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为建立荧光定量PCR方法检测嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum),针对GenBank A.phagocytophilum 16S rRNA基因保守序列(JN558815),设计1对引物1-25F/183-205R。以已知引物EE1/EE2和该引物进行巢式PCR扩增出预期大小片段(205bp),构建含有16S rRNA基因的重组质粒,以质粒为模板构建了标准曲线。以1-25F/183-205R为荧光定量PCR引物,建立A.phagocytophilum荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验和临床样本检测。结果表明,该方法在6.4×10~3~6.4×10~8 copies/μL相关系数为0.99,显示出良好的线性关系;所建方法能特异地检出A.phagocytophilum,对绵羊无浆体、牛无浆体和环形泰勒虫基因组DNA和灭菌双蒸水均无交叉反应;可检测到6.4×10~2 copies/μL的标准质粒DNA,比常规PCR敏感性高100倍;批内及批间变异系数均低于2.0%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法对30份羊血液临床样品检出率比巢式PCR高16.67%。该研究为A.phagocytophilum临床检测和定量分析病原感染程度奠定理论基础。 相似文献
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近年来,张家港市通过行政推广和引导示范,逐步将机插秧推广开来,成为该市水稻生产上的主导播式。虽然机插秧技术已经比较完善,但仍有部分机插秧田块产量不高。究其原因,主要还是穗数不足。为此,笔者通过多年的实践和总结,寻找了制约机插秧的产量的几个突出的问题,并找出了相应的技术对策。 相似文献
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鱼体分级筛选是一种有效避免种内竞争、提高鱼体存活率的方法,但由于国内缺乏先进设备,生产中大多以人工作业为主。针对人工操作存在劳动强度大、鱼体损伤等问题,研制了一种以S7-200 SMART系列PLC(programmable logic controller)为处理器、结合多步进电机和触摸屏界面开发的鱼体分级自动控制系统。该系统采用变频调速技术,实现对转速可调的功能;采用限宽调节技术,实现对鱼体大小自动调节功能。运用STEP 7-Micro/WIN SMART编程软件完成控制程序的编写,借助SIMATIC WinCC flexible 2008完成触摸屏界面开发,运用以太网通信完成触摸屏界面对多步进电机的运动控制,实现限宽调节功能。性能测试表明,在额定电压(380 V)下,主回转电机运行速度可在0~50 Hz范围内调速,限宽可调范围为0~40 mm,可将4种不同大小的鱼进行分级。在设定宽度下,鱼体的准确率在±90.0%。该控制系统性能可靠,适合在渔业养殖中推广。 相似文献
85.
猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性致死性疾病,以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征,不同年龄的猫均可感染,但老龄猫和2岁以内的猫发病率较高,纯种猫发病率高于一般品种的家猫,传染率非常高。本研究将猫冠状病毒S基因进行碱基序列优化并合成,亚克隆至PET30a,得到原核表达载体PET30a-NTU-2-S-RBD,进行大量诱导表达并纯化,最终得到的蛋白纯度可达90%,为后续疫苗的制备及诊断方法的建立奠定基础。 相似文献
86.
随着我国工程建设和城市发展的不断壮大,土地的利用效率和规划程度备受重视,在这一前提下3S技术被广泛应用,并且在测量过程中形成良好的技术积累。就目前看来3S技术在土地利用和开发中发挥着十分巨大的作用,大大提高了土地的利用效率。 相似文献
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<正>夏季,天气炎热,极易引起生猪疫病的暴发流行和病源的传播扩散,因此采取切实有效的的防控措施以加强饲养管理,做好猪瘟、口蹄疫、蓝耳、猪链球菌等疫病的免疫工作极其重要,它关系到农业的发展,农民增收,关系到猪肉市场的稳定和广大人民群众的身体健康,关系到社会的和谐与稳定。一、生猪夏季常见的疫病及其防控1.猪瘟:猪瘟是由猪瘟病毒引起的高度致死性烈性传染病,特征是病猪高热稽留、全身广泛出血,呈败血症或母猪发生繁殖 相似文献