奶牛乳腺炎病原菌的分离鉴定及耐药性分析

2 0 0 2～ 2 0 0 3年采集上海地区 32个规模化奶牛场 433份奶样 ,共分离 2 54株细菌。其中包括金黄色葡萄球菌 48/2 54 (1 8 9% )、表皮葡萄球菌 34/2 54 (1 3 4% )、大肠杆菌 2 8/2 54 (1 1 0 % )、肺炎 /溶血巴氏杆菌 1 1 /2 54 (4 3 % )、无乳链球菌 2 5/2 54 (9 8% )、停乳链球菌 1 6/2 54(6 3 % )、乳房链球菌 1 5/2 54 (5 9% )及酵母菌 8/2 54 (5 9% )。表明葡萄球菌性乳腺炎仍占主导地位。药敏试验结果表明 ,分离菌株对临床常用的多种抗菌药物都产生了耐药性 ,耐药菌株的出现和抗生素的残留给乳腺炎的防治及食品安全带来了隐患     

牛源大肠杆菌耐药性研究进展

牛源致病性大肠杆菌是导致牛细菌性疾病的重要病原体之一,抗菌药是治疗及预防牛大肠杆菌病的重要手段,然而在养殖过程中,长期且不合理的使用抗菌药物,导致大肠杆菌耐药问题频发,且耐药性具有通过人与动物的直接接触或借助食物链将耐药基因从动物传播给人类的可能,严重威胁人类健康及公共卫生安全。本文根据近几年国内外关于牛源大肠杆菌耐药性基因的研究报道,对大肠杆菌耐药机制、耐药基因检出率及耐药表型进行综述,以期为大肠杆菌耐药性的研究提供参考。     

一例猪链球菌2型感染的病原分离鉴定及药敏试验

2016年2月,上海市崇明区某乡镇一规模养猪场出现40多头5~8周龄仔猪发病死亡情况。经细菌分离、分离菌株生化鉴定和PCR检测,确诊为猪链球菌2型感染。对该菌株采用K-B纸片法,进行10种常用抗菌药物的体外药敏试验,结果发现该细菌对青霉素、阿莫西林、恩诺沙星敏感,对诺氟沙星、阿奇霉素、壮观霉素、卡那霉素、阿米卡星、庆大霉素和氨苄西林不敏感。根据药敏试验结果,建议养猪户使用阿莫西林和恩诺沙星进行治疗,并做好病猪的隔离与护理。一周后病情得到控制。     

上海地区屠宰场猪红斑丹毒丝菌的分离鉴定

为了解上海地区猪红斑丹毒丝菌在健康猪群中的带菌状况,本试验选择上海地区标准化屠宰场的上市猪为研究对象,采集鼻拭子、肺脏、扁桃体和下颌淋巴结等样本,进行猪红斑丹毒丝菌的分离,采用VITEK 2 Compact系统和VITEK MS快速鉴定系统进行鉴定,并设计1对16S rRNA基因引物,对分离菌株进行PCR扩增,随机选取16株分离菌进行测序及16S rRNA同源性分析。结果显示,49.07%（105/214）的样本中分离到猪红斑丹毒丝菌,分离菌株同参考菌株及疫苗株之间16S rRNA同源性为99.6%~100.0%。本试验结果表明上海地区猪群中确实存在猪红斑丹毒丝菌的健康带菌状况。     

上海地区猪群中戊型肝炎病毒的流行情况

猪戊型肝炎是一种人畜共患病,为了弄清上海地区猪群中戊型肝炎的流行情况,评估其感染人的风险,于不同季节调查上海地区不同区(县)规模化猪场中不同月龄猪戊型肝炎病毒的感染状况.试验应用逆转录-巢式聚合酶链法fRT-nPCR)对9个区(县)51个猪场(次)的猪粪便标本和1个生猪屠宰中心的127份猪胆汁标本进行HEV RNA检测,结果为51个猪场次中31场次为阳性,阳性率为60.78%.1 699份猪粪便标本中201份为HEV RNA阳性,阳性率为11.83%;阳性标本季节分布明显,以夏秋季为主,平均阳性率为14.63%,而冬春季平均阳性率为5.91%;1月龄以内的仔猪感染率低于10%,为8.60%,其他均在10%～15%左右;9个养猪的区(县)中均存在戊型肝炎病毒的感染,但差异也较大,最高为18.30%,而低的只有0.61%.127份猪胆汁标本中有9份为阳性,阳性率为7.09%.结果说明上海地区的猪群中存在着较为广泛的猪戊型肝炎病毒的感染,提示密切接触者存在感染的风险.     

