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应用多个抗原袁位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞袁位预测及分析,从中选取了三个抗原表位富集的基因片段,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapping extension PCR,SOE PCR)将该三个基因片段串联在一起,各基因片段之间以柔性氨基酸(GGGGS)碱基序列链接,得到的拼接片段命名为CpTm.将目的基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pET-CpTm,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体.结果成功地构建了CpTm串联基因并在大肠杆菌中以可溶形式高效表达,质谱分析表明重组表达蛋白包含了上述三个抗原的氨基酸序列.Western blot分析显示该重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清及隐孢子虫鼠基因型CP15、P23、CP15/60基因重组表达蛋白免疫兔血清识别,制备的抗血清能被重组蛋白特异性识别,表明表达的重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性,为多表位疫苗的研制奠定了基础. 相似文献
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为将微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)P23基因在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增P23基因序列,构建pPIC9K-P23重组质粒,在毕赤酵母中进行表达,用阴离子交换层析柱进行纯化。以重组P23纯化蛋白为抗原建立间接ELISA检测方法,对现场采集的猪血清样品进行检测。SDS-PAGE显示所表达的蛋白大小约为23 kDa。Western blot检测表明该蛋白能与兔抗P23蛋白血清特异性结合。用建立的间接ELISA技术对186份猪血清样品进行检测,阳性率为83.3%。本研究获得了真核表达的P23重组蛋白,初步建立了微小隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,为隐孢子虫病的诊断和流行病学调查打下了基础。 相似文献
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近几年由于草原载畜量过大,放牧过度,造成有毒植物大量滋生。尤其在伊犁草原乌头草已给畜牧业生产带来了严重影响,本文就乌头草的生长特点、毒性和中毒治疗给予介绍。 相似文献
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文章针对玉米难以膨化及膨化前后物理性质变化较大等问题,设计了一套时产1.5~3 t的饲料原料膨化生产线及其关键设备。该生产线由原料双清筛、粉碎机、调质器、膨化机、脉冲除尘器、翻板冷却器、料仓、蒸汽及膨化机主机负荷自动调节系统等组成。本设计改进了粉碎机的结构和保障粉碎机高效的风网体系;通过双清筛将原料中粗细杂筛出、延长了膨化机工作部件的寿命;使用效果好的调质器提高了膨化机的产能;使用多用型翻板式冷却器达到了理想的冷却及排卸功能;平底料仓的使用彻底解决了物料结拱问题;使用蒸汽及主机负荷自动调节系统提高了膨化机的产能。 相似文献
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对不育系闽红249S的再生力以及水稻品种闽红两优727作再生稻头季适宜留桩高度以及机械化生产的产量潜力进行了比较研究。结果表明:闽红249S是一个再生力强的水稻不育系,其再生率(力)为1.89,比强再生力对照佳辐占(1.67)高13.17%,差异达显著水平;闽红两优727作再生稻栽培时较适宜留低桩,留桩高度15 cm,再生季产量构成性状协调、产量高;闽红两优727头季、再生季和全年两季平均每667 m~2产量分别为597.87、320.05和917.92 kg,与机收低桩再生稻全程机械化生产主推品种泸优明占产量相当,适合作机收低桩再生稻全程机械化生产应用推广。 相似文献
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在多年的临床实践中,笔者运用顺气孔插枝疗法治疗牛、羊的角膜炎、结膜炎、瘤胃膨气、不反刍等,猪的消化不良、胃肠炎、感冒、四肢风湿麻痹、鼻炎、便秘、喘气等多种疾病,共198例,取得了较好的疗效。 相似文献