金龟子绿僵菌与4种植物源农药的相容性研究

为了明确杀虫真菌绿僵菌与常用的植物源农药之间的相容性,本研究测定了4种植物源农药(苦参碱、鱼藤酮、印楝素和除虫菊素)对绿僵菌Ma41孢子萌发、菌丝生长及产孢量的影响.试验结果表明;除虫菊素与绿僵菌的相容性最好,虽然在常用浓度下,对孢子萌发抑制率和产孢量抑制率分别为51.95％和44.50％,但在亚致死浓度和次亚致死浓度下,对孢子萌发、菌丝生长和产孢的抑制作用都较弱.苦参碱与绿僵菌也有较好的相容性,虽然在常用浓度和亚致死浓度下,对绿僵菌产孢的抑制率达66.08％和55.84％,但在3种试验浓度下,其对孢子萌发和菌丝生长的抑制作用都较小.此外,鱼藤酮和印楝素与绿僵菌的相容性差.     

茶丽纹象甲白僵菌广东分离株的鉴定及生物学特性研究

通过形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析,明确了从广东英德茶园中采集到的一株寄生茶丽纹象甲的白僵菌为球孢白僵菌,并命名为Bb1-1。为明确该菌株的生防潜力,以本实验室保存的2株茶丽纹象甲高毒力球孢白僵菌菌株（XJBb3005和XJBb3008）为参考菌,研究了菌株Bb1-1的生长速率、产孢量、孢子萌发率、耐热力和抗紫外能力等生物学特性,并测定了该菌株在25℃、29℃和32℃下对茶丽纹象甲的毒力。结果表明,3个菌株的生长速率、孢子萌发率和抗紫外能力没有明显的差异;3个菌株产孢量大小顺序为XJBb3005>Bb1-1>XJBb3008;但Bb1-1具有最强的耐热力。在25℃下,3个菌株对茶丽纹象甲成虫的累积校正死亡率之间差异不显著,都超过93.94%;但在高温（29℃和32℃）下,菌株Bb1-1对茶丽纹象甲的杀虫毒力优于两个参考菌株,处理7βd累计校正死亡率分别为90.91%和80%,LT₅₀分别为3.83βd和5.28βd。鉴于菌株Bb1-1耐热力较强,且在高温下对茶丽纹象甲成虫具有较好的杀虫毒力,将在今后该虫的生物防治中发挥重要的作用。     

柑橘灰象甲一株高毒力白僵菌菌株的筛选鉴定及培养特性

柑橘灰象甲Sympiezomias citri Chao是一种重要的农业害虫,可危害多种经济作物,而当前对其防治主要还是以化学防治为主。为寻找一种高效、安全和可持续的防治方法,本研究从15株白僵菌菌株中筛选到一株对柑橘灰象甲成虫高毒力的菌株Bb2-1。室内生测结果表明,利用1.0×108孢子/m L菌株Bb2-1孢悬液处理(26℃)柑橘灰象甲成虫的LT50值为3.77 d;处理7 d,柑橘灰象甲累计校正死亡率为100%,僵虫率为97.78%;其LC50值为4.55×104孢子/m L。综合菌株的培养性状、形态特征和r DNA ITS序列分析将菌株Bb2-1确定为球孢白僵菌Beauveria bassiana。通过测定菌落直径和产孢量,研究了5种培养基类型(PDA、PPDA、1/4 SDAY、SDAY和Czapek)、5个温度梯度(15、20、25、30和35℃)、7个不同p H值(p H 4.0~10.0)和7种光照条件(0L:24D、24L:0D、18L:6D、12L:12D、6L:18D、先黑暗7 d后光照7 d和先光照7 d后黑暗7 d)对菌株Bb2-1菌丝生长和产孢量的影响。结果表明,SDAY培养基、25℃的培养温度和培养基p H值7.0对菌株菌落生长和产孢最有利。此外,虽然光照时间对菌株生长速率影响不大,但充分的光照时间是提高产孢量的保证。柑橘灰象甲高毒力的球孢白僵菌菌株的筛选及其培养特性的研究,将为今后大规模生产该菌来防治柑橘灰象甲提供参考。     

几种生物农药防治有机茶园假眼小绿叶蝉的效果

假眼小绿叶蝉是有机茶园主要害虫之一,在闽东高山有机茶园主要发生在6月份之后,对夏暑茶和秋茶后期造成危害。本试验结果表明,在有机茶园假眼小绿叶蝉发生高峰期前,使用1．5％三保奇花牌除虫菊素600～800倍、3％菊灵牌除虫菊素微囊悬浮剂800倍、绿土地一号800倍、绿浪800倍液均可取得良好的防效。     

