高活性抗菌、抗逆芽孢杆菌的筛选及其紫外诱变育种

以7株芽孢杆菌为研究对象,对其主要生物学特性进行了研究,包括抑制大肠杆菌能力、产酶特性、对人工胃液和人工肠液的耐受性。结果表明,巨大芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌具有较强的抑制大肠杆菌的能力,枯草芽孢杆菌的蛋白酶总活力最高,淀粉酶活力最高的是巨大芽孢杆菌,脂肪酶活力最高的是地衣芽孢杆菌,纤维素酶活性最高的是枯草芽孢杆菌,7株芽孢杆菌均对人工胃液的耐受性较强,除地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌外,其他5株芽孢杆菌对人工肠液的耐受性较强。通过本次研究综合分析,巨大芽孢杆菌在7株菌中的抑制大肠杆菌能力最强,产酶能力及耐人工胃液、肠液的能力也较强,具有作为新型饲料微生态制剂的开发潜力。进一步采用紫外诱变的方法提高该株巨大芽孢杆菌的抑制大肠杆菌的能力。结果显示:最佳的诱变时间为80 s,诱变后抑菌率为90.92%,比出发菌株增加了6.16个百分点,5次传代试验结果表现出较好的遗传稳定性,适合用于新型微生态制剂产品的研发。     

一株同时降解玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B_1的谷氨酸棒状杆菌及其降解特性研究

试验旨在筛选同时降解玉米赤霉烯酮(ZEN)和黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的菌株,并研究其对两种毒素的降解特征。从土壤及鸡、驴的食糜中筛选出9株可同时降解ZEN和AFB_1的菌株;编号为406的菌株经形态学观察和16S rDNA鉴定为谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamate)。谷氨酸棒状杆菌406降解ZEN和AFB_1活性成分存在于发酵上清液中,其对ZEN和AFB_1的降解率分别为50%和58%。通过热、胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠(SDS)处理,初步确定降解活性物质为一种胞外酶。上清液对ZEN和AFB_1的最适降解温度为67℃,最适pH值为8。本研究筛选到的同时降解ZEN和AFB_1的谷氨酸棒状杆菌菌株406为食品和饲料中ZEN和AFB_1的生物降解提供菌种资源。     

壳寡糖与干酪乳杆菌对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化酶活性及肠道微生物菌群结构的影响

试验旨在研究壳寡糖与干酪乳杆菌对断奶仔猪生长性能、血清中抗氧化酶活性以及肠道微生物菌群结构的影响。试验选用312头30日龄体重为(7.06±0.02)kg杜×长×大三元杂交断奶仔猪随机分成4个处理组,每个处理组设置6个重复,每个重复13头猪。对照组(A)饲喂玉米-豆粕型基础日粮、试验组(B)每千克饲料添加0.5 g壳寡糖、试验组(C)每千克饲料添加1010CFU干酪乳杆菌、试验组(D)同时添加壳寡糖与干酪乳杆菌,试验期为32 d。结果表明:D组有提高断奶仔猪0～14、15～32 d和0～32 d这三个阶段平均日增重和降低料重比的作用,其中15～32 d阶段料重比降低效果显著(P<0.05)。试验14 d,C、D组中弗林氏丁酸杆菌(Flintibacter butyricum)与卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)较A、B组明显增多。试验32 d,B组显著提高了血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量(P<0.05),并降低了丙二醛(MDA)的含量(P>0.05)。C组降低了断奶仔猪的腹泻率。C、D组中布氏瘤胃球菌(Ruminococcus bromii)和罗氏弧菌(Roseburia intestinalis)的数量明显高于A、B组。壳寡糖作为饲料添加剂可提高断奶仔猪机体抗氧化能力;乳酸菌则可提高肠道益生菌数量降低断奶仔猪腹泻率;同时添加壳寡糖和乳酸菌可以有效提高断奶仔猪的饲料转化率,提高肠道有益微生物数量,使仔猪肠道更健康。     

翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果研究

研究翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果。利用传统水煎法制备翼草景香水煎液，用HPLC方法测定翼草景香水煎液中红景天苷浓度，并用红景天苷浓度标定翼草景香水煎液药物浓度，分别采用牛津杯法和试管2倍稀释法测定翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度（MIC），通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型，测定翼草景香水煎液浓度为0.12316 mg/mL时，在感染前和感染后给药方式下，分别给与0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL药物时对小鼠的体内感染防治作用。结果表明，当翼草景香水煎液浓度为0.49263 mg/mL时，抑菌圈平均直径为28.5 mm；MIC值为0.00385 mg/mL，经病理解剖、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统（VTEK 2 COMPACT）系统细菌鉴定，表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功，当水煎液浓度为0.12316 mg/mL时，0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL预防组和治疗组小鼠死亡率分别依次为50%，41.7%，81.8%，66.7%，50%和75%。因此，翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内、外抑菌活性，且其预防作用较治疗作用明显。     

1株鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了解鸭疫里氏杆菌病的流行情况、菌株药物敏感性及鸭感染后组织的病理变化,对山东地区疑似鸭疫里氏杆菌感染的病鸭采取心、肝、脾进行病理学观察,细菌分离与鉴定,对分离纯化的菌株进行生化特性鉴定、药敏试验、16S rRNA测序等,利用纯化菌液进行动物回归试验。结果显示:病理学变化表现为心外膜纤维素附着,肌纤维肿胀、变性、间隙增宽;肝细胞肿胀、水泡或脂肪变性,细胞内出现不同程度的脂褐素沉积;脾脏充血,红白髓界限不清晰,网状细胞增生,浆液纤维素渗出,脾脏组织结构松散。经PCR鉴定和测序确定为鸭疫里氏杆菌,分离株对头孢霉素、苯唑西林完全耐药,对庆大霉素低敏,对其他几种抗生素则表现为不同程度的敏感;人工感染动物病理变化与自然感染病变一致。本研究为鸭疫里氏杆菌病临床用药及病理机制研究提供了理论依据。     

江苏地区副猪嗜血杆菌病流行现状调查

为了分析副猪嗜血杆菌病在江苏区域流行现状,选取江苏省不同地区疑似发病猪场,进行临床症状分析、病理学变化观察、病原分离鉴定、血清学检测等试验。结果显示:317份病料中副猪嗜血杆菌(Haemophlius parasuis, HPs)阳性率为11.54%～27.55%,平均感染率为20.50%;从发病猪场共分离到HPs 43株,其中优势血清型为12型(37.21%)、4型(16.28%)和5型(13.95%),未定型菌株9株(20.93%),分型菌株占所有菌株的79.07%;PCR检测显示,HPs与猪圆环病毒(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)存在混合感染现象,感染率达30.77%。研究结果为江苏地区副猪嗜血杆菌病的防制提供了参考。     

猪丹毒的中西医治疗方法

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种人畜共患病,猪感染后对养猪业危害严重,人感染后发生类丹毒,威胁人体的健康。虽然随着抗生素、疫苗的广泛应用,发病率和致死率逐渐降低,但是由于养猪场卫生条件差、饲养管理粗放等因素的影响,也会导致猪丹毒的发生。     

金刚砂辅助农杆菌进行玉米基因转化研究

对超声波处理方式进行改进,在超声波处理时,加入金刚砂以辅助EPSPS基因转导到玉米幼胚中。结果表明,800粒处理种子播种出苗93株,玉米苗经大田glyphosate筛选有27株具有抗性,进行PCR电泳检测,显示23株阳性,初步证明EPSPS基因已经转化到玉米植株中,转化率为29%。金刚砂辅助处理玉米基因转化具有可行性,利于生产实际操作。     

肉雏鸡传染性鼻炎继发支原体感染的诊断及防治

鸡传染性鼻炎是由鸡副嗜血杆菌引起的一种急性上呼吸道疾病,一般冬、春季节多发。临床主要表现为流涕、面部水肿和结膜炎。鸡舍环境和鸡体内往往存在支原体病原菌,一旦外界环境突然变化或鸡感染其他疾病,鸡体抵抗力下降,鸡败血支原体就会趁虚而入,引起混合感染,加重鸡群病情。1病例及临床症状2019年3月,莒南县坊前镇杜某饲养10000只肉鸡,第28天时,鸡群发病初期,个别鸡只流泪,鼻孔先流出清液。