养钵育苗技术

1993年采用营养钵育苗技术,培育元帅系第五代瓦里短枝、第四代首红及元帅系最佳授粉品种恩派,当年平均苗高1m,最高1.6m,且根系发达。现将方法简介如下。     

肥鸡丸埋殖器使用方法

<正> 最近已由江苏省海门县天补安乐医疗器械厂生产的肥鸡丸埋殖器,已投放市场。该产品据有关资料,并采用优质金属精工制作而成。安全可靠,使用方便、操作简单。除可于家禽埋殖外,还可用于猪羊。     

答本刊2000年2月号P15问读者答栏中第三题

导致小叶女贞于梅雨季黄化,甚至枯死枝的原因有三：①当表土碱性过强,PH值7．6时,株干一侧枯干造成枯枝;②水蜡蛾害虫集聚于分枝基部为害;③枯枝病造成枯枝。所以我们对此可从三方面采取措施：(1)改良土壤,多施有机肥或追施矾肥水;(2)初发病时,重修剪病枝或拔除烧毁;(3)喷洒80％敌敌畏乳油1200～1500倍液杀死害虫。     

水稻悬浮细胞中稻瘟菌激发子诱导性受体类似激酶cDNA的克隆及特征分析

 采用改进的差异显示方法由稻瘟菌激发子处理的水稻悬浮培养细胞中得到7个诱导表达的蛋白激酶cDNA片段。为获得这些蛋白激酶的编码全长序列,构建了稻瘟菌激发子处理的水稻细胞cDNA文库。以上述一个cDNA片段作为探针筛选文库,得到一个含有完整阅读框的cDNA克隆OsEPK1分析OsEPK1的推定氨基酸序列的结果表明:它由N端信号肽、胞外区域、跨膜结构和胞内蛋白激酶结构域等几部分组成,可能为一受体类似蛋白激酶。对比OsEPK1与其它植物受体类似蛋白激酶在胞外区域的相似性,结果显示OsEPK1与小麦叶锈激酶家族同源性较高,推测它们可能属于同一类植物受体类似蛋白激酶。此外,northern杂交显示,OsEPK1可由稻瘟菌激发子迅速瞬时诱导,因而它的诱导可能也是水稻对稻瘟菌侵染做出的一种早期防卫反应。     

小麦5—氨基酮戊酸脱水酶的纯化及部分性质研究

以３０％～６０％硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ ＳepharoseＣＬ－６Ｂ、ＳephadexＧ－２００、Ｐhenyl ＳepharoseＣＬ－４Ｂ和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在pＨ８．５时比活为３１Ｕ．mg＾－１蛋白;酶纯化了９１倍,得率５％,酶亚基分子质量约５２ku,全酶分子质量约３３０ku,表明酶由６个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００nm有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍg＾３＋激活酶,Ｚn＾     

大肠杆菌分子伴侣表达的辅助载体构建及应

异源蛋白在大肠杆菌不能正确折叠表达成包涵体,分子伴侣能在细胞内帮助异源蛋白折叠,改善蛋白的聚集。本研究以大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α菌株DNA为模板,利用PCR技术扩增出6个分子伴侣编码基因groEL、groES、dnaK、dnaJ、grpE和clpB,分别将groEL、groES和grpE(Ⅰ组)插入pCDFDuet-1载体,将dnaK、dnaJ和clpB(Ⅱ组)基因插入pRSFDuet-1,构建辅助载体pR-GESP和pC-DJKL,每个重组载体中含有一个人工操纵子,每个基因上游含有T7启动子。SDS-PAGE结果显示,诱导后的重组大肠杆菌上清除了DnaJ外其它5个蛋白明显表达。SDS-PAGE分析了共表达分子伴侣对玉米(Zea mays)四吡咯分子合成的谷氨酸-1-半醛氨基转移酶、尿卟啉原Ⅲ脱羧酶和西罗叶绿三酸:铁螯合酶在大肠杆菌的折叠和聚集影响,结果显示,GroEL、GroES和GrpE能防止玉米西罗叶绿三酸:铁螯合酶在大肠杆菌的聚集,但DnaK、DnaJ和ClpB分子伴侣对该酶则没有作用;GroEL、GroES和GrpE能部分抑制玉米谷氨酸-1-半醛氨基转移酶在大肠杆菌的聚集...     

玉米叶绿体依赖NADPH硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析

叶绿体依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的硫氧还蛋白还原酶含有还原酶结构域和硫氧还蛋白结构域,每个结构域含有两个催化的Cys残基.利用RT-PCR克隆了编码成熟的依赖NADPH硫氧还蛋白还原酶基因,分别将还原酶结构域以及硫氧还蛋白结构域活性中心两个催化的Cys残基定点突变成Ser残基,将野生型和突变型基因分别插入大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-28b,转化至大肠杆菌BL21(DE3),表达的重组蛋白N端含有组氨酸标签.电泳检测显示野生型硫氧还蛋白还原酶的可溶性表达水平受诱导温度和共表达分子伴侣GroEL、GroES和GrpE影响,而蛋白突变体主要表达为包涵体.纯化的重组野生型蛋白SDS-PAGE上显示亚基分子量为52kD,分别以DNTB(6,6′-Dinitro-3,3′-dithiodibenzoic acid)和胰岛素为底物,确定了硫氧还蛋白还原酶两个结构域的催化活性.本研究结果表明,玉米NTRC在大肠杆菌可溶性表达,纯化的重组蛋白具有硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶活性.     

发芽糙米抗氧化活性在发芽及干燥过程中的变化研究

发芽糙米具有抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老等保健功能,其中抗氧化活性是其他生物活性的基础。通过测定发芽糙米水提取液清除超氧阴离子活性,研究了发芽糙米在发芽过程及干燥过程中抗氧化活性的变化规律。结果表明,发芽后,抗氧化活性显著增强,在6~18 h,抗氧化活性增加速度很快;但是发芽糙米在干燥过程中其抗氧化活性降低,65℃干燥1.5 h或微波干燥对发芽糙米抗氧化活性破坏较小。     

小麦尿卟啉原Ⅲ合酶的分离和纯化

外源大赖草DNA直接导入普通小麦,诱导小麦籽粒蛋白质组成及过氧化物酶、酯酶、超氧化物歧化酶同工酶谱带发生了显著变化,蛋白质分别增加44,67,85ku新组分,蛋白质和氨基酸含量分别提高16.82%,15.62%,赖氨酸增长42.94%,同工酶不同程度出现了差异谱带,酶带缺失,酶活性增减的明显变化。导入DNA的变异小麦的籽粒色泽、硬度、胚乳粉质等生物学性状都有一些改变,其变异现象在连续后代中依然表达。     

小麦尿卟啉原合酶的分离和纯化

以40%～70%饱和度硫酸铵分级沉淀、DEAESepharoseiCL-6B、SephadexG-100、羟基磷灰石、PhenylSepharoseCL-4B和制备电泳分离纯化了小麦的尿卟啉原合酶(UROS)。酶的亚基分子质量为54ku,全酶分子质量为66ku,酶的等电点6.3,在pH8.2时比活为257μmol/(mg·min),最适反应温度40℃,5mmol/L的巯基乙醇和Mg2 促进酶活,纯化的小麦UROS在-20℃下0.1mol/L,pH8.5的Tris-HCl,内含质量分数为50%的甘油,5mmol/L的巯基乙醇和MgCl2中贮藏7d酶活损失90%。