地衣芽孢杆菌CP-16脂类水解酶的研究

本试验旨在通过异源表达获得地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CP-16的脂类水解酶,并探究其在羽毛降解过程中的作用。试验以地衣芽孢杆菌CP-16基因组DNA为模板,扩增脂类水解酶基因,转化入大肠杆菌中表达,获得重组酶L-4。研究重组酶L-4的适宜p H、p H稳定性、适宜温度、温度稳定性以及有机溶剂和金属离子对其相对活性的影响,同时探究其对角蛋白酶K水解天然羽毛角蛋白的作用。结果显示,获得的脂类水解酶基因大小为747 bp,编码248个氨基酸,在大肠杆菌中成功表达出重组酶L-4,其分子质量约为28.3 ku,酯酶活性为0.42 U/m L,适宜p H为6.5,适宜温度为50℃;在p H 6.5~9.5条件下处理30 min相对活性保持80%以上,在低于50℃温度条件下处理30 min相对活性保持70%以上。二价铁离子(Fe~(2+))、钠离子(Na~+)、锰离子(Mn~(2+))、钙离子(Ca~(2+))对重组酶L-4相对活性具有激发作用,钡离子(Ba~(2+))、锌离子(Zn~(2+))、铜离子(Cu~(2+))、镍离子(Ni~(2+))对重组酶L-4相对活性具有抑制作用。当有机溶剂浓度为30%时,重组酶L-4在二甲基亚砜(DMSO)和甲醇中保存97%和85%的相对活性,在丙酮、乙醇中保存45%以上的相对活性,在异丙醇中保存不到20%的相对活性,而在乙腈中相对活性基本完全丧失。用重组酶L-4预处理天然羽毛底物,可提高角蛋白酶K对底物的水解效率,促进率为4.32%。由此可见,脂类水解酶可降解羽毛表层脂质,可在促进角蛋白酶水解羽毛角蛋白中发挥作用。     

采后热处理和钙处理对‘黄冠’梨膜脂过氧化和保护酶活性的影响

以‘黄冠’梨果实为材料,研究了采后热处理（38 ℃热空气24 h）,钙处理（6% CaCl2浸果15 min）及热加钙处理（6% CaCl2 38 ℃）对果实低温贮藏过程中果实膜脂过氧化和保护酶活性的影响,以清水浸果为对照。结果表明,38 ℃、6%CaCl2及38 ℃ 6%CaCl2处理对果实贮藏期相对电导率的升高和果实硬度的下降有较好的抑制作用,延迟了POD、SOD活性高峰,使其峰值显著高于对照,显著抑制了果实贮藏后期LOX活性的增加及POD、SOD活性的下降;38 ℃处理对果实O2-的生成速率、MDA含量和PPO活性几乎没有影响,6%CaCl2及38 ℃ 6%CaCl2处理减慢了果实贮藏后期O2-的生成速率,减少了MDA的积累,降低了贮藏前期PPO的活性及其峰值。总体而言,热处理和钙处理通过维持果实硬度,延缓膜脂过氧化的发生,抑制保护酶活性的下降,提高活性氧的清除能力,保持活性氧代谢平衡,从而延缓果实衰老,其中38 ℃ 6%CaCl2的处理效果最好。     

草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析

为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions,LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 m L/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的活性,q RT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPAR?、PPAR?、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPAR?、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 m L/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P0.05),表明含1~2 m L/L LE的诱导液和含20%FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中,PPARγ和LPL等脂代谢基因的表达量显著升高(P0.05),而Lep基因表达量显著降低(P0.05),PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为:采用1~2 m L/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 m L/L LE的诱导液诱导效果最佳;肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。     

一种延缓衰老的保健食品

该发明公开了一种延缓衰老的保健食品,其原料组成及质量配比为生物黄酮30份～80份、维生素C10份～30份、维生素E5份～20份。其制作方法按通常工艺混匀,然后制成片、颗粒、胶囊、丸等口服固剂或者口服液体。由于用维生素c、维生素E组合,可达到双重抗氧化效果,特别是在抗氧化过程中构成一个往复循环的氧化还原链,使维生素E存在的情况下,维生素c具有较高的抗脂质过氧化作用并直接与羟自由基作用,产生不活跃的自由基产物,直接被代谢成草酸排出体外。     

GPxs家族的研究进展

一、引言谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathioneperoxidase,简称为GSH—Px或GPx）,是机体内广泛存在的一种重要的分解过氧化物含硒酶。一般认为,它在细胞内能清除有害的过氧化物代谢产物,能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,同时促进H2O2的分解,阻断脂质过氧化连锁反应,从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。研究发现GPxs对治疗和预防糖尿病、克山病、动脉粥样硬化、恶性肿瘤等多种疾病具有显著的效果。本文综述了近几年来GPxs家族的研究成果,以期能为后续的研究工作提供帮助。     