乙脑病毒E蛋白中和表位与结核杆菌hsp70 在大肠杆菌中的融合表达

根据大肠杆菌偏嗜性密码子原则,人工合成了乙脑病毒E蛋白C末端的中和表位,位于E蛋白上373~399 aa,通过EcoRⅠ和HindⅢ连接构建原核表达载体pET-32a-epitope。将hsp70通过HindⅢ和XhoⅠ连接到载体pET-32a-epitope上中和表位的3′端,构建融合表达载体pet-32a-epitope-hsp70。诱导表达后,将上清和沉淀分别进行SDS-PAGE,结果表明该融合蛋白以包含体形式存在。将包含体在8 mol/L的尿素中过夜溶解,然后将上清过柱,获得良好的纯化结果。融合蛋白的分子量为94 kD。Western blot显示该蛋白兼具对JEV和结核杆菌热休克蛋白70(M.Thsp70)的特异抗原性。     

不同施肥措施对镉污染土壤上菊花生长及其品质的影响

中药材的产量及其品质与施肥管理有着密切的关系.本试验通过盆栽试验研究了Cd污染土壤上施加钠磷、钙磷、有机肥、钠磷 有机肥和钙磷 有机肥对菊花生长及其品质的影响.结果表明,单施钠磷虽能提高菊花根系活力,降低菊花叶片Cd含量,同时会降低菊花叶片叶绿素含量,对菊花酶活性、蛋白质含量影响不大.钙磷在蛋白质含量、根系活力和叶绿素含量指标上的效果优于钠磷.有机肥增强菊花根系活力,有利于叶绿素合成,能提高菊花产量和蛋白质含量.除钙磷和有机肥的配合施用下根系活力指标较单施钙磷的效果差外,不同磷源和有机肥的配施处理发挥了磷素和有机肥各自的优点,均比单独施用方式的效果好.研究结果对于指导中药材种植的施肥管理具有参考价值.     

猪源附红细胞体rnpB基因的克隆与序列比较

为了解猪源附红细胞体(Mycoplasma spp.)RNA酶P RNA(RNase P RNA,rnpB)基因序列变异状况,将实验室保存的经16S rRNA基因序列分析鉴定的53份猪源附红细胞体阳性DNA样品用于rnpB基因的扩增,扩增产物克隆至pMD18-T载体并进行序列测定。将获得的序列与GenBank登录的猪附红细胞体(Mycoplasma suis)德国分离株rnpB基因序列(登录号:EF523602)进行分析和比对,利用MEGA5.0软件构建系统发育树,并与16S rRNA判定结果进行比较。结果共得到42条猪附红细胞体rnpB基因和11条小附红细胞体(M.parvum)rnpB基因序列。猪附红细胞体上海分离株rnpB基因与GenBank登录的猪附红细胞体德国分离株rnpB基因之间的核苷酸序列相似性为98.1%~100.0%;小附红细胞体上海分离株rnpB基因与猪附红细胞体德国分离株rnpB基因序列的相似性为91.0%,与猪附红细胞体上海分离株rnpB基因序列相似性为90.0%~91.0%。系统进化分析显示猪附红细胞体rnpB基因与小附红细胞体rnpB基因分布在不同聚簇上,与16S rRNA基因序列鉴定结果一致。     

上海地区鸡毒支原体的分离与鉴定

鸡毒支原体（M G ）是鸡的慢性呼吸道病病原体，感染发病的鸡主要表现为呼吸罗音、咳嗽、流浆液性鼻涕，并可见气囊炎，会造成鸡的胴体等级下降，饲料报酬率低，生长速度缓慢，产蛋量降低。该病多发于冬、春季节，通常与病毒、细菌协同感染，导致呼吸道症状加剧、死亡率增高。即使在接种鸡新城疫疫苗、传染性支气管炎疫苗时，也经常诱发本病。     

红腹锦鸡大肠杆菌与鸡异刺线虫混合感染的诊治

2000年 11月，上海市郊某饲养场从福建引进红腹锦鸡 102只，空运抵沪第 2天死亡 5只，第 3天死亡 4只，第 4天死亡 10只。临床上表现为精神沉郁、缩头缩颈、羽毛松乱，拉黄绿色稀便。用土霉素、庆大霉素、球菌灵治疗，效果不明显。 1病理变化 　　剖检病死锦鸡若干只，可见肝淤血，色紫黑，胆囊充盈。主要病变在肠道，肠壁变薄、出血，盲肠壁嵌有大量小米粒大至高粱米粒大灰白色、褐色结节，充满整个肠腔，内容物黑褐色，肠壁菲薄。盲肠上、下段，小肠、直肠壁上也有少量结节。 2实验室诊断 2.1病料涂片镜检 取病死锦鸡心、肝、脾涂片，革兰…