猪繁殖与呼吸综合征病毒GZ-KY1株的分离及ORF5基因的克隆分析

本试验首次采用PK-15细胞,通过同步接种的方法,成功分离到了1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV,GZ-KY1株),并扩增克隆了该毒株的ORF5基因。试验结果表明,该毒株ORF5基因全长603 bp,系美洲型,与国内强毒株的氨基酸一致性高于弱毒株,与经典美洲型毒株及国内弱毒株亲缘关系较远。     

犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)F基因的克隆及序列分析

根据GenBank中发表的犬瘟热病毒Onderstepoort株融合蛋白基因(F)序列设计两对特异性引物,采用RT-PCR扩增犬瘟热病毒贵州分离株(CDV-GZ1)的F基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV-GZ1株F基因的ORF全长1989 bp,氨基酸序列中具有5个潜在N-糖基化位点,氨基酸同源性与美国00-2601株和国内HL株较高,分别为91.6%和91.1%,表明该分离株与00-2601株和HL株具有较近的亲缘关系。     

鉴别猪瘟野毒与疫苗毒的单一与二重RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种对猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）临床样本快速、简便的检测技术,以区分猪瘟（classical swine fever,CSF）野毒和疫苗毒感染,为规模化猪场CSF净化奠定基础。通过对GenBank中CSF野毒、疫苗毒及近源病毒的基因组全序列比对,发现CSF兔化弱毒疫苗株3’-NTR独立存在富含T的插入序列,根据这一特点分别在该插入序列的上、下两端设计2对单一RT-PCR引物并选择特异保守区域设计了二重RT-PCR引物,优化筛选能够鉴别CSF野毒与兔化弱毒疫苗的PCR反应条件,建立了能鉴别CSF野毒和疫苗毒的单一与二重RT-PCR鉴别诊断方法。敏感性和特异性分析表明,单一RT-PCR检测CSFV各引物最低核酸检测量分别为2.2 pg（单一RT-PCR中的1对引物）和1.7 pg（单一RT-PCR中的另外1对引物）;二重RT-PCR检测CSFV各引物最低核酸检测量分别为8.2 pg（CSF野毒）和6.7 pg（CSF疫苗毒）,两种方法均检测不到PRV、PRRSV、JEV、BVDV、PCV2的DNA/RNA。采用该方法对146份可疑临床样品进行检测,结果表明CSF疫苗毒与野毒在能繁母猪、育肥猪、保育猪和哺乳仔猪中的二重感染率分别为6.3%、7.4%、8.3%、8.6%。本研究建立的单一与二重RT-PCR方法都具有敏感性强、特异性优、重复性好的特点,该研究对规模化猪场猪瘟的净化具有十分重要的参考价值。     

PRRSV与PCV2双重感染引发副猪嗜血杆菌感染病例的诊断

<正>猪圆环病毒病是指以圆环病毒2型(PCV2)为主要病原引起的断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、母猪繁殖障碍、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪皮炎和肾病(PDNS)的一系列疾病的总称~([1])。其临床症状主要为体质下降、消瘦、生长缓慢、腹泻、呼吸困难、母猪繁殖障碍~([2])。该病可导致猪群的免疫抑制,从而继发细菌性感染~([3])。猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)俗称猪蓝耳病,     

猪圆环病毒3型在韩国猪群中的流行状况调查

<正>猪圆环病毒(Porcine?circovirus,?PCV)是环状病毒科圆环病毒属的无囊膜病毒,基因组为单股环状DNA。众所周知,猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)对均猪具有感染性。但是,最早被鉴定为PK-15细胞污染物的PCV1已知对猪是无致病性的,而PCV2感染则可导致诸如断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),猪皮炎与肾病综合征(PDNS)及种猪繁殖障碍等多种与猪圆环病毒2型     

猪流行性腹泻实验诊断技术的研究进展

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的一种猪的高度接触性的肠道传染病,该病以排水样稀粪、呕吐、脱水及哺乳仔猪高死亡率为主要特征,给生猪养殖业带来严重危害。猪流行性腹泻于20世纪80年代在我国暴发并流行至今,该病不仅发生范围广、强度大、致死率高,且常与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒及德尔塔冠状病毒等传染病混合感染,临床诊断并不能对该病确诊,必须运用一些实验室方法才能准确诊断该病。通过对猪流行性腹泻的酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法(IF),RT-PCR诊断技术、多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、环介导等温扩增检测技术(LAMP)等几种实验室检测技术进行综述,以期对该病的诊断及确诊提供可靠的实验方法和一定的技术依据。     

储能在“煤改电”中的应用

指出了我国北方冬季取暖能源以燃煤为主,主要方式有3种:热电联产集中供暖,区域锅炉集中供暖,户内分散采暖。为了保护环境,改善空气质量,2016年国家八部委联合下发《推进电能替代指导意见》,积极在北方推进"煤改电"清洁取暖。对"煤改电"工程耦合储能系统进行了分析,结果表明:不仅可以提高系统可靠性,而且可以降低系统运行成本。可见,储能在"煤改电"中的应用应受到重视,其商业推广将日益广泛。     

猪呼肠孤病毒SC-A株的分离鉴定及σ2基因的克隆与序列分析

通过在病毒培养液中添加胰酶的方法,从仔猪腹泻粪样中分离并鉴定了1株能在Vero细胞上稳定产生CPE,并以细胞颗粒增多、肿胀、漂落为特征的猪呼肠孤病毒SC-A株。在感染细胞中,病毒胞浆包涵体及特征性微管样结构明显,病毒粒子多呈典型的晶格状排列,大小约70 nm。S2基因的克隆测序结果表明,SC-A S2全基因(DQ396805)大小为1 331 bp,其开放阅读框编码一个由418个氨基酸组成,相对分子量约为47 140的σ2蛋白;与标准株T1L、T2J、T3D的核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为86.9%、76.7%、85.4%及94.6%、93.3%、98.3%。以σ2氨基酸序列构建的进化树分析显示,标准株及野外分离株可被划分为A(T3)、B(T2)、C(T1)3个群;除T3C31外,其余3型野外分离株及SC-A株和所有血清1型均位于C群中。     

猪流行性腹泻的疫苗研究进展

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的一种急性、接触性肠道传染病。患病猪的主要临床症状为食欲下降、呕吐、严重腹泻等。该病多见于新生仔猪,发病仔猪死亡率高,治愈后的仔猪也会因为生长发育不良等因素严重影响生猪生产,造成生猪养殖行业巨大的经济损失。预防此类病毒性疫病除了要注意猪舍的环境卫生和科学饲养以外,选择适合的疫苗接种也是预防本病的关键。近年来,随着科学技术的不断发展,此方面研究也进一步深入,对疫苗的研究也有了较大的进展。该文对猪流行性腹泻及其疫苗的研究进展进行综述,为其深入研究和预防猪流行性腹泻提供一些参考。     

新昌县蓝莓高质量发展关键技术集成

为促进新昌县蓝莓高质量发展，从建园、定植、土肥水管理等8个方面阐述了相关技术操作及部分指标数据，以集成新昌县蓝莓高质量发展关键技术，为广大蓝莓种植户提供参考。