无公害水果的安全和产地环境要求

随着我国工业化步伐的加快,工业"三废"污染日渐明显,再加上农药化肥的不合理使用和城镇生活垃圾的影响,使得水果及其生产环境的污染问题越来越突出,水果有害物质和农药残留超标现象已比较普遍.     

柑桔生产中农药的安全使用

安全、合理地使用农药是有效防治果树病、虫、草害 ,不使水果中农药残留量超过规定限量标准的基础和前提 ,也有利于保护环境 ,保障人体健康。我国先后发布实施了ＧＢ832 1.1 87、ＧＢ832 1.2 87、ＧＢ832 1.3 89、ＧＢ832 1.4 93、ＧＢ832 1.5 1997和ＧＢ4 2 85 89等 6项有关农药安全、合理使用的国家标准 ,涉及苹果、柑桔、葡萄、梨、香蕉、桃和山楂等 7种果树。我们已经对落叶果树生产中农药的安全使用进行了专门报道[1] ,这里简要介绍柑桔生产中农药的安全使用问题 ,以利普及和推广农药安全、合理使用技术知识 ,从而实现农药使用的标…     

葡萄病毒B外壳蛋白原核表达及抗血清制备

根据已报道的葡萄病毒B(Grapevine virus B,GVB)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR方法从葡萄中扩增获得GVB外壳蛋白基因(cp),大小为594 bp。通过序列测定和分析,选取优势分离物GVB-JFL cp基因克隆到原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并纯化融合蛋白pET-GVB CP。SDS-PAGE电泳结果显示,融合蛋白获得过量表达,分子量约26 kD。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗血清。采用间接ELISA和dot-ELISA对抗血清特异性进行检测,结果表明,抗血清可与感染GVB的西方烟和葡萄样品发生阳性反应,与健康植株及感染同属另一种病毒葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)的样品不反应,阳性样品检测效价达1︰4 000,16个田间样品摩擦接种至烟草后有9个样品ELISA检测为阳性,表明制备的抗血清可用于GVB的特异性检测。     

葡萄4 种病毒多重RT-PCR 检测体系的建立

 以复合感染4种病毒的‘红地球’（Red Globe）葡萄样品为试材,对影响多重PCR的dNTPS浓度、Taq酶浓度、引物浓度、退火温度及模板量进行了调整和优化,建立了能同时检测葡萄卷叶伴随病毒3（Grapevine leafroll-associated virus-3,GLRaV-3）、沙地葡萄茎痘相关病毒（Grapevine rupestris stem pitting associated virus,GRSPaV）、葡萄病毒B（Grapevine virus B,GVB）和葡萄病毒A（Grapevine virus A,GVA）的多重RT-PCR方法。灵敏度测验结果显示,多重RT-PCR与单一RT-PCR检测灵敏度基本一致。多重RT-PCR获得的特异性片段大小分别为905、546、460和196 bp,经过克隆、测序及序列比对,表明其序列与已报道的病毒序列具有较高的同源性。对7个已知带病毒的葡萄样品进行检测验证的结果表明,所建立的多重RT-PCR技术可用于大量田间样品中这些病毒的检测。     

落叶果树生产中农药的安全使用

科学、合理、安全地使用农药是有效防治农作物病、虫、草害 ,农产品中农药残留量不超过规定限量标准的基础和前提 ,农药的安全使用与药剂选择、使用方法、使用浓度、使用次数、使用适期及用药期间的自然环境等有着十分密切的关系 ,尤其随着超高效、超低容量农药的不断开发 ,安全使用农药问题更显突出。我国自 1 987年以来 ,先后发布实施了 6项关于安全、合理使用农药的国家标准 (即 GB832 1 .1 -87、GB832 1 .2 -87、GB832 1 .3-89、GB832 1 .4-93、 GB/ T832 1 .5-1 997和 GB 42 85-89) ,涉及苹果、葡萄、梨、桃和山楂等 5种落叶果树…     

苹果花叶病毒RT-PCR检测技术

根据苹果花叶病毒的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以带毒和不带毒苹果品种国光的总RNA为模板,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果从感病材料中扩增出与预期的161 bp大小一致的目的片段,而健康的材料无此扩增产物。对此PCR扩增产物克隆测序,进一步佐证了RT-PCR检测结果。经过多次试验验证该检测体系,都可得到很好的重演性,从而建立了ApMV快速、灵敏、准确的RT-PCR检测技术。     

苹果褪绿叶斑病毒双引物对PCR检测体系的建立及应用

<正>病毒病在我国苹果树上普遍发生,其中苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)最常见,常混合侵染,引起树体衰弱,苹果产量和品质下降,经济损失严重(CieniewiczFuchs,2016)。因此,建立快速、准确的检测技术对病毒病防控具有重要意义。Hu et al.(2015)认为在病毒检测过程中,需     

我国部分地区沙地葡萄茎痘相关病毒分离物外壳蛋白序列变异分析

为明确我国葡萄中沙地葡萄茎痘相关病毒（GRSPaV）的感染情况及病毒外壳蛋白（coat protein,CP）基因的变异特点,从而为其致病性、病害的防治以及抗病毒基因工程等研究提供依据,本研究对采自我国16个省市自治区的65个葡萄品种305株葡萄样品中的GRSPaV进行RT-PCR检测,根据地区与品种差异选取了24个阳性样品进行cp基因克隆与测序分析,并对不同RNA提取方法进行了比较。结果显示,114株样品被GRSPaV侵染,平均带毒株率为37.4%;分离物间及同一分离物不同克隆间的序列差异较大,从24个分离物克隆获得的37条cp基因序列与来源于不同国家的12个GRSPaV分离物的核苷酸序列同源性为80.5%~99.7%,氨基酸序列同源性为88.8%~100%;各个分离物的遗传距离无明显地域差异;SiO₂吸附法比SDS法和CTAB法更适宜葡萄样品RNA的提取。     

葡萄A病毒外壳蛋白原核表达及抗血清制备

 葡萄A病毒（Grapevine virus A,GVA）为线性病毒科（Flexiviridae）葡萄病毒属（Vitivirus）的代表种,是葡萄皱木复合病（rugose wood complex disease）的重要病原之一,可引起葡萄嫁接成活率下降、春季萌芽延迟、生长减弱甚至衰退死亡等危害\[1,2\]。GVA为线状单链RNA病毒,基因组共编码5个开放阅读框（ORF1\|5）,其中ORF4 编码外壳蛋白（coat protein, CP）,是病毒粒子包裹和系统移动所必需的功能蛋白\[3,4\]。GVA自然寄主为葡萄,机械摩擦可侵染本氏烟等草本寄主\[2\],由于嫁接和无性繁殖材料调运等因素造成该病毒远距离传播,目前在世界多个国家和地区均有发生。     

果树二斑叶螨的研究进展

果树二斑叶螨的研究进展聂继云董雅凤（中国农业大学，北京１０００９４）（中国农业科学院果树研究所）二斑叶螨（ＴｅｔｒａｎｙｃｈｕｓｕｒｔｉｃａｅＫｏｃｈ．）虽然在我国落叶果树上发现较晚，但近些年传播蔓延迅速，目前已在山东、甘肃、陕西、河北及北京（平谷、...