青脚麻鸡新城疫和禽流感母源抗体的衰减规律研究

[目的]为青脚麻鸡的新城疫(ND)和禽流感(AI)预防提供依据。[方法]采用血凝抑制(HI)试验测定了3个鸡场青脚麻鸡在1～30日龄的AI H5、AI H9和ND母源抗体水平,并计算相应母源抗体的半衰期。[结果]3个鸡场的AI H5母源抗体水平均较低,1日龄母源抗体HI效价分别是5.8log2、7.2log2和6.0log2,AI H9和ND的母源抗体水平相对较高。青脚麻雏鸡的AI H5、AI H9和ND母源抗体平均半衰期分别为2.49、2.87和2.22 d。[结论]青脚麻雏鸡的AI H5首免日龄推荐为3～6日龄,AI H9和ND首免日龄推荐为7～12日龄。     

安徽省部分地区鸡群禽偏肺病毒感染的血清学调查

为掌握禽偏肺病毒(aMPV)在安徽省鸡群中的感染状况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对安徽省合肥、亳州、定远、舒城等地区的9个鸡场、7个不同品种(系)鸡群的296份血液样本进行了aMPV血清抗体检测。结果表明,所有被检鸡场均有aMPV感染,鸡场阳性率最高达100%,最低为20%;各品种(系)鸡均有感染,感染率最高的是青脚麻肉鸡,其次分别为科宝肉鸡、海兰蛋鸡、禽粤黄蛋鸡、淮南麻黄鸡、黄羽土鸡和新广麻肉鸡;其中蛋用型鸡血清样本总体阳性率为88.7%,明显高于肉用和兼用型鸡;公鸡和母鸡血清抗体阳性率均较高。研究结果表明,安徽省鸡群aMPV的感染已广泛存在,且不同地区、品种(系)、用途和性别的鸡群均较严重,应根据感染状况尽早制定相应的防控对策。     

安徽省地方品种鸡J-亚群禽白血病感染状况的血清学研究

[目的]了解安徽省优良地方品种鸡群中禽白血病病毒J-亚群(ALV-J)的感染状况。[方法]对安徽省8个鸡场、7个不同地方品种鸡开展了ALV-J感染的血清学调查。[结果]安徽省被检测鸡场均存在ALV-J感染,被检测鸡群个体阳性率高达49.9%,甚至部分鸡场鸡群个体阳性率高达86.2%。AHDF5品种鸡个体阳性率高达86.2%,其次为AHDF2、AHDF6、AHDF3、AHDF7、AHDF4和AHDF1品种鸡。4个周龄段的鸡群均有ALV-J抗体阳性鸡,但存在一定程度的差异.12周龄以下鸡群ALV-J阳性感染率相对较低,为7.1%;随着周龄的增大,ALV-J阳性率总体上呈现上升趋势,最高达50%。[结论]安徽省地方品种鸡中ALV-J的感染非常严重,应及早对ALV-J进行净化和采取综合防控措施。     

猪流行性腹泻病毒5株安徽流行株M基因的克隆与序列分析

为了解安徽省猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的遗传变异,对5株PEDV安徽流行株M基因进行RT-PCR扩增、序列测定和分析。结果表明,5株PEDV安徽流行毒株M基因的全长均为681 bp,编码226个氨基酸,核苷酸同源性为99.1%～99.9%,其与国内外PEDV参考毒株核苷酸同源性为96.9%～100%。进化树分析显示,5株流行毒株与CV777、attenuated DR13、LZC和CHS亲缘关系较远,与2011年后国内外PEDV分离株的亲缘关系较近。     

猪圆环病毒病研究进展

猪圆环病毒(PCV)病是近几年新发现的一种猪的传染病,由猪圆环病毒(PCV)引起猪的一种多系统功能障碍性疾病.猪圆环病毒病临床上以断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等为主要特征,该病原体已被确认为猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2).研究表明,猪圆环病毒Ⅱ型不仅是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病原而且能够引起多种猪病,主要有新生仔猪先天性脑震颤、猪皮炎及肾衰综合征、猪增生性坏死性肺炎等,并常与猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等病原合并感染使病情加重和复杂化,也是引起母猪繁殖障碍的病原之一.     

