不同养殖模式下加州鲈鱼肉质比较分析

为分析循环水养殖和池塘养殖下加州鲈鱼肉质区别,探索循环水养殖模式优点.采集同龄段、同一饲料喂养的2种养殖模式下的加州鲈鱼,通过测定加州鲈鱼的基础营养成分、肉质相关指标和质构特性(TPA分析)来评价2种养殖模式下鲈鱼肉质,并采用扫描电镜,对2种加州鲈鱼进行观察,分析其微观结构差异.结果显示,循环水养殖加州鲈鱼较池塘养殖比,其粗蛋白含量显著提高(P<0.05),粗脂肪含量显著降低(P<0.05);滴水损失率、冷冻渗出率和蒸煮损失率均高于池塘养殖组(P<0.05);循环水养殖组鲈鱼鱼肉硬度、胶着性和咀嚼性均高于池塘养殖组(P<0.05),肌纤维排布更加整齐致密.说明循环水养殖的加州鲈鱼的鱼肉营养和肉质均有一定程度的提升,适宜进一步推广和研究.     

哈维氏弧菌的主要致病因子及其特性分析

从大黄鱼致病菌哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1株提取外膜蛋白(OMP)、脂多糖(LPS)和胞外产物(ECP),并进行毒性实验,以研究哈维氏弧菌的主要致病因子及其特征.结果表明:OMP、LPS致病性较弱,而ECP可导致鱼死亡,初步得出哈维氏弧菌GYC1108-1株的主要致病因子为胞外产物,其对鱼的半数致死量(LD50)为3.5 μg·g-1;该蛋白酶与底物偶氮酪蛋白(azocasein)作用的最适pH为8.0,最适温度28℃,对热敏感,分子质量为55 ku;该酶活性被碘乙酸抑制,也被SDS和HgCl2完全抑制,PMSF和ZnCl2能部分抑制该蛋白酶活性,而CuCl2、CaCl2、MgCl2对该酶活性影响不大,2-巯基乙醇、DTT、L-半胱氨酸、EDTA和EGTA对该酶活性有促进作用,表明其为半胱氨酸蛋白酶;研究发现ECP具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂酶和脂肪酶活性,无脲酶活性;免疫印迹结果发现GYC1108-1的ECP能与大黄鱼抗GYC1108-1血清发生免疫发应,分子质量为55 ku的半胱氨酸蛋白酶是具有免疫原性的物质.     

不同生长阶段马口鱼肠道菌群差异性研究

为研究马口鱼不同生长阶段肠道菌群的结构差异,找出影响肠道菌群结构差异的因素。采用Illumina Hiseq2500高通量测序技术分析了2月龄、5月龄、9月龄的马口鱼肠道菌群结构,并对2月龄、5月龄、9月龄马口鱼的生长性能和养殖水质进行了检测。生长性能检测结果显示：从体重来看,2月龄、5月龄、9月龄马口鱼呈递增关系,但2月龄、5月龄存在显著性差异,5月龄、9月龄马口鱼无显著性差异;从体长来看,2月龄、5月龄、9月龄马口鱼也呈递增关系,2月龄、5月龄、9月龄马口鱼之间均存在显著性差异;从肥满度来看,5月龄与2月龄、9月龄马口鱼均存在显著性差异,2月龄、9月龄马口鱼无显著性差异,2月龄、5月龄、9月龄马口鱼呈先增长后下降关系。养殖水质检测结果显示：2月龄、5月龄、9月龄马口鱼养殖水质pH值和养殖水温均有显著性差异,2月龄、5月龄马口鱼的溶解氧无显著性差异;2月龄、9月龄马口鱼溶解氧存在显著性差异,5月龄、9月龄马口鱼溶解氧存在显著性差异。微生物分析描述物种丰富度的指标中,从ACE来看,2月龄、5月龄马口鱼存在显著性差异,而9月龄和2月龄、5月龄马口鱼均无显著性差异;从Chaol指数来看,2...     

