微小隐孢子虫三个基因主要抗原表位区的串联表达及其抗原性分析

应用多个抗原袁位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞袁位预测及分析,从中选取了三个抗原表位富集的基因片段,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapping extension PCR,SOE PCR)将该三个基因片段串联在一起,各基因片段之间以柔性氨基酸(GGGGS)碱基序列链接,得到的拼接片段命名为CpTm.将目的基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pET-CpTm,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体.结果成功地构建了CpTm串联基因并在大肠杆菌中以可溶形式高效表达,质谱分析表明重组表达蛋白包含了上述三个抗原的氨基酸序列.Western blot分析显示该重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清及隐孢子虫鼠基因型CP15、P23、CP15/60基因重组表达蛋白免疫兔血清识别,制备的抗血清能被重组蛋白特异性识别,表明表达的重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性,为多表位疫苗的研制奠定了基础.     

微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及抗血清的制备

以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串联在一起,各基因片段之间引入柔性氨基酸接头(GGGGS)编码基因。将串联基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达载体,转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体。结果表明,获得了CP15-P23-CP15/60融合基因,并在大肠埃希菌中高效表达,Western blot显示重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清识别,制备的多克隆抗体能被重组蛋白特异性识别,表明获得的重组蛋白具有较好的抗原性。     

以肉牛基地为载体,大力推广畜牧养殖技术

西吉县在肉牛基地建设区,大力推广畜牧科技,促进了养牛产业的提升和发展。本文对重点推广的技术有细管冻精直把式输精技术、玉米秸秆青贮技术、尿素氨化秸秆技术、紫花苜蓿种植技术和肉牛短期育肥技术等的具体做法进行了论述。     

基于物元可拓模型的黄河兰州段突发水污染安全评价

[目的]科学评价黄河流域突发水污染安全等级,为提高黄河流域突发水污染事件应急响应能力提供参考.[方法]基于科学性、整体性、数据可获得性等原则,通过PSR模型遴选16个与黄河兰州段相关指标构建评价指标体系,并以黄河兰州段2014-2019年数据为基础,采用GRA-PCA组合确定指标权重,运用物元可拓模型得到其突发水污染安...     

青海农牧业科技推广体系增强活力的长效机制研究

通过对青海省农牧业科技推广体系机制建设现状及问题分析,明确了青海省农牧业科技推广体系建设增强活力长效机制的重要性,在此基础上分析了目前青海农技推广长效机制建设的目标和主要内容,并就长效机制确立的路径进行了探索,提出了建设增强活力的长效机制的对策建议.     

米黑根毛霉脂肪酶基因密码子优化及重叠延伸PCR合成

[目的]对米黑根毛霉脂肪酶基因的密码子进行优化,并采用重叠延伸PCR合成设计的基因序列。[方法]根据毕赤酵母(Pichiapastoris)密码子使用偏好性,对米黑根毛霉脂肪酶成熟肽基因进行全面密码子优化,根据优化后的氨基酸编码序列设计合成30条长度约为48 bp的寡核苷酸片段,并采用重叠延伸PCR法扩增合成全长基因序列。[结果]经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析表明,合成的目的基因与设计的序列相一致。[结论]该研究为脂肪酶基因在毕赤酵母中的构建及后续表达奠定了基础。     

探入式番茄钵苗移栽机构设计与试验

为了避免移栽机构在夹取秧苗过程中对秧苗茎秆造成损伤,针对夹取土钵的取苗方式,提出了一种探入式番茄钵苗移栽机构。依据结构特性和工作原理,建立了机构运动学理论模型,根据设定的优化目标开发了移栽机构优化设计软件,通过优化得到一组符合番茄钵苗移栽要求的结构参数。对栽植臂绝对转角和移栽机构绝对运动轨迹进行分析,验证了机构的合理性和可行性。建立了探入式番茄钵苗移栽机构的三维模型并虚拟仿真,对物理样机进行了高速摄影试验验证,通过对移栽机构实际工作轨迹与理论及仿真轨迹进行对比分析,验证了机构设计的正确性。对机构进行性能台架试验,取苗成功率为92. 8%,移栽成功率为89. 7%,栽植合格率为86. 4%,栽植优良率为59. 4%,符合移栽要求,验证了机构的实用性。     

蔬菜专业合作社产销管理平台建立及其应用评价

根据蔬菜专业合作社生产经营特点,从需求调查出发对其产销管理系统进行平台化应用开发。所建立的PMMS系统具有可拓展性,也较好地解决了社员使用门槛低的问题,分别集成了种植专家系统、质量管控追溯系统、产品订单管理系统和物流配送监管系统等多种系统。在上海恒孚蔬菜专业合作社应用的结果表明,全面导入PMMS平台并稳定运行后,社内的产品质量和安全性均有较大幅度提升;部分生产环节的成本有所降低,其年度平均新增收益率达到22.92%。     

“产教融合”背景下农业推广教学改革与创新

该文以我国涉农院校农业推广专业教学所面临的困境为切入点,简要地归纳了我国涉农院校在农业推广专业教学改革中的优势与机遇,就政府、行业和涉农企业3个教学改革的参与者在涉农院校产教融合教学方式所扮演的"角色"及其能够发挥的积极作用进行了相关论述,以此为我国涉农院校农业推广专业教学改革提供了借鉴和参考。     

浅析农技推广信息综合服务系统建设中的风险管理

本文以农技推广信息综合服务系统项目的建设为例,通过一定的专家评分方法,得出项目建设过程中存在的六个主要风险,并提出相应的风险控制对策,以降低对项日的影响。