人兽共患寄生虫病候选疫苗分子筛选方法研究进展

人兽共患寄生虫种类多、宿主广泛且危害严重。血吸虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病、旋毛虫病、弓形虫病等是常见的重要人兽共患寄生虫病。人类和家畜饱受寄生虫病的危害,这对公共卫生和畜牧业造成了很大的影响。控制传染源、切断传播途径和保护易感群是控制人兽共患寄生虫病流行的综合防控措施。在综合防控策略中,疫苗的使用是切断循环链、控制乃至消灭人兽共患寄生虫病的理想和有效途径之一。选用高效的抗原筛选方法挖掘潜在的疫苗候选分子是开发疫苗的前提和关键。抗原筛选技术的更新换代使得研究者发掘出了更多新抗原和保护性多肽。现有的抗原筛选方法主要包括传统的粗抗原筛选法、cDNA文库筛选法、蛋白质组学筛选法、生物信息学及多组学技术联合筛选法。很多抗原筛选的方法是伴随寄生虫疫苗研究的发展应运而生的,粗抗原筛选法是基于抗原抗体相互反应的免疫学原理而设计的,此方法筛选的天然抗原可引起机体较强的免疫反应;cDNA文库筛选抗原的优势在于筛选更有针对性,所以候选产物的成分更单一、明确;蛋白质组学筛选法是基于质谱而兴起的一种筛选技术,它既可对未知蛋白组分进行鉴定,还可对鉴定结果进行差异比较,在未知分子的发现和功能特殊的靶分子筛选中发挥着重要作用;随着后基因时代的到来,生物信息学及多组学联合筛选技术使得抗原筛选逐步进入了多维、立体的筛选模式,也使得候选抗原及其表位的功能研究更加深入,这为基因工程疫苗和多肽疫苗候选分子的筛选提供了技术手段。     

猪瘟与猪附红细胞体病混合感染的诊断

猪附红细胞体病多发于夏秋季节,特别是蚊蝇较多的地方发病率高,主要表现为食欲不振或废绝,皮肤苍白至黄染,血液稀薄,体温40～41℃,病程较长,仔猪死亡率较高。猪瘟主要在冬春季节高发,其他季节也有发病,不分年龄、性别,死亡率极高。2012年7月,思南县东华乡某养猪场1周内有29头猪(母猪5头、仔猪16头、育肥猪8头)发病后1～2天死亡,经过多种药物治疗均无效。通过流行     

猪流行性腹泻的防治

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的一种以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征的急性肠道传染病。各年龄段的猪均能感染发病,尤其哺乳仔猪受害最为严重,本病主要发生在冬春两季,其传播范围广,且发病率较高,严重危害养猪业的发展,给养猪生产造成了一     

新生仔猪溶血症的中西医防治

新生仔猪溶血症是指新生仔猪吃初乳后引起的红细胞溶解的一种急性、血管内溶血性疾病。患病仔猪以贫血、黄疸和血红蛋白尿为主要特征,死亡率可达100%。该病的实质是由于母猪血清抗体与新生仔猪红细胞抗原不合,而引起的一种同种免疫溶血性反应的病理过程,是母猪血清和初乳中存在抗仔猪红细胞抗原的特异血型抗体所致的疾病。     

探析畜禽养殖场免疫失败的原因及对策

正现阶段乃至今后相当长时期内免疫接种仍然是养殖场生物安全最有效手段之一。不幸的是,目前养殖场不管是养鸡场还是养猪场,所选用的疫苗特别是活疫苗,使用剂量一直在加大,单位抗原量一直在增加,免疫频率一直在提高,抗原毒力一直在增强,养殖场免疫失败导致的发病率也一     

重氮化法合成全抗原的研究

[目的]制备氯霉素全抗原,探索氯霉素合成的方法,为动物免疫试验作准备。[方法]采用重氮化法合成氯霉素卵清蛋白全抗原,通过紫外法和红外光谱法测定合成的偶联效果。[结果]重氮化法可用于制备较高偶联率的氯霉素全抗原,用于免疫动物制备抗体。[结论]该研究为合成高效价的抗体奠定了基础。     

猪肺脏气道上皮干细胞的特异抗体筛选与抗原表达研究

猪肺脏气道上皮主要由基底细胞,克拉拉细胞,纤毛细胞,杯状细胞等上皮细胞类型组成,筛选猪气道上皮干细胞的相关特异性抗体,观察其特异抗原的表达,将有助于对猪气道上皮干细胞的分离、鉴定和生物学特性的研究.试验中,制备远端气道上皮细胞的冰冻切片与细胞爬片,利用免疫荧光染色法,分析不同物种来源的抗体对猪气道上皮细胞的免疫染色反应;同时利用Oct3/4、Sox2、CD133和SSEA-1等10种上皮干细胞相关抗体分析猪气道上皮干细胞表面抗原表达情况.通过试验,筛选出在猪气道上皮干细胞相关抗体,并发现气道组织冰冻切片未检测到这10种抗体相关的阳性细胞,而在细胞爬片中观察到CD49f和CD117阳性细胞数量较多.免疫荧光共染发现这些CD49f和CD117阳性细胞同时也表达基底细胞表面标记Keratin 14.这可能是正常情况下猪气道上皮干细胞数量极为稀少,表面抗原表达量低而不易检测到,在肺脏气道上皮受到外环境刺激时(如消化),上皮干细胞开始增殖以完成损伤修复作用发生数量上的增殖.综上所述,利用Keratin 14和CD49f或CD117(c-kit)双标染色法可以鉴定猪肺脏气道上皮干细胞的候选亚群来用于其生物学特性与功能的研究.