安徽省鸡群网状内皮组织增生症感染的血清学调查

网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)是由反转录病毒科的网状内皮组织增生症病毒(REV)引起的多种禽类和野鸟的一群病理综合征.REV可导致禽类从亚临床感染到生长迟缓、免疫抑制和肿瘤等多种病变表现.该病能引起鸡严重的免疫抑制,并能加重并发症的发生.近年来的调查显示,我国江苏、北京、吉林和山东等地鸡群普遍存在较高的REV感染率,已造成难以估量的经济损失[1-3].为了解安徽省鸡群中REV的感染现状,有效控制其流行,减少该病给养鸡业带来的重大经济损失,我们选取安徽省不同地区的19个鸡场,对不同品种、世代、日龄和性别鸡群的842份血样进行了REV感染的血清学调查.     

藤黄微球菌检测氧氟沙星残留方法的研究

通过制备藤黄微球菌菌悬液,选择最适菌层浓度,运用统计方法及精密度实验来制备标准反应曲线,建立氧氟沙星的残留检测方法,并进行了粪便中氧氟沙星的残留检测。结果表明,氧氟沙星在磷酸盐缓冲液中的最低检测限为0．5μg／mL,标准曲线的工作范围为0．5～8．0μg／g;在鸡粪便中添加氧氟沙星1．000μg和2．000μg／g的回收率分别为81．92±9．09和84．85±9．04。表明该方法灵敏度和回收率高,操作简便,不需特殊设备,样品用量少,易于推产话用干氢螽油厚酌窜号奔析．     

不同免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫黏膜及血清抗体的影响

通过不同的免疫途径对商品蛋雏鸡进行免疫,探讨不同的免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫(Newcastle disease,ND)黏膜抗体及血清抗体的影响。结果表明,同时用新城疫弱毒疫苗免疫后,不同的免疫途径产生的新城疫黏膜抗体及血清抗体效价有较大差异。采用喷雾法于3日龄首免,15日龄二免,25日龄三免,鸡体产生保护水平(6 log2)以上的ND黏膜抗体和血清抗体最快、抗体水平最高、维持时间最长、总体免疫效果最好,而采用饮水免疫的试验组产生的ND黏膜抗体和血清抗体水平均不高,总体免疫效果最差。     

五华鸡J亚群白血病病毒env部分基因的克隆和序列分析

本试验通过PCR技术获得了安徽省地方品种五华鸡禽白血病病毒J亚群(avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)env部分基因序列ALV-J-env1,并将该序列与GenBank数据库中登录的8条env基因相应序列进行了比对分析。结果表明,五华鸡已经感染了J亚群禽白血病,且部分鸡个体已经发病。通过分析可见,ALV-J-env1与所比较的基因序列同源性介于94.2%~96.6%之间,说明不同毒株之间的env基因有一定变异。但与ALV-J-env1同源性最高的是来自于中国ALV-J毒株的HQ425636和HM235665基因序列,且在进化树中聚集为一组,暗示它们之间亲缘关系较近,由共同的毒株进化而来。与ALV-J-env1同源性最低的是来源于马来西亚毒株的AY312965基因序列,遗传进化分析也进一步证实,两者之间亲缘关系较远。     

鸡MHCⅠ类分子克隆及其二聚体融合基因的构建与表达

为进一步研究MHCⅠ类分子作用机制,以及为制备MHCⅠ基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHCⅠβ_2m-α融合基因进行原核表达。运用RT-PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β_2m链基因,并通过编码连接肽（Gly₄Ser）₄的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHCⅠβ_2m-α重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coli BL21细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物。结果表明,成功克隆了MHCⅠα和β_2m链基因,长度分别为1014和300 bp;构建的融合基因MHCⅠβ_2m-α长度为1194 bp,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性。