苜蓿根瘤菌绿色荧光蛋白标记株的构建及对菌株结瘤固氮能力的影响

以苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti12531,Sinorhizobium meliloti343和苜蓿根瘤菌Rhizobium meliloti GN5为受体菌,以Escherichia coli pRK2073为辅助菌及绿色荧光蛋白GFP104为供体菌,采用三亲本杂交法进行结合转导。以Winogradsky无氮培养基和TY培养基对标记菌株进行荧光表达及固氮特性的遗传稳定性检测,再对选出的荧光标记菌株以甘农5号紫花苜蓿和WL.343紫花苜蓿为宿主进行回接验证,测定了回接植物的生物量,结瘤数和标记菌的占瘤率等指标。结果表明:(1)三亲本杂交法适用于苜蓿根瘤菌GFP荧光标记菌株的构建,能以S.meliloti 343、R.meliloti GN5和S.meliloti 12531为出发菌株成功构建荧光标记菌株;(2)传代筛选后得到的荧光标记菌株中,S.meliloti 343-gfp2、R.meliloti GN5-gfp4和S.meliloti12531-gfp4遗传稳定性好,荧光表达量高;(3)含抗生素Winogradsky无氮培养基平板筛选与现有含抗生素平板分离筛选法相比,能显著提高荧光标记根瘤菌株的筛选效率;(4)获得的苜蓿根瘤菌荧光标记菌株间无显著差异,对标记菌株形成根瘤的固氮能力,及标记菌株对苜蓿植株生物量的影响进行比较,GFP荧光标记根瘤菌具有较高的遗传稳定性。     

红、黄、绿三种颜色荧光质粒导入大肠杆菌中的稳定性表达

【目的】红、黄、绿3种颜色荧光蛋白质粒导入大肠杆菌的热稳定表达是实现质粒与受体菌杂交获得荧光标记菌的关键,荧光标记菌的构建,可极大地丰富荧光标记菌的颜色类别,为微生物示踪研究提供丰富的工具.【方法】采用大肠杆菌DH5α热激转导法构建荧光标记菌.【结果】黄色和绿色蛋白质粒在原液浓度基础上,稀释10倍进行热激转导,红色蛋白质粒原液直接进行热激转导,可将携带红、黄、绿3种颜色荧光蛋白的质粒DNA成功导入大肠杆菌.【结论】经PCR重复检测,条带明显并符合红、黄、绿3种颜色荧光质粒基因序列大小,3种颜色荧光质粒热稳定表达水平较高.     

发展节粮型畜牧业模式与潜力——甘肃省种草养畜的实践与经验

<正>近年来,甘肃省大力发展草畜产业,在特色牧草产业培植、新技术推广、草畜转化等方面取得了一定成效。大力种草,发展低耗节粮型草食畜禽(牛、羊、鹅、兔等)的热潮正在掀起。     

草业科学本科专业课程体系演变——以甘肃农业大学草业科学专业为例

采用文献研究、比较分析等方法,对甘肃农业大学草业学院草学专业的课程体系演变进行了理论分析与实践。研究结果表明,草业科学专业逐步建立了与国内外发展趋势和社会需求相适应的重基础、宽口径的课程体系;设计并实施以强化专业理论与实践为主体,提升人文素质,全面提高学生动手能力和综合素质的本科生培养模式。并根据科技发展与社会需求及学校办学实际,提出了课程体系优化建议。     

西北地区羊茅属牧草和草坪草的综合评价

羊茅属植物是重要的牧草和草坪草，通过对西北地区野生羊茅属各个种的搜集，国内外羊茅属7个种24个供试材料的筛选比较，从染色体检查，同工酶分析，营养成分分析，田间试验，产草量，种子产量以及作为草坪草的建评速度，绿色期，耐践踏性，观感等方面的综合评价，筛选出苇状羊茅是极有发展前景的优良牧草，高羊茅和紫羊茅是良好的草坪草，并羊茅属的各个种在一定程度上都可作为绿地建植和水土保持用草种。     