茶卷叶蛾寄生真菌球孢白僵菌几丁质酶基因的克隆与序列分析

球孢白僵菌是最重要的虫生真菌之一,在农林害虫生防中发挥着重要的作用。本研究从茶卷叶蛾球孢白僵菌JYBb201-11菌株中克隆了几丁质酶Bbchit1基因(GenBank登录号:HQ435871)。根据GenBank上昆虫病原真菌几丁质酶基因序列同源性设计引物,分别进行DNA-PCR和总RNA-RT-PCR反应,对得到的目的片段,回收纯化后通过PMD18-T载体转化到大肠杆菌DH5α中,获得几丁质酶基因序列的重组质粒PMD18-chit,并测序。结果表明,DNA-PCR和总RNA-RT-PCR获得的基因序列完全一样,都是一个完整ORF序列,含1 047bp核酸序列,编码348个氨基酸,信号肽长度为22个氨基酸,成熟蛋白理论分子量约为36.78kD,理论等电点为5.95。该蛋白序列中包含2个保守区域,即底物结合区域(SIGG)和几丁质的活性位点(DGIDIDIE),该蛋白可归为几丁质酶18族V类。氨基酸序列同源性分析表明,球孢白僵菌JYBb201-11菌株几丁质酶与球孢白僵菌Bb0062菌株(AAN41259)和NCIM1216菌株(ACF32998)几丁质酶chit1氨基酸序列同源性都达99.43%;与球孢白僵菌MTCC 2028菌株(ACZ28129)几丁质酶chit1氨基酸序列同源性达98.28%。     

叶蝉球孢白僵菌Bb305与8种化学农药的相容性研究

为明确叶蝉白僵菌Bb305与常用化学农药的相容性,本研究测定了8种化学农药对白僵菌Bb305孢子萌发、菌丝生长和产孢量的影响.试验结果表明,总体而言,杀虫剂和杀螨剂与白僵菌Bb305的相容性要好于除草剂.其中,乙基多杀菌素与白僵菌Bb305具有最好的相容性.在常用浓度、亚致死浓度和次亚致死浓度下,乙基多杀菌素对白僵菌Bb305孢子萌发抑制作用最轻,抑制率为1.30％～2.73％;对白僵菌Bb305菌丝生长的抑制作用也较轻,抑制率为2.86％～4.29％;相比其他化学农药,乙基多杀菌素对白僵菌Bb305产孢抑制作用也较弱,抑制率为27.20％～43.20％.而在3种试验浓度下除草剂草铵膦和百草枯对白僵菌Bb305孢子萌发、菌丝生长和产孢量都具有很强的抑制作用,相容性极差.     

两种新型化学农药防治茶尺蠖示范

开展了两种新型化学杀虫剂15%茚虫威乳油(凯恩)和24%氰氟虫踪悬浮剂(艾法迪)对茶尺蠖的田间防控的示范工作,结果表明:艾法迪对茶尺蠖具有很好的速效性和持效性;凯恩速效性稍差,但持效性很好。凯恩2025倍液和艾法迪750倍液对茶尺蠖的防治效果,明显优于2.5%联苯菊酯乳油1500倍液,适合于茶园大面积推广使用。     

茶小绿叶蝉代谢解毒基因CYP303A1的克隆及生物信息学分析

CYP303A1基因是细胞色素P450(简称P450)家族成员之一,它在昆虫药物代谢解毒过程中发挥重要作用.本研究通过RT-PCR方法克隆了茶小绿叶蝉Empoasca flavescens CYP303A1基因编码区ORF,并通过生物信息学软件和在线网站对该基因编码蛋白的理化性质、系统进化树、氨基酸多重序列比对、三级结构及功能域进行了分析.结果表明,CYP303A1基因含有1503 bp开放阅读框,编码500个氨基酸,分子量为57.42kDa,理论等电点为8.56.系统进化树分析结果表明,CYP303A1基因与同翅目的烟粉虱Bemisia tabaci亲缘关系最近,与膜翅目的榕小蜂Ceratosolen solmsi亲缘关系最远.氨基酸系列比对结果表明,CYP303A1基因与其他物种昆虫CYP303A1的保守性较差.三级结构及功能域分析结果表明,该蛋白以β折叠为主,功能域由一信号肽和p450蛋白域(Pfam:p450)组成.该研究明确了茶小绿叶蝉CYP303A1的核苷酸序列及编码蛋白特征.     

叶面分离Bt及对茶树主要害虫高毒力菌株的筛选

通过分离培养基和分离方法的筛选,得到了从叶面分离Bt的有效方法。用此法从25种植物叶面分离出54株Bt,利用茶尺蠖、茶小绿叶蝉和茶橙瘿螨作为靶标昆虫,筛选对茶树主要害虫有毒力菌株,得到了对鳞翅目有效的菌株10株,对同翅目有效的菌株4株,但所有测试菌株均对茶橙瘿螨无效。     

茶树主要害虫生防技术示范推广小结与体会

近年来，我省发树主要病虫的发生较为频繁，发生危害较为严重的有茶毛虫、丽纹象甲、黑刺粉虱、小绿叶蝉、椰园蚧、叶螨类等10余种。因过去传统的防治方法是采用化学农药防治，所以在取得防治效果的同时，也带来了一些弊病，如害虫产生了抗药性、致使天敌的大量伤亡、茶叶...