雏鸡绿脓杆菌病的诊断与防制

绿脓杆菌是广泛分布于土壤、水和空气中的一种细菌,在正常人畜肠道和皮肤上也有此菌生存。在某些条件下,它可引起雏鸡和育成鸡局部性或全身性感染。细菌侵入受精蛋后,可致胚胎或刚出壳幼雏死亡。此外,它的污染能降低肉的品质和保存时间。因此,对该病的防制不容忽视。我室对某鸡场送检的患病幼雏进行检验,确诊为绿脓杆菌病。 一、临诊症状及剖检变化 某鸡场育雏期间发现不明原因的小鸡死亡率偏高,病鸡精神不振,腹泻,部分鸡出现结膜炎等,病鸡常于 ２４～４８小时内死亡。 剖检变化：眼周围水肿,喉头粘液增多;肝、肾肿大,有出血小…     

宜良商品肉鸭鸭疫里默氏杆菌的初步研究

从宜良等地 198份病、死鸭组织中分离到 5 2株鸭疫里默氏杆菌 (RA)。并进行了生理生化、药敏、血清学、免疫学试验。试验结果表明 :5 2株鸭疫里默氏杆菌 (RA)有 3个优势血清型 ;RA对氨苄青霉素、头孢噻吩、头孢氨苄、左旋氧氟沙星、硫酸安普霉素等药物敏感 ,对链霉素、柱晶白霉素等药物不敏感 ;受试菌株制备的灭活疫苗免疫雏鸭后 ,对同原菌株的攻击显示出良好的免疫保护。     

鹅副粘病毒F基因的克隆测序及核苷酸序列分析

以鹅副粘病毒 (GPV) SF0 2株的基因组 RNA为模板 ,通过 RT- PCR的方法扩增出 F基因片段 ,然后将其克隆至 T载体中。经 PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出 F基因的全序列。与 Gen Bank下载的 9株参考毒株比较 F基因编码区全核苷酸序列 ,发现所测 GPV- SF0 2毒株与参考毒株 L Z- NDV核苷酸序列同源性为 96 %,与F48E9同源性为 92 .5 %,与 L a Sota为 88%。     

云南边境H5N1亚型禽流感病毒聚合酶基因分子结构特征分析

2004～2009年期间在云南边境采集境外禽类样品560份,经RT-PCR及多重RT-PCR检测,检出10份H5N1亚型禽流感病毒阳性样品,对其聚合酶基因进行扩增,克隆至pMD18-T载体中进行测序,并与国内外已知参考毒株序列进行比对及系统发育分析。结果显示:云南边境H5N1亚型禽流感病毒可划分为5个进化(亚)分支,分别与标准毒株遗传关系密切,聚合酶基因与血凝素基因的进化分支划分结果存在差异。表明目前聚合酶基因的进化除了自发突变作用影响基因进化,同时聚合酶的进化途径在时间特征和区域特征方面与血凝素基因的进化有一定的关系。2004～2009年期间云南境外H5N1亚型禽流感病毒间具有遗传差异,进化分枝2.3.4毒株已成为当地流行的优势毒株,不同进化分枝或同一进化分枝不同毒株聚合酶基因氨基酸结构和糖基化位点均有改变。     

云南省禽流感、新城疫与3种免疫抑制性病原共感染的检测

为调查云南省禽流感病毒、新城疫病毒与免疫抑制性病毒混合感染的情况,对云南省2007年1月～2009年10月期间145份禽流感阳性及30份新城疫阳性样品进行禽网状内皮增生病病毒(REV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及鸡传染性贫血病毒(CIAV)的检测。禽流感阳性样品中ALV-J的感染阳性率为15.9%,REV的感染阳性率为22.8%,CIAV的感染阳性率为26.9%;新城疫阳性样品中ALV-J的感染阳性率为13.3%,REV的感染阳性率为23.3%,CIAV的感染阳性率为26.7%;共有30份样品发生多重感染,多重感染率为17.1%。对不同区域的4份禽白血病病毒阳性样品、10份禽网状内皮增生病病毒阳性样品、10份禽传染性贫血病毒阳性样品进行了序列比对和系统发育分析。结果表明,云南ALV-J毒株gp85基因与国内外毒株核苷酸及氨基酸同源性分别介于80.4%～96.7%、85.2%～94.5%;REV毒株env基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为98.8%～99.8%、97.7%～99.5%;CIAV毒株vp2基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为92.4%～100.0%、93.7%～100.0%。     