甘肃旱农区养猪业节粮化发展的思考

通过分析甘肃旱农区自然经济条件及资源开发潜力，探讨了大力开发苜蓿等优质蛋白质饲料饲草资源，建立符合营养、资源和经济原则的饲料配合模式，有效提高饲料利用率和转化率等养猪业节粮化发展措施，提出了在充分发挥农户分散养殖优势的基础上，建立家庭养殖与工厂集约化规模养殖相结合的节粮高效生产体系的发展思路，在提高养猪生产科技含量和技术水平的前提下，走社会、经济和生态效益并重的节粮化发展之路。     

青贮玉米有氧暴露过程中营养品质及细菌群落多样性

青贮饲料营养品质的优劣很大程度上由其微生物组成决定,有氧暴露会引起微生物群落多样性发生变化。为探明有氧暴露后青贮玉米细菌多样性分布及其对青贮品质的影响,本试验对有氧暴露后0 h, 1 h, 8 h, 24 h, 36 h, 48 h, 72 h, 96 h, 120 h青贮玉米(Zea mays L.)的营养品质和细菌群落结构测定与分析。结果表明：青贮玉米在有氧暴露过程中可溶性糖、粗蛋白和干物质含量降低,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量上升,钙和磷含量变化不明显;有氧暴露过程中细菌多样性呈先升高后降低的趋势,在有氧暴露36 h时细菌多样性最高;有氧暴露不同时间,优势细菌门分别是厚壁菌门和放线菌门,优势细菌属为乳酸菌属;有氧暴露过程中厚壁菌门与可溶性糖和蛋白质含量呈极显著正相关关系,与中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量呈极显著负相关关系;变形菌门和酸杆菌门细菌与可溶性糖含量呈负相关关系。综上所述,与生产实践相结合青贮玉米应该在有氧暴露8 h内完成饲喂。     

硼处理根瘤菌接种液对紫花苜蓿根、茎、叶中可溶性糖含量的影响

以甘农5号紫花苜蓿(Medicago sativa'G a n n o n g N o.5')为材料,设置未添加硼且未接菌的紫花苜蓿为对照和添加不同硼浓度(0、0.05、1、5、10和100 mg·L?1)的两种根瘤菌菌液(Sinorhizobium meliloti LZgn5f和S.meliloti 12531f)接种紫花苜蓿幼苗根部,研究硼处理根瘤菌接种对不同时期根、茎、叶中可溶性糖含量的影响.结果表明:1 mg·L?1硼处理外源根瘤菌12531f和100 mg·L?1硼处理内源根瘤菌gn5f接种后,不同取样时期苜蓿根和茎中可溶性糖含量均高出对照和单独接菌处理,且可以促进不同时期苜蓿体内可溶性糖向根和茎中运输积累.综上所述,适宜的硼处理两菌株均可促进不同生长时期叶中可溶性糖向根和茎中运输积累,保持根、茎、叶中可溶性糖的动态平衡.     

碘乙酰胺和罗丹明对苜蓿原生质体失活效果的效应

以清水紫花苜蓿(Medicago sativa cv.Qingshui))和甘农4号紫花苜蓿(M.sativacv.Gan-nong No.4)愈伤组织原生质体为材料,研究了碘乙酰胺(IOA)和罗丹明6G(R-6G)在5个不同浓度梯度处理下对原生质体细胞质失活效果的影响。结果表明,3～10mmol/L的IOA和4 070μg/mL的R-6G分别处理10min,可使2个品种原生质体的活力及植板率明显下降,品种间差异显著(P<0.05),各处理浓度与活力和植板率之间均存在极显著的负相关(P<0.01)。培养第7d,所有处理均可见再生的小细胞团,培养30～40d,所有高于最低失活浓度的处理原生质体均丧失了再生愈伤组织的能力。适宜2个品种的最佳抑制剂及最低失活浓度分别为3mmol/L IOA或40μg/mL R-6G。