改良的苯酚-硫酸法测定蛹虫草多糖含量

[目的]改良苯酚-硫酸法测定蛹虫草多糖含量.[方法]采用水提醇沉法制备多糖沉淀并溶解成供试品溶液.精密量取供试品溶液和葡萄糖对照溶液各1.0ml,分别置10 ml具塞试管中,加1.0 ml水,缓慢加入7.0ml浓硫酸,摇匀,恒温放置1h,加入1.0 ml4％苯酚溶液,摇匀,40℃水浴35 min后冰水浴5 min,取出放置20 min,在487 nm处测定吸光度,计算多糖含量.[结果]该方法在10.26 ～102.55 μg葡萄糖的回归方程为Y=0.013 9X +0.007(r =0.999 9);平均回收率为97.7％(RSD=2.3％),精密度试验和重复性试验的RSD分别为1.4％和2.7％.不同来源蛹虫草多糖含量在1.21％ ～4.70％.[结论]该方法显色稳定、准确可靠、重复性好、灵敏度高,可测定蛹虫草多糖含量并为蛹虫草质量研究提供依据.     

应用混合树脂技术从蛹虫草中提取纯化虫草素

[目的]应用混合树脂技术从蛹虫草中提取纯化虫草素.[方法]利用微波辅助提取法从蛹虫草子实体或其大米培养残基中提取虫草素,利用混合大孔树脂对虫草提取物进行分离纯化.通过比较大孔吸附树脂和阴阳离子交换树脂对虫草素的静态吸附和解吸,以吸附量和解吸附率为评价指标,从11种商品化树脂中筛选出较佳树脂,进一步进行树脂混合比例的静态吸附试验,筛选出较佳的干树脂质量比,按此比例在树脂柱中设计了几种不同的填装混合方式进行动态吸附和解吸.[结果]试验筛选出LSA-21、XAD-16、LX-28 3种大孔吸附树脂为较佳树脂,进行静态吸附试验时三者较佳的干树脂质量比为1∶1∶1.将XAD-16、LX-28、LSA-21 3种树脂按由上至下分层填装的方式进行动态吸附和解吸附效果较好,应用该混合树脂床进行一次动态吸附和解吸附后,解吸液浸膏中虫草素的含量由原生药中的0.442％提高至23.600％.[结论]该方法可应用于蛹虫草子实体或其培养残基中虫草素的提取纯化.     

虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响

为探讨虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响,以240羽健康余干乌鸡作为研究对象,鸡新城疫苗常规免疫,在饲粮中添加不同剂量虫草菌粉,同时设空白对照组。各组在饲喂虫草菌粉第10、20、30天时随机选择20羽,先采血检测免疫细胞活性、新城疫(NDV)抗体滴度;再处死称取法氏囊与脾脏的质量。通过研究法氏囊与脾脏质量变化、E-玫瑰花环率、淋巴细胞转化率、新城疫抗体滴度等指标来了解虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响。结果表明:虫草菌粉能够加快雏鸡免疫器官的发育,提高T淋巴细胞活性;在饲喂虫草菌粉20 d时中剂量组比对照组抗体水平提高1∶22.1,高剂量组比对照组提高1∶22.53,使特异性抗体提前达到高水平。说明虫草菌粉能够增强雏鸡免疫功能。     

亚香棒虫草菌丝体不同培养基筛选试验

通过设计9个配方,研究了不同培养基对亚香棒虫草菌丝体生长的影响。结果表明,配方3（绿豆芽250g、白糖10g、琼脂10g、KH2P040．5g、MgSO40．5g、蛋白胨0．25g、水500mL）和配方7（葡萄糖15g、淀粉20g、琼脂15g、硝酸钾1g、氯化钙0．05g、硫酸锰0．1g、蛋白胨2g、水500mL）为最佳配方,亚香棒虫草菌丝体在这两个配方培养基上生长得又好又快。     

河南省虫草资源调查研究

通过详细的文献和标本调查,对河南省分布的10个虫草种类进行了较为详细的整理和介绍,并对其保护与利用提出了建议。同时,对研究中存在的问题进行了阐述。     

蛹虫草对幼虫期家蚕感染的探究

[目的]探索对家蚕具有较好感染效果的优势蛹虫草菌株和有效的感染方法。[方法]通过蛹虫草的家蚕感染试验,研究不同感染方法对蛹虫草菌株感染能力和子实体产量的影响。[结果]悬液注射法和表面消毒浸染法的感染率较高。不同蛹虫草菌株对家蚕的感染能力存在极显著差异。菌株04718的感染效果最好,菌株7172次之,菌株04最差。利用表面消毒浸染法对家蚕进行感染,蛹虫草菌子实体得率最高。用不同蛹虫草菌株感染家蚕后,产子实体能力存在极显著差异。菌株04718感染后产子实体能力最强,菌株7172次之,菌株04较差。[结论]表面消毒浸染法和悬液注射法为利用蛹虫草菌株感染桑蚕幼虫的较好方法。     

