冠状病毒基因组结构和相关蛋白研究进展

冠状病毒研究工作已经十分广泛,有些领域已经取得很大进展。为对冠状病毒进行更深入研究,更好地了解冠状病毒特性,从而进行有效控制,文章对从冠状病毒分类、基因组结构和相关蛋白功能等方面进行综述。     

3-1E/mChIL-15融合基因构建及在真核细胞中的表达

将鸡堆形艾美尔球虫(E.acervulina)子孢子和裂殖子表面抗原3-1E基因片段与鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL15)通过四个柔性氨基酸SPGS连接,构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15。表达质粒纯化后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光和免疫组织化学方法对重组质粒的体外瞬时表达进行检测。结果表明,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后30h可检测到融合基因编码的融合蛋白在293T细胞中的瞬时表达。研究为鸡艾美尔球虫基因工程疫苗进一步研制及应用奠定了基础。     

抗鸡传染性支气管炎病毒多克隆抗体的制备及其生物活性的鉴定

本试验将商品化疫苗株H120鸡传染性支气管炎病毒(IBV)直接免疫大白兔进行抗IBV全病毒粒子多克隆抗体的制备,通过琼扩试验及酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,同时利用免疫组织化学、免疫荧光及Western blotting技术检测了所制备多抗血清的生物活性。试验结果表明,制备得到的多抗血清具有很高的抗体效价,同时能够与不同形式的IBV相关抗原发生特异性结合。     

PBL教学模式在兽医病理解剖教学中的应用

PBL(problem based learning)已经成为一种国际流行的教学模式.该教学模式的运用可以有效提高学生自主学习能力、独立思考能力以及分析和解决实际问题能力.文章就PBL教学模式在兽医病理解剖学教学中的应用及需要注意的几个问题进行了论述,旨在为提高兽医病理解剖学教学效果提供参考.     

鸡痘DNA疫苗pVAX-env的构建及其体内外表达

利用PCR技术将鸡痘病毒env基因亚克隆到pVAX1真核载体上,构建了含有该基因的真核表达质 粒pVAX-env。将质粒pVAX--env体外瞬时转染BHK21细胞通过间接免疫荧光检测蛋白表达。将pVAX-env质粒肌肉注射免疫14日龄雏鸡,通过RT-PCR和组织免疫荧光检测体内质粒表达。结果表明,成功构建了真核表达质...     

猪流行性腹泻病毒N基因的克隆及原核表达

从患猪流行性腹泻的病猪粪便中分离了猪流行性腹泻病毒(PEDV)命名为HLJBY,将病毒在Vero细胞上传代,使之适应生长。将扩增的猪流行性腹泻病毒的N基因克隆到原核表达载体PET30a上,构建了重组表达质粒PET-30a-PEDV-N,并在37℃的条件下诱导表达,通过不同时间取样,经SDS-PAGE分析结果表明,该蛋白...     

测定猪肉中土霉素及金霉素残留的HPLC法建立

文章建立了测定猪肉组织中土霉素及金霉素残留量的HPLC法.该方法按照国家检测标准采用了5％高氯酸50 mL为样品提取液;乙腈+0.01 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(用30％硝酸调节pH2.5)=35:65为流动相;检测波长为355nm,进行测定.在此色谱条件下,土霉素、金霉素标准品浓度在0.1～1.0 μg· mL-...     

杨树速生丰产栽培技术

介绍了杨树速生丰产栽培技术,包括造林地选择与整理、选用良种壮苗、栽培模式、造林、抚育管理、虫害防治等内容,以期为林业工作者提供参考。     

免疫组化方法检测细小病毒在雏鹅体内分布规律研究

采用间接免疫酶组织化学染色法对14日龄雏鹅人工感染GPV后,不同时间段病毒抗原在体内的定位及分布情况进行了检测。同时应用图像分析软件对抗原染色强度进行了定量分析。结果显示,感染后第1天到第21天的不同时间点可以从心脏、肺脏、脾脏、肝脏、法氏囊、胸腺、腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、食管十二种组织器官检测到病毒抗原。其中感染第5天感染组织最广泛,抗原染色强度最强,在检测的组织中空肠的检出率最高。病毒抗原广泛分布于肠道的上皮细胞、腺上皮细胞,肺泡壁细胞和肾小管的上皮细胞内,可见上皮细胞为GPV抗原的主要靶细胞。始终未能从大脑、胰腺和骨骼肌检测到GPV。     

兔乳腺上皮细胞凋亡与泌乳量的相关性研究

为研究哺乳动物在泌乳期前后乳腺上皮细胞凋亡数量及泌乳量变化的规律,实验采用免疫组织化学SP染色法、流式细胞仪分析法检测母兔泌乳前后乳腺上皮细胞凋亡数量;采用仔兔吃奶前后窝体重变化差值法测量泌乳量。结果表明:泌乳全期乳腺上皮细胞凋亡数量呈现先下降再上升的趋势,泌乳量高峰期时细胞凋亡不显著,泌乳期兔乳腺上皮细胞的细胞凋亡与兔的泌乳量呈强负相关。