六盘山区秦艽植物资源及其利用研究

秦艽属于龙胆科龙胆属植物,为常用中药,在六盘山区分布有秦艽Gentiana maerophyllaPall.、小秦艽Genti-ana dahuricaFisch.和麻花秦艽Gentiana stramineaMaxim3种,根据六盘山区秦艽植物资源的调查研究阐明了秦艽的生物学特性以及目前资源生存与开发利用现状,并对今后开发利用及人工驯化栽培进行研究,提出了建议和措施.     

秦艽的栽培

秦艽,为中药名称,在藏药中称为吉杰嘎尔宝,青海省大通地区俗名为左拧根。秦艽是龙胆科多年生草本植物,高20～50厘米。直根粗壮,黄圆形,多为独根,或有少数分叉者,微呈扭曲状。茎单一,圆形,节明显,斜升或直立,光滑无毛。基生叶较大,披针形,先端尖,全缘,平滑无毛,茎生叶较小,对生,叶基联合,     

秦艽栽培技术

秦艽，别名牛尾艽、粗茎秦艽，为龙胆科胆属植物粗茎秦艽和小秦艽药用部分为其干燥根。有祛风湿、清湿热、利尿和血、舒筋之功效。主治风湿脾痛、筋脉拘挛、黄疸、便血、小便不利和发热。多为野生，亦有家种。分布于东北、西北、华北及四川等地。     

陕西陇县野生和栽培秦艽中龙胆苦苷的含量比较

比较陕西陇县野生和栽培秦艽的质量,为人工栽培秦艽提供科学依据。秦艽经超声提取后用高效液相色谱-紫外检测器测定。陕西陇县人工栽培秦艽中龙胆苦苷的含量高于野生秦艽。进行秦艽的人工栽培研究,对解决目前供需矛盾问题有一定的实际意义。     

秦艽主要药性化学物质指纹图谱分析

以8个不同地区秦艽的干燥根为试验材料,以Alltech Chrom BDS-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,乙腈—0.1%醋酸溶液(9∶91)为流动相进行等度洗脱,检测波长254nm;柱温30℃,进样量10μL。通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会)进行相似度分析,建立8个不同产地的秦艽指纹图谱。以宁夏六盘山区所产秦艽为例,通过高效液相色谱法,以龙胆苦苷、马钱苷酸2个主要成分为主要因素,分析适宜秦艽有效成分积累的最佳立地条件,为建立秦艽质量标准、选择最佳生长条件提供理论依据。结果表明:1)8个不同产地秦艽指纹图谱共有6个主要共有峰,可作为鉴别秦艽药材的主要依据。2)8个不同地区秦艽药材聚类分析可分为4类:内蒙古海拉尔和山西阳泉的秦艽药材为一类,青海同仁和内蒙古通辽的为一类,河北张家口和陕西太白的为一类,云南洱源和宁夏六盘山的为一类。3)通过对宁夏六盘山区不同的秦艽生长立地条件的探究,有效成分积累量最高为阳坡,最低为半阴坡。     

麻花秦艽种子休眠机理及其破除方法

通过对干燥贮藏后熟麻花秦艽种子透水性和粗提物活性的测定以及采用高锰酸钾、赤霉素、青霉素、硫酸、流水浸泡方法进行发芽试验,探讨了种子休眠机理和破除休眠的技术。结果表明:麻花秦艽种子吸水过程符合Logistic曲线,其种皮对种子吸水无阻碍作用;硫酸和高锰酸钾处理极显著提高了麻花秦艽种子的发芽率(P<0.01),说明种皮机械障碍是种子萌发的因素之一。种子粗提物在浓度为0.02-0.2 g/mL时具有很强的抑制活性,均对小麦、白菜和麻花秦艽种子萌发和生长产生抑制作用以及流水浸泡可以提高麻花秦艽种子发芽率,表明种子内源抑制物是影响其休眠的另一因素。不同处理均打破了种子休眠,显著提高了种子发芽率,其中1.5%高锰酸钾浸泡10 min光照培养下种子发芽率及发芽势、发芽指数和活力指数均显著高于其他处理(P<0.05)。相比对照,1.5%高锰酸钾处理的种子发芽率极显著提高106.9%。经1.5%高锰酸钾浸泡10 min的麻花秦艽种子粗提物对白菜种子萌发的抑制作用低于未处理,以浓度为0.02-0.04 g/mL时抑制显著,说明高锰酸钾可减弱麻花秦艽种子内源抑制物的活性。综上所述,麻花秦艽种子的休眠属综合休眠。     

秦艽丰产栽培技术

主要研究宁夏产秦艽生物学特性、丰产栽培技术,解决秦艽驯化和规范化栽培的技术问题,扩大人工栽培面积,推进秦艽规范化栽培和产业化开发,保护濒临危绝的秦艽物种和资源。     

秦艽体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以秦艽子叶与胚轴为外植体,诱导秦艽体细胞胚胎发生并建立植株再生体系。结果表明：不同外植体以及植物激素浓度和种类对体细胞胚胎发生均有一定影响,其中秦艽的子叶胚性愈伤组织的诱导率最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L,6-BA0.5mg/L,其诱导率为61.3%,对胚轴胚性愈伤组织诱导最佳激素为2,4-D1.0mg/L,其诱导率为42.3%。将胚性愈伤组织转接至MS培养基,都可产生再生植株。     

秦艽种子发芽特性的研究

以秦艽种子为材料进行发芽床、温度、浸种及光照等不同处理的发芽试验,确定适宜秦艽种子发芽的最适条件,为秦艽种子质量检测方法提供参考依据。设置沙床、纸床2种方式,不同预处理,15℃、20℃、25℃、30℃4种温度恒温处理;见光和避光2种光照形式,采用标准发芽技术进行试验,考察不同处理对秦艽种子发芽率的影响。秦艽种子在有光照的条件下20℃时采用纸上发芽率最高,可达81.33%,预处理对秦艽种子发芽无显著影响。秦艽种子发芽计数时间确定为第10天进行初次计数,第18天进行末次计数。20℃时,采用光暗交替的纸床发芽形式更适合秦艽种子的发芽。     

中药秦艽基原植物的DNA分子鉴定

[目的]分析秦艽基原植物间不同DNA序列的差异,为秦艽药材DNA条形码的筛选和基原鉴定提供分子证据。[方法]采用PCR扩增纯化后直接测序的方法,测定大叶秦艽G.macrophylla pall.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、粗茎秦艽G.crassicaulis Duth-ieex Burk.、小秦艽G.dahurica Fisch、黄管秦艽G.officinalis H.Smith5种植物的核糖体DNAITS、叶绿体DNA psbA-trnH核苷酸序列,并作序列同源性分析。[结果]cpDNA psbA-trnH序列长度变异范围为316-318bp,有7种不同的单倍型,单倍型间有7个变异位点,序列的GC含量为21.2%。最大简约树的聚类结果与单倍型反映的结果一致。nrDNA ITS序列长度变异范围为624～625bp。有5种不同的单倍型、单倍型间有12个变异位点,序列的GC含量为59.3%。最大简约树的聚类结果表明,小秦艽与麻花艽聚为一支,大叶秦艽与黄管秦艽聚为一支,粗茎秦艽位于聚类图的最基部。[结论]nrDNAITS序列较适合作秦艽基原植物的DNA分子鉴定。