衢州地区渔业水域水库水体富营养化水平及驱动因子研究

为探求衢州市渔业水域水库水体富营养化水平和主要驱动因子，本研究基于2018年水质监测数据，综合评价黄坛口水库(S1)、铜山源水库(S2)、狮子口水库(S3)、花园垄水库(S4)和金仓垅水库(S5) 5座不同水库水体富营养化水平，并采用相关性分析、主成分分析探讨水质环境因子对水体富营养化水平间的影响和相关关系。结果显示，叶绿素a (Chl-a)与综合营养状态指数法评价结果趋于一致，表明S1、S2和S3水库均为中营养，S4为轻度富营养，S5为重度富营养，水产养殖水域富营养化水平显著高于增殖放流水域(P<0.05)。5个水库中，S5为氮限制，其余水库均为磷限制。多元线性逐步回归分析表明，Chl-a与溶解氧(DO)、透明度(SD)、铜(Cu)、总磷(TP)、总氮(TN)、高锰酸盐指数(CODMn)的相关性较好，综合营养状态指数(TLI)与水温(T)、SD、Cu、TP、TN的相关性较好，得到模型：Chl-a=19.793 CODMn–32.065 TP–33.004，TLI =1.062 CODMn + 18.468 TP–0.06 SD +0.450 T+1.765 TN+33.886。综合相关性分析、主成分分析结果，CODMn、TP、SD、T和TN是影响衢州市水库水体富营养化的主要因子，其中，氮、磷营养盐和有机物是造成水库水体富营养化的主要影响因子，水温是造成各水库富营养化季节性变化的主要原因，而pH、溶解氧是水体富营养化后的结果，可以作为水库富营养化水平的指示因子。     

草鱼呼肠孤病毒HZ08株抗体IPMA检测方法的建立及应用

为建立一种检测草鱼呼肠孤病毒HZ08株(HZ08)抗体的免疫学方法,本实验以接种HZ08病毒的细胞培养板为抗原板,以免疫弱毒疫苗的草鱼血清为抗体,通过反应条件优化,建立了检测GCRV HZ08血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞实验(IPMA)方法,并对该方法特异性、敏感性、重复性、与ELISA检测结果的符合率及对临床血清样品的检测效果等进行了验证。结果显示,HZ08株种毒按照1×103拷贝/μL浓度接种后72h固定,HRP-Ig G二抗1∶1000稀释,待检血清1∶100稀释时效果最佳;该IPMA方法与草鱼阴性血清、免疫细菌三联疫苗的草鱼血清、感染GCRV JX0901(GCRVⅠ型)的草鱼血清无交叉反应;GCRV HZ08株阳性血清稀释至1∶800时仍能检出;批内和批间重复性实验显示,该方法具有良好的重复性;符合性实验结果显示,该IPMA方法与ELSIA方法的阳性和阴性符合率分别为95.7%和87.5%;用建立的IPMA方法检测草鱼出血病弱毒疫苗免疫草鱼,免疫2周后抗体水平达到峰值;对现地送检的126份草鱼血清样本进行检测,平均检出阳性率为72.2%。研究表明,建立的HZ08株IPMA方法特异性强、重复性好、敏感性高,为GCRVⅡ型的流行病学调查、疫苗免疫效果评价及抗原抗体检测提供了一种有效的检测手段。     

哈维氏弧菌GYC1108-1胞外蛋白酶的制备及免疫原性研究

胞外蛋白酶(ECPase)是哈维氏弧菌GYC1108-1胞外产物的主要致病因子,经鉴定其为半胱氨酸蛋白酶,分子量约55kD,能够分解脱脂奶中的酪蛋白,命名为1108-ECPase。本实验建立了胞外蛋白酶活性平板法检测1108-ECPase和YZ-ECPase的相对酶活(YZ为由本实验室构建的能够分泌目的蛋白酶的重组菌),并利用这个方法确定了细菌分泌ECPase达最高峰的培养时间为36h,粗提ECPase最适的饱和硫酸铵浓度为70%。GYC1108-1和YZ培养上清经硫酸铵盐析,SephadexG-25凝胶过柱后,得到较为纯化的1108-ECPase和YZ-ECPase。选择白油、蜂胶和弗氏3种不同佐剂与适量抗原混匀,分别免疫3只ICR小鼠,并设不加佐剂免疫组及空白组作为对照。3次免疫后制备小鼠血清,间接ELISA测定抗体效价,除空白对照外,其他8组小鼠的免疫血清效价达1∶1.6×104～1∶2.56×105,免疫组的效价从高到低依次为弗氏白油蜂胶不加佐剂,不同佐剂的免疫效果依次为:弗氏白油蜂胶。免疫印迹实验结果表明,小鼠血清在55kD处有明显的反应条带。