云南狂犬病监测及病毒部分N基因序列比较

狂犬病是由狂犬病毒感染引起的一种严重侵害中枢神经系统的致死性人畜共患传染病,呈世界性分布,我国属于疫病高发区.基于病毒N基因结构和变异特征,将狂犬病毒分为2个进化组群、7个基因型[1].国内外已研究建立了一批狂犬病诊断方法[2-4],开展病毒基因结构特征及分子流行病学研究[5-7].至今未见对近年云南狂犬病研究报道.本文在云南省4个地区开展狂犬病病原学监测,并对病毒N基因进行克隆测序,以期认识狂犬病分布状况、病毒特征及与已知毒株的遗传相关性.     

2006-2007年云南流行H9N2禽流感病毒血凝素全基因序列分析

为调查云南省H9N2亚型禽流感病毒的分子流行病学情况,对2006年6月至2007年4月从云南省16地州随机采集了各种家禽、家猪的5 728份喉气管和口腔棉拭子样品进行RT-PCR检测,276份样品呈H9N2阳性.将具有代表性的17份阳性样品的HA全长基因序列测定和分析.结果表明:株间HA基因同源性为91%～100%,推导氨基酸同源性95%～100%,所测序列与云南1999年分离H9N2毒株ackynkenxie-1-99的同源性仅为93%.根据HA基因同源性,可将17个毒株可分为2个亚群,一个亚群的12株HA基因同源性高达97%以上,与Qa/ST3143/05和C/Bei1/94同源性是97%和93%,其中的11株毒株HA基因全长1 671,编码556aa,存在第6～9位4 aa缺失,只有AC/Yndq/06株HA基因1 683.编码560 aa.另外一个亚群的其余5株,同源性98%以上,HA基因全长1683 bp,编码560 aa.17个毒株中3个存在218～220 aa糖基化位点变异,1个毒株551～553 as糖基化位点发生变异.所有毒株在HA裂解位点处没有连续性碱性氨基酸插入,受体结合位点处的氨基酸没有变异.     

一起猪伪狂犬病的诊断与分析

为了查找云南曲靖区某猪场发生怀孕母猪流产和产木乃伊胎儿增多的原因,采集流产胎儿脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结等组织器官和母猪血清、全血。试验对胎儿组织器官进行猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征的病原核酸检测,对母猪血清进行猪伪狂犬野毒感染gI抗体检测。检测结果表明胎儿猪伪狂犬病毒核酸阳性,猪血清伪狂犬野毒感染gI抗体阳性。诊断该场引起母猪流产和产木乃伊胎儿增多的病因是猪伪狂犬病毒感染所致。     

猪链球菌病的综合诊断与治疗

猪链球菌病是由致病性链球菌感染引起的,临床上有败血型、脑炎型、关节型和淋巴结炎型4种表现。其中败血型链球菌病与急性猪瘟、急性猪丹毒表现相似,应从临床症状、发病年龄、病理变化及进行实验室检查等方面才能确诊。免疫接种时宜选用多价疫苗,药物防治可通过药敏试验筛选敏感药物,加强饲养管理有助于减少该病的发生。     

H5N1和H9N2亚型禽流感病毒型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的建立

采用禽流感病毒多克隆抗体及型特异性单克隆抗体，研究建立了型特异性抗原捕捉ELISA检测方法，用于检测H5N1和H9N2亚型禽流感病毒。优化了反应条件，确定了包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度，对该方法的敏感性、特异性、重复性及稳定性进行了分析，并与病毒分离鉴定的结果进行了比较。结果表明，该方法敏感、特异，具有良好的重复性和稳定性，可用于临床样品及鸡胚、细胞培养物中禽流感病毒的检测。