Ni和Cu胁迫对骆驼蓬抗氧化酶活性的影响

采用温室盆栽法,研究Ni、Cu单一处理对金昌Ni/Cu尾矿库先锋植物骆驼蓬幼苗Ni、Cu积累、膜脂过氧化程度与抗氧化酶系统的影响。结果表明,骆驼蓬幼苗叶片及根部Ni、Cu含量随土壤介质中Ni、Cu含量的增加而增加,Ni主要富集在骆驼蓬的叶片,而Cu主要富集在骆驼蓬的根部;叶片及根部丙二醛(MDA)含量总体随Ni、Cu处理浓度升高而增加,膜脂过氧化程度加剧;Ni胁迫下,骆驼蓬叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性较对照均有所增强,共同组成植物体内一个有效的活性氧自由基(ROS)清除系统,根部SOD、APX和CAT活性受到抑制,POD和GR受诱导活性增强,在减轻Ni胁迫引起氧化损伤方面起重要作用;Cu胁迫下骆驼蓬叶片SOD、POD、CAT、APX及GR活性较对照均有所提高,减弱了Cu胁迫引起的氧化损伤;根部APX活性受抑制,SOD、POD、CAT及GR活性受诱导增强,在缓解Cu胁迫引起氧化损伤方面发挥重要作用。     

紫苏醇对肉仔鸡生长性能、腹脂沉积、肝脏脂质代谢及屠宰性能的影响

试验旨在研究高脂饲粮中添加紫苏醇对黄羽肉仔鸡生长性能、腹脂沉积、肝脏脂质代谢及屠宰性能的影响。选取1日龄肉仔鸡45只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复5只鸡。3组分别饲喂基础饲粮、高脂饲粮以及添加1 g/kg紫苏醇的高脂饲粮。预试期7 d,正式试验期15 d。结果显示,与高脂饲粮组相比,添加紫苏醇对肉仔鸡末重、平均日增重、平均日采食量、料重比及肠道长度无显著影响（P>0.05）;紫苏醇显著降低了肉仔鸡的腹脂率（P<0.05）,使脂肪细胞变小;紫苏醇显著降低了肝脏中甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）含量（P<0.05）,提高了血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量（P<0.05）,降低了血清TG、TC和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量（P<0.05）;紫苏醇提高了肝脏脂质代谢相关基因过氧化物酶增殖激活受体α (Pparα)、肉碱棕榈酰转移酶1 (Cpt1)和载脂蛋白A1 (Apoa1)的相对表达量,降低了载脂蛋白B (Apob)基因的相对表达量（P<0.05）;紫苏醇显著提高了肉仔鸡的屠宰率、胸肌率和瘦肉率,降低了皮下脂肪厚度和肌间脂肪宽度（P...     

苜蓿草粉对肉兔脂质代谢和抗氧化性能的影响

本研究旨在探讨苜蓿草粉对肉兔脂质代谢和抗氧化性能的影响。采用随机区组试验设计将120只生长兔分为6组,即分别在日粮中添加0(对照组)、20%(试验Ⅰ组)、30%(试验Ⅱ组)、40%(试验Ⅲ组)、50%(试验Ⅳ组)和60%(试验Ⅴ组)的苜蓿草粉,试验期45 d。结果表明:①除试验Ⅴ组外,血液中的甘油三酯和总胆固醇含量随苜蓿草粉的增加而降低;②肝脏和肌肉中总胆固醇、甘油三酯含量随苜蓿草粉添加量的增加而降低,但只有肌肉中的总胆固醇含量在试验组间存在差异性,即试验Ⅳ组显著低于对照组(P<0.05),其余均不显著(P>0.05);③血清、肝脏及肌肉中超氧化物歧化物酶和谷胱甘肽过氧化酶含量随苜蓿草粉的增加而显著升高(P<0.05),丙二醛含量显著降低(P<0.05)。提示,在肉兔日粮中添加40%~50%苜蓿草粉能起到降低肉兔血液和肌肉中总胆固醇含量,提高兔体抗氧化性能的作用。     

附睾中脂质运载蛋白家族的研究进展

脂质运载蛋白(lipocalin,Lcn)家族的功能十分重要,其中附睾分泌的Lcn家族能结合一些小分子配体,呈高度区域性分布,参与很多生物调控过程,在精子成熟过程中扮演重要角色,可为研究附睾功能提供理论基础。作者介绍了Lcn家族的结构特征、Lcn在附睾中的表达、作用及研究现状。     

根肿病(Plasmodiophora brassicae)菌侵染对大白菜幼苗叶片膜脂过氧化的影响

旨在研究根肿病菌侵染过程中膜脂过氧化相关指标及保护酶类活性的变化。以感病（91-12B）和抗病（CR91-12B）大白菜为试验材料,采用注射法对其进行接菌,取样测定。91-12B和CR91-12B抗氧化酶类活性均表现为先升高后降低,但抗病CR91-12B对病菌胁迫反应迅速,防御及时,活性氧系统处于动态平衡。感病91-12B对病菌胁迫反应慢,防御不及时,活性氧系统平衡被破坏。这说明接菌后,抗病材料能及时产生超氧阴离子作为信号激发细胞的抗氧化反应。同时发现,接菌后第8天为抗病CR91-12B对病菌胁迫产生反应的时间。本试验验证了根肿病抗性与膜脂过氧化间的关系,为一些生长调节剂和人工合成的活性氧清除剂在抗根肿病上的应用提供了依据;