Effects of the exopolysaccharide fraction (EPSF) from a cultivated Cordyceps sinensis on immunocytes of H22 tumor bearing mice

In order to explore the effects of exopolysaccharide fraction (EPSF) from one of the anamorph strains of Cordyceps sinensis on immunocyte activity of H22 tumor bearing mice, ICR mice were treated with EPSF for 7 days by intraperitoneal injection at doses of 15 mg/kg (low-dose), 30 mg/kg (mid-dose) and 60 mg/kg (high-dose) after H22 tumor cells were implanted. At the end of the experiments, the tumor weight of each mouse was measured. Phagocytosis of mouse peritoneal macrophages was tested by neutral red uptake. The TNF-alpha expression of macrophages was assayed by ELISA. Proliferation ability and cytotoxicity of spleen lymphocytes were determined by MTT methods. The mRNA levels of cytokine TNF-alpha and IFN-gamma mRNA of spleen lymphocytes were detected by RT-PCR. The results indicated that EPSF not only significantly inhibited the H22 tumor growth, but also significantly elevated immunocytes' activity. It significantly enhanced the phagocytosis capacity of peritoneal macrophages and proliferation ability of spleen lymphocytes at all the three doses; it significantly promoted macrophages' TNF-alpha expression and spleen lymphocytes' cytotoxicity. EPSF also significantly elevated TNF-alpha and IFN-gamma mRNA expression of splenic lymphocytes. This experimental finding suggests that EPSF could elevate the immunocytes' activity in H22 tumor bearing mice.     

谷物发酵制备富硒蛹虫草营养米糊的工艺配方研究

利用大米、小米、紫米和荞麦为基质进行蛹虫草固体发酵,采用氢化物-发生原子荧光法测定总硒含量,高效液相色谱分析基质中虫草素和腺苷含量,考马斯亮蓝和硫酸-苯酚法测定粗蛋白和粗多糖含量。在单因素试验的基础上,采用响应面法对营养米糊的工艺配方进行优化,以有机硒、虫草素、腺苷、多糖、蛋白质、感官评分为指标,对营养米糊的冲泡料液比和水温进行比较与分析。结果表明,蛹虫草菌丝能够在15 d完全侵染大米、小米、紫米和荞麦基质,总硒含量分别为（1.8±0.3）mg/kg、（1.7±0.4）mg/kg、（1.9±0.4）mg/kg和（1.7±0.5）mg/kg,其中硒形态主要为硒代蛋氨酸。谷物发酵基质中富含虫草素、腺苷、多糖和蛋白质。通过单因素试验确定发酵基质适宜干燥温度为50℃,干燥后富硒蛹虫草谷物基质的粒形完整、菌丝暴露表面呈金黄色。由单因素与响应面试验优化富硒蛹虫草营养米糊（以大米基质为例）的制备工艺配方为：富硒蛹虫草谷物基质添加量50.0%,奶粉添加量4.5%,冲泡水温80℃。该条件下制备的营养米糊富含蛹虫草特有清香,色泽诱人,口感香醇,丰富了米糊的加工种类。     

冬虫夏草菌分批发酵动力学模型的研究

[目的]建立冬虫夏草菌分批发酵动力学模型。[方法]利用7 L机械搅拌式发酵罐对冬虫夏草菌进行分批培养,对菌体、胞外产物和底物的代谢过程进行分析。基于Logistic方程以及Luedeking-Piret方程等,通过1stOpt软件对试验数据进行非线性拟合及相关参数求解,建立菌体生长、胞外虫草酸(D-甘露醇)合成及糖消耗的发酵动力学模型。[结果]经拟合得到的模型参数估算值基本符合发酵规律,3项模型联立拟合R^2为0.986 5,菌体、产物和底物拟合曲线R^2分别为0.971 9、0.988 0和0.991 7。[结论]模型拟合良好,能够反映冬虫夏草菌发酵动力学特性。     

蛹虫草菌种退化的检测方法和影响因素

从蛹虫草菌种的退化表现、早期的检测方法、菌种退化的影响因素和退化菌种的复壮等方面对蛹虫草菌种退化进行总结,以期为蛹虫草菌种退化的研究提